摘要 | 第1-12页 |
ABSTRAC | 第12-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 文献综述 | 第18-54页 |
1 钙代谢调控研究进展 | 第19-37页 |
·研究动物体内钙代谢调控的意义 | 第19-22页 |
·促进营养学科的发展 | 第19-20页 |
·为动物遗传育种提供新的研究方向 | 第20页 |
·提高动物的繁殖力 | 第20-21页 |
·有利于疾病控制技术的研究 | 第21-22页 |
·钙代谢的整体调节 | 第22-26页 |
·钙代谢的营养生理调节 | 第22-24页 |
·食物及消化道因素对钙代谢的影响 | 第22-23页 |
·维生素D与钙代谢间的关系 | 第23-24页 |
·钙代谢的内分泌调控 | 第24-26页 |
·PTH与钙代谢 | 第24页 |
·CT与钙代谢 | 第24页 |
·性激素与钙代谢 | 第24-26页 |
·影响钙代谢的其它因素 | 第26页 |
·钙代谢的基因调控 | 第26-30页 |
·本章小结 | 第30页 |
参考文献: | 第30-37页 |
2 基因治疗及其在骨钙代谢性疾病防治中的应用 | 第37-54页 |
·基因治疗的概念与分类 | 第37-39页 |
·基因治疗 | 第37页 |
·基因治疗的分类 | 第37-39页 |
·基因矫正 | 第38页 |
·基因置换 | 第38页 |
·基因增强 | 第38-39页 |
·基因调节 | 第39页 |
·基因治疗技术研究内容与应用前景 | 第39-43页 |
·研究内容 | 第39-42页 |
·基因导入技术 | 第39-40页 |
·治疗基因运送载体的研究 | 第40-41页 |
·基因治疗靶细胞的选择 | 第41页 |
·基因治疗的靶向性 | 第41-42页 |
·基因治疗的临床应用前景 | 第42-43页 |
·基因治疗在骨科疾病防治中的应用 | 第43-47页 |
·骨愈合的基因治疗 | 第44-45页 |
·关节和软骨的基因治疗 | 第45-46页 |
·椎间盘疾病的基因治疗 | 第46页 |
·肌键和韧带的基因治疗 | 第46-47页 |
·骨钙代谢性疾病的基因治疗 | 第47页 |
·本章小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
第二部分 实验研究 | 第54-118页 |
3 鸡钙代谢调节相关基因的克隆与测序 | 第55-73页 |
·实验一:降钙素基因的克隆与序列分析 | 第55-60页 |
·材料与方法 | 第55-57页 |
·材料 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-57页 |
·实验结果与分析 | 第57-59页 |
·总RNA提取结果 | 第57页 |
·应用RT-PCR扩增cCT基因 | 第57页 |
·重组体的筛选 | 第57-58页 |
·测序结果 | 第58页 |
·同源性比较 | 第58页 |
·种属间比较 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
·实验二:甲状旁腺激素基因的克隆与序列分析 | 第60-64页 |
·材料与方法 | 第60-61页 |
·材料 | 第60页 |
·方法 | 第60-61页 |
·结果与分析 | 第61-63页 |
·总RNA提取结果 | 第61页 |
·RT-PCR产物电泳分析 | 第61-62页 |
·RT-PCR产物克隆 | 第62页 |
·鸡甲状旁腺素cDNA序列分析 | 第62-63页 |
·种属间PTH基因氨基酸序列分析 | 第63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·实验三:鸡CABP-D28K基因的克隆与序列分析 | 第64-70页 |
·材料与方法 | 第64-65页 |
·材料 | 第64页 |
·方法 | 第64-65页 |
·结果与分析 | 第65-68页 |
·总RNA的提取 | 第65页 |
·PCR产物电泳分析 | 第65-66页 |
·PCR产物的克隆 | 第66-67页 |
·测序结果 | 第67页 |
·序列分析 | 第67页 |
·种属间CaBP-D28k氨基酸同源性比较 | 第67-68页 |
·种属CaBP-D28k进化树 | 第68页 |
·种属CaBP-D28k氨基酸序列比较 | 第68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
·本章小结 | 第70页 |
参考文献 | 第70-73页 |
4 鸡钙代谢调节相关基因真核表达质粒的构建 | 第73-91页 |
·实验四鸡降钙素基因真核表达质粒的构建 | 第73-78页 |
·材料与方法 | 第73-76页 |
·材料 | 第73页 |
·方法 | 第73-76页 |
·结果与分析 | 第76-77页 |
·重组真核表达质粒的筛选 | 第76页 |
·重组真核表达质粒酶切结果 | 第76-77页 |
·重组真核表达质粒的PCR鉴定 | 第77页 |
·讨论 | 第77-78页 |
·实验五:鸡甲状旁腺激素基因真核表达质粒的构建 | 第78-82页 |
·材料与方法 | 第78-80页 |
·材料 | 第78页 |
·方法 | 第78-80页 |
·结果 | 第80-81页 |
·真核表达质粒pcDNA3-PTH构建鉴定 | 第80-81页 |
·真核表达质粒pCEP4-PTH构建鉴定 | 第81页 |
·讨论 | 第81-82页 |
·实验六:鸡CABP-D28K重组真核表达质粒的构建 | 第82-86页 |
·材料与方法 | 第82-85页 |
·材料 | 第82页 |
·方法 | 第82-85页 |
·结果与分析 | 第85-86页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第85页 |
·重组质粒的酶切分析 | 第85-86页 |
·讨论 | 第86页 |
·实验七:鸡CABP-D28K重组真核表达质粒的细胞表达 | 第86-88页 |
·材料与方法 | 第86-87页 |
·材料 | 第86页 |
·重组质粒在COS-Ⅰ细胞中的表达方法 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-88页 |
·本章小结 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-91页 |
5 钙代谢调节相关基因真核表达质粒在蛋鸡体内的表达及其对钙代谢的调节 | 第91-118页 |
·实验八:鸡降钙素CDNA在蛋鸡体内的表达 | 第91-99页 |
·材料与方法 | 第91-93页 |
·材料 | 第91-92页 |
·方法 | 第92-93页 |
·实验结果与分析 | 第93-97页 |
·血清中降钙素水平的变化 | 第93-94页 |
·重组降钙素基因质粒对甲状旁腺素分泌的影响 | 第94页 |
·重组鸡降钙素基因质粒对雌激素分泌的影响 | 第94-95页 |
·重组鸡降钙素基因对血清钙磷浓度的影响 | 第95-97页 |
·讨论 | 第97-99页 |
·蛋鸡体内主要钙代谢调节物浓度的变化 | 第97-98页 |
·重组基因质粒的表达效果 | 第98-99页 |
·实验九:鸡甲状旁腺激素基因CDNA在蛋鸡体内的表达 | 第99-106页 |
·材料与方法 | 第99-100页 |
·材料 | 第99页 |
·方法 | 第99-100页 |
·结果与分析 | 第100-104页 |
·重组质粒对鸡血清中甲状旁腺激素浓度的影响 | 第100-101页 |
·重组质粒对鸡血清降钙素浓度的影响 | 第101-102页 |
·注射重组质粒对鸡血清雌二醇浓度的影响 | 第102页 |
·不同质粒对鸡血清钙磷浓度的影响 | 第102-104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
·影响导入基因表达效果的因素 | 第104-105页 |
·本实验质粒在蛋鸡体内的表达效果 | 第105-106页 |
·实验十:鸡CABP-D28K重组质粒在蛋鸡体内的表达 | 第106-114页 |
·材料与方法 | 第106-107页 |
·材料 | 第106页 |
·实验方法 | 第106-107页 |
·结果与分析 | 第107-111页 |
·血清钙含量的变化 | 第107-108页 |
·血清中PTH含量的变化 | 第108-109页 |
·血清中CT含量的变化 | 第109-110页 |
·血清中E2含量的变化 | 第110-111页 |
·讨论 | 第111-114页 |
·重组CaBP-D28k质粒对鸡钙代谢的影响 | 第111-112页 |
·其他影响钙代谢因素的探讨 | 第112-114页 |
·本章小结 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-118页 |
全文结论 | 第118-119页 |
创新 | 第119-120页 |
附录1:在读期间发表论文(著)和申请专利 | 第120-122页 |
附录2:基因测序图 | 第122-126页 |
致谢 | 第126页 |