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苦荞MYB转录因子基因的克隆及转录激活功能鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-19页
 1. 植物类黄酮第11页
 2. 植物类黄酮的代谢调控第11-13页
 3. 植物MYB转录因子研究进展第13-16页
   ·MYB转录因子的结构特征与分类第14页
   ·MYB转录因子的功能第14-16页
     ·参与植物细胞的形态与模式建成第14-15页
     ·参与对植物激素和外界环境压力的应答第15-16页
     ·对类黄酮代谢途径的调控第16页
 4 苦荞类黄酮及其代谢第16-17页
   ·苦荞类黄酮第16-17页
   ·苦荞类黄酮的代谢第17页
 5 研究目的及意义第17-19页
第二章 苦荞MYB转录因子基因的克隆及序列分析第19-38页
 1 材料与方法第19-26页
   ·材料第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·菌株与载体第19页
     ·主要试剂第19页
     ·培养基第19页
     ·主要仪器第19-20页
   ·方法第20-26页
     ·苦荞总RNA提取第20页
     ·制备第一链cDNA第20-21页
     ·MYB基因保守片段的克隆第21-22页
     ·RACE法扩增苦荞MYB基因3’端cDNA序列第22-23页
     ·RACE法扩增苦荞MYB基因5’端cDNA序列第23-24页
     ·苦荞MYB基因cDNA编码序列和DNA序列的克隆第24-25页
     ·苦荞MYB基因的生物信息学分析第25-26页
 2. 结果与分析第26-36页
   ·苦荞MYB基因保守片段的克隆第26-27页
   ·RACE法扩增苦荞MYB基因cDNA序列第27-28页
     ·RACE扩增3’端未知序列第27页
     ·RACE扩增5’端未知序列第27-28页
   ·苦荞MYB基因cDNA编码序列和DNA序列的克隆第28-29页
   ·苦荞MYB基因的序列分析第29-36页
     ·MYB基因的序列特征和编码蛋白的结构预测第29-30页
     ·MYB基因编码蛋白的三维空间结构预测第30页
     ·MYB基因编码蛋白的序列比对与系统进化树构建第30-36页
 3. 讨论第36-38页
   ·苦荞MYB基因的系统进化树分析第36页
   ·苦荞MYB基因的内含子分析第36-37页
   ·功能分析第37-38页
第三章 苦荞MYB转录因子转录激活功能的验证第38-49页
 1. 材料与方法第38-42页
   ·材料第38-39页
     ·所用菌株和载体第38页
     ·酵母培养基第38页
     ·酵母单杂交中所用的溶液及缓冲液第38-39页
   ·方法第39-42页
     ·引物设计第39-40页
     ·酵母表达重组质粒的构建第40页
     ·重组质粒的大肠杆菌转化及菌落PCR鉴定第40页
     ·重组质粒的小量提取及酶切鉴定第40页
     ·酵母转化第40-41页
     ·β-半乳糖苷酶活性的滤纸分析第41页
     ·β-半乳糖苷酶活性的测定第41-42页
 2 结果与分析第42-47页
   ·重组质粒的构建第42-44页
   ·重组质粒的酶切鉴定第44-45页
   ·重组质粒的测序分析第45页
   ·重组质粒的酵母转化第45-46页
   ·转化菌株β-半乳糖苷酶活性的滤纸分析第46-47页
   ·转化菌株β-半乳糖苷酶活性的测定第47页
 3 讨论第47-49页
   ·酵母单杂交技术第47-48页
   ·苦荞MYB转录因子的转录活性第48-49页
   ·展望第49页
小结第49-50页
参考文献第50-54页
致谢第54-55页
攻读学位期间发表的学术论文第55页
攻读学位期间发表在GenBank中登陆的基因序列第55页

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