摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1. 植物类黄酮 | 第11页 |
2. 植物类黄酮的代谢调控 | 第11-13页 |
3. 植物MYB转录因子研究进展 | 第13-16页 |
·MYB转录因子的结构特征与分类 | 第14页 |
·MYB转录因子的功能 | 第14-16页 |
·参与植物细胞的形态与模式建成 | 第14-15页 |
·参与对植物激素和外界环境压力的应答 | 第15-16页 |
·对类黄酮代谢途径的调控 | 第16页 |
4 苦荞类黄酮及其代谢 | 第16-17页 |
·苦荞类黄酮 | 第16-17页 |
·苦荞类黄酮的代谢 | 第17页 |
5 研究目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 苦荞MYB转录因子基因的克隆及序列分析 | 第19-38页 |
1 材料与方法 | 第19-26页 |
·材料 | 第19-20页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株与载体 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·培养基 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-26页 |
·苦荞总RNA提取 | 第20页 |
·制备第一链cDNA | 第20-21页 |
·MYB基因保守片段的克隆 | 第21-22页 |
·RACE法扩增苦荞MYB基因3’端cDNA序列 | 第22-23页 |
·RACE法扩增苦荞MYB基因5’端cDNA序列 | 第23-24页 |
·苦荞MYB基因cDNA编码序列和DNA序列的克隆 | 第24-25页 |
·苦荞MYB基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
2. 结果与分析 | 第26-36页 |
·苦荞MYB基因保守片段的克隆 | 第26-27页 |
·RACE法扩增苦荞MYB基因cDNA序列 | 第27-28页 |
·RACE扩增3’端未知序列 | 第27页 |
·RACE扩增5’端未知序列 | 第27-28页 |
·苦荞MYB基因cDNA编码序列和DNA序列的克隆 | 第28-29页 |
·苦荞MYB基因的序列分析 | 第29-36页 |
·MYB基因的序列特征和编码蛋白的结构预测 | 第29-30页 |
·MYB基因编码蛋白的三维空间结构预测 | 第30页 |
·MYB基因编码蛋白的序列比对与系统进化树构建 | 第30-36页 |
3. 讨论 | 第36-38页 |
·苦荞MYB基因的系统进化树分析 | 第36页 |
·苦荞MYB基因的内含子分析 | 第36-37页 |
·功能分析 | 第37-38页 |
第三章 苦荞MYB转录因子转录激活功能的验证 | 第38-49页 |
1. 材料与方法 | 第38-42页 |
·材料 | 第38-39页 |
·所用菌株和载体 | 第38页 |
·酵母培养基 | 第38页 |
·酵母单杂交中所用的溶液及缓冲液 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-42页 |
·引物设计 | 第39-40页 |
·酵母表达重组质粒的构建 | 第40页 |
·重组质粒的大肠杆菌转化及菌落PCR鉴定 | 第40页 |
·重组质粒的小量提取及酶切鉴定 | 第40页 |
·酵母转化 | 第40-41页 |
·β-半乳糖苷酶活性的滤纸分析 | 第41页 |
·β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-47页 |
·重组质粒的构建 | 第42-44页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第44-45页 |
·重组质粒的测序分析 | 第45页 |
·重组质粒的酵母转化 | 第45-46页 |
·转化菌株β-半乳糖苷酶活性的滤纸分析 | 第46-47页 |
·转化菌株β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
·酵母单杂交技术 | 第47-48页 |
·苦荞MYB转录因子的转录活性 | 第48-49页 |
·展望 | 第49页 |
小结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
攻读学位期间发表在GenBank中登陆的基因序列 | 第55页 |