中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
第一章 骨关节炎相关Smad3突变基因的克隆及其初步的功能分析 | 第6-20页 |
·前言 | 第6-8页 |
·材料与方法 | 第8-12页 |
·试剂与仪器 | 第8-9页 |
·pCMV-Smad3-mt表达载体的构建 | 第9页 |
·pCMV-Smad3-mt表达载体的鉴定 | 第9页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养 | 第9-10页 |
·成纤维细胞基因型的鉴定 | 第10-11页 |
·成纤维细胞的瞬时转染 | 第11页 |
·MMP-2和MMP-9的活性测定 | 第11页 |
·Western-Blot | 第11-12页 |
·结果 | 第12-16页 |
·pBluescrip~RⅡKS-Smad3-mt载体的构建及鉴定 | 第12页 |
·pCMV-Smad3-mt表达载体的构建鉴定 | 第12-13页 |
·Smad3突变体不能抑制Smad3缺陷型成纤维细胞中MMP-9的表达 | 第13-15页 |
·Smad3突变体不能抑制Smad3缺陷型成纤维细胞中MMP-2的表达 | 第15-16页 |
·讨论 | 第16-20页 |
·小片段DNA的克隆 | 第16-17页 |
·Smad3突变体与骨节炎的关系 | 第17-20页 |
第二章 成骨细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠的鉴定 | 第20-32页 |
·前言 | 第20-21页 |
·材料与方法 | 第21-24页 |
·试剂与仪器 | 第21页 |
·小鼠鼠尾基因组DNA的制备 | 第21-22页 |
·探针的制备 | 第22页 |
·DNA放射性探针的标记和检测 | 第22页 |
·转基因小鼠的基因型鉴定 | 第22-24页 |
·Cre重组酶活性检测 | 第24页 |
·结果 | 第24-30页 |
·成骨细胞特异性Cre重组酶转基因载体构建与鉴定 | 第24-25页 |
·显微注射法获得成骨细胞特异性Cre重组酶转基因首建者小鼠 | 第25页 |
·成骨细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠鉴定 | 第25-27页 |
·Cre重组酶组织特异性表达的检测 | 第27-29页 |
·成骨细胞特异性剔除Smad4转基因小鼠的初步观察 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
总结 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
发表文章 | 第36-44页 |
致谢 | 第44页 |