目录 | 第1-5页 |
致谢 | 第5-7页 |
缩写符号说明 | 第7-8页 |
前言 | 第8-17页 |
1 文献综述 | 第8-15页 |
·Thaumatin的发现历史及生化特性 | 第8-9页 |
·Thaumatin的甜味机理 | 第9-10页 |
·Thaumatin的生理功能 | 第10-11页 |
·Thaumatin的基因工程 | 第11-13页 |
·Thaumatin在原核生物中的表达 | 第11-12页 |
·Thaumatin在真菌中的表达 | 第12-13页 |
·Thaumatin在植物中的表达 | 第13页 |
·研究意义 | 第13-14页 |
·挑战与前景 | 第14-15页 |
2 本论文实验设计流程图 | 第15-17页 |
·玉米篇 | 第15-16页 |
·酵母篇 | 第16-17页 |
第一篇 奇异果甜蛋白thaumatin基因与蛋白二硫键异构酶PDI基因在玉米中的共表达 | 第17-50页 |
摘要 | 第17-19页 |
Abstract | 第19-21页 |
第一部分 材料和方法 | 第21-38页 |
·试验材料 | 第21-23页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌种和质粒 | 第21页 |
·酶和生化试剂 | 第21-22页 |
·抗生素和生长激素 | 第22-23页 |
·引物 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-38页 |
·培养基的配制 | 第23-25页 |
·thaumatin-PDI二价表达载体的构建 | 第25-35页 |
·表达载体对农杆菌的转化 | 第35页 |
·玉米胚性愈伤的获得 | 第35页 |
·转基因玉米抗生素筛选浓度的确定 | 第35-36页 |
·转基因玉米植株的获得 | 第36-37页 |
·转基因玉米的分子检测 | 第37-38页 |
第二部分 结果与讨论 | 第38-48页 |
·结果 | 第38-46页 |
·植物表达载体pCAMBIA1302-TP的构建 | 第38-43页 |
·将pCAMBIA1302-TP转入农杆菌中 | 第43页 |
·玉米胚性愈伤组织的获得 | 第43-44页 |
·转基因玉米抗生素筛选浓度的确定 | 第44页 |
·玉米的转化及再生 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第三部分 展望 | 第48-50页 |
第二篇 奇异果甜蛋白thaumatin基因在酵母中的表达 | 第50-71页 |
摘要 | 第50-51页 |
Abstract | 第51-52页 |
第一部分 材料和方法 | 第52-62页 |
·试验材料 | 第52-53页 |
·酵母菌菌种及质粒 | 第52页 |
·酶和生化试剂 | 第52页 |
·抗生素 | 第52-53页 |
·引物 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-62页 |
·培养基的配制 | 第53-54页 |
·表达载体pDBLeu-tha的构建 | 第54-56页 |
·表达载体对酵母菌的转化 | 第56-58页 |
·阳性转化子的PCR鉴定 | 第58-59页 |
·酵母菌蛋白分析 | 第59-62页 |
第二部分 结果与讨论 | 第62-69页 |
·结果 | 第62-67页 |
·酵母表达载体的构建 | 第62-66页 |
·阳性转化子的PCR检测 | 第66-67页 |
·酵母菌的SDS-PAGE检测 | 第67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
第三部分 展望 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
附录Ⅰ 化学药品的配制 | 第74-75页 |
附录Ⅱ 玉米表达载体及酵母表达载体测序图 | 第75-80页 |
附录Ⅲ 基因正义链全序列 | 第80-83页 |
附录Ⅳ 硕士期间发表或接收的论文及其他科研工作 | 第83页 |