玉米低磷胁迫SSH文库中重要基因的表达分析及PAPP基因的序列变异
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-24页 |
| ·土壤磷素形态 | 第13页 |
| ·磷素现状 | 第13-15页 |
| ·全球土壤磷素现状 | 第13-14页 |
| ·中国土壤磷素现状 | 第14页 |
| ·植物磷素现状 | 第14-15页 |
| ·植物耐低磷的适应机理 | 第15-18页 |
| ·形态学的适应 | 第15-16页 |
| ·生理生化的适应 | 第16页 |
| ·分子水平的适应 | 第16-18页 |
| ·玉米耐低磷研究现状 | 第18页 |
| ·实时荧光定量PCR技术 | 第18-21页 |
| ·FQ-PCR几个重要参数 | 第19页 |
| ·实时荧光PCR的分类 | 第19-20页 |
| ·荧光定量PCR在植物中的应用 | 第20-21页 |
| ·侯选基因简介 | 第21-24页 |
| ·紫色酸性磷酸酶 | 第21-22页 |
| ·紫色酸性磷酸酶前体 | 第22页 |
| ·S-型三磷酸腺苷双磷酸酶 | 第22-23页 |
| ·假定氨基醇磷酸转移酶基因 | 第23页 |
| ·生长素诱导蛋白 | 第23页 |
| ·B73丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 | 第23-24页 |
| ·CIPK类蛋白质 | 第24页 |
| 2 研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-31页 |
| ·实验材料处理 | 第25页 |
| ·实验材料的取材 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26页 |
| ·文库插入cDNA片段克隆的PCR检测 | 第26-27页 |
| ·序列测定分析和基因功能预测 | 第27页 |
| ·总RNA提取 | 第27-28页 |
| ·基因组DNA提取 | 第28页 |
| ·RNA反转录为cDNA | 第28-29页 |
| ·差异基因表达分析 | 第29-31页 |
| ·引物的特异性检测 | 第29-30页 |
| ·回收产物 | 第30页 |
| ·标准品的制备和标准曲线的优化 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第31页 |
| ·重要基因分子标记开发 | 第31页 |
| 4 结果分析 | 第31-63页 |
| ·文库插入片段的检测 | 第31-32页 |
| ·RNA的质量检测 | 第32页 |
| ·反转录效果检测 | 第32页 |
| ·实时荧光定量相对表达量差异分析 | 第32-41页 |
| ·看家基因和目的基因的特异引物序列 | 第32-33页 |
| ·看家基因和目的基因的溶解曲线 | 第33-35页 |
| ·看家基因和目的基因的标准曲线 | 第35-38页 |
| ·七个基因的表达分析 | 第38-41页 |
| ·玉米中七个候选基因生物信息学分析 | 第41-56页 |
| ·PAPP基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第41-43页 |
| ·PAP基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·AP基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第46-48页 |
| ·APY基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第48-49页 |
| ·CIPK基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第49-53页 |
| ·AAPT基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第53-56页 |
| ·STPK基因编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第56页 |
| ·不同材料中PAPP基因的序列特征分析 | 第56-63页 |
| ·PAPP基因的全长序列分析 | 第57页 |
| ·引物的筛选 | 第57-58页 |
| ·差异片段的序列比对 | 第58-63页 |
| 5 讨论 | 第63-69页 |
| ·提取RNA条件的优化 | 第63-64页 |
| ·实时荧光定量的条件优化 | 第64页 |
| ·基因的表达分析 | 第64-66页 |
| ·PAPP基因的序列变异分析 | 第66-69页 |
| 6 后续实验设想 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
