摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-15页 |
1 植物黄酮 | 第9-12页 |
·植物黄酮的分布和分类 | 第9页 |
·黄酮类化合物的合成途径 | 第9-11页 |
·植物黄酮的生理生化作用 | 第11-12页 |
·抗氧化作用 | 第11页 |
·参与花色形成 | 第11页 |
·抵抗病原体 | 第11-12页 |
·保健作用 | 第12页 |
2 荞麦黄酮的研究进展 | 第12-13页 |
3 黄酮醇合酶(FLS)研究进展 | 第13-14页 |
·FLS的基因结构及催化功能 | 第13页 |
·FLS在植物中的表达 | 第13-14页 |
4 研究目的及意义 | 第14-15页 |
第二章 苦荞黄酮醇合酶基因保守片段的克隆 | 第15-23页 |
1 材料与方法 | 第15-19页 |
·材料 | 第15-16页 |
·植物材料及菌株 | 第15页 |
·实验试剂 | 第15页 |
·实验仪器 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-19页 |
·引物设计 | 第16页 |
·RNA提取 | 第16-17页 |
·第一链cDNA合成 | 第17页 |
·Fls基因保守片段PCR扩增 | 第17页 |
·PCR产物纯化 | 第17页 |
·连接 | 第17-18页 |
·转化 | 第18页 |
·阳性克隆鉴定 | 第18-19页 |
2 结果与分析 | 第19-21页 |
·RNA质量检测 | 第19页 |
·Fls基因保守片段PCR扩增 | 第19-20页 |
·序列测定及分析 | 第20-21页 |
3 讨论 | 第21-23页 |
·RNA质量 | 第21页 |
·引物的设计 | 第21-23页 |
第三章 苦荞黄酮醇合酶基因全长cDNA的克隆 #15及序列分析 | 第23-36页 |
1 材料与方法 | 第23-27页 |
·材料 | 第23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·引物设计 | 第23-24页 |
·RNA提取 | 第24页 |
·cDNA 5’末端快速扩增(5'RACE) | 第24-25页 |
·cDNA 3’末端快速扩增(3'RACE) | 第25-27页 |
·扩增产物的T载体克隆及测序 | 第27页 |
·全长cDNA的获得 | 第27页 |
2 结果与分析 | 第27-34页 |
·苦荞Fls基因cDNA的5'RACE和3'RACE | 第27-28页 |
·苦荞Fls基因全长cDNA的PCR | 第28-29页 |
·序列测定及分析 | 第29-33页 |
·核苷酸序列分析 | 第30-31页 |
·氨基酸序列分析 | 第31-33页 |
·苦荞FLS二级结构分析 | 第33-34页 |
·苦荞FLS三级结构分析 | 第34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
·关于RACE技术 | 第34-35页 |
·植物黄酮醇合酶结构与功能 | 第35-36页 |
第四章 苦荞花期黄酮醇合酶基因的表达分析 | 第36-45页 |
1 材料与方法 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·植物材料 | 第36页 |
·实验试剂 | 第36页 |
·实验仪器 | 第36页 |
·方法 | 第36-39页 |
·引物的设计 | 第36-37页 |
·样品的采集及处理 | 第37页 |
·RNA的提取 | 第37页 |
·第一链cDNA的合成 | 第37页 |
·Fls基因半定量RT-PCR表达分析 | 第37-39页 |
2 结果与分析 | 第39-42页 |
·RNA质量检测 | 第39-40页 |
·苦荞Fls基因和H3基因半定量RT-PCR循环数的确定 | 第40页 |
·苦荞Fls基因和H3基因半定量RT-PCR引物使用量的确定 | 第40-41页 |
·苦荞花期Fls基因表达分析 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-45页 |
·半定量RT-PCR技术 | 第42-43页 |
·植物Fls基因的表达调控 | 第43页 |
·荞麦组织中的黄酮含量 | 第43-44页 |
·展望 | 第44-45页 |
结论与创新点 | 第45-46页 |
1 本研究的结论 | 第45页 |
2 本研究的创新点 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
攻读硕士学位期间在NCBI注册的基因序列 | 第51页 |