中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
1 植物光合作用的光抑制及叶黄素循环的光保护机制 | 第15-27页 |
·光合作用的光抑制 | 第15-17页 |
·植物体内的叶黄素循环 | 第17-27页 |
·叶黄素循环组分及机制 | 第17页 |
·叶黄素循环中色素的定位 | 第17-19页 |
·叶黄素循环的功能 | 第19-23页 |
·叶黄素循环的调控 | 第23-25页 |
·叶黄素循环的关键酶分离及其cDNA克隆和表达 | 第25-27页 |
2 立论依据、意义及研究内容 | 第27-30页 |
·立论依据及意义 | 第27-29页 |
·研究内容 | 第29-30页 |
第二章 茶树叶片光合作用的光抑制 | 第30-41页 |
1 材料与方法 | 第30-31页 |
·材料 | 第30页 |
·处理 | 第30-31页 |
·干旱处理 | 第30页 |
·光抑制处理 | 第30-31页 |
·测定 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-38页 |
·叶片光合速率的日变化 | 第31-32页 |
·午间强光对叶片表观量子效率的影响 | 第32-33页 |
·午间强光对叶片细胞间隙CO_2浓度的影响 | 第33页 |
·叶绿素荧光参数的日变化和对强光的响应 | 第33-35页 |
·光抑制的恢复 | 第35页 |
·干旱胁迫对PSⅡ光化学效率的影响 | 第35-37页 |
·不同叶龄叶片的光抑制比较 | 第37-38页 |
3 讨论与小结 | 第38-41页 |
·讨论 | 第38-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第三章 叶黄素循环对茶树光抑制破坏的防御作用 | 第41-59页 |
1 材料与方法 | 第41-43页 |
·材料 | 第41页 |
·方法 | 第41-43页 |
·叶黄素循环抑制剂的引入 | 第41页 |
·遮荫和干旱处理 | 第41页 |
·光抑制处理 | 第41页 |
·叶黄素循环组分的变化 | 第41-42页 |
·叶绿素荧光参数的测定 | 第42页 |
·叶黄素循环组分的HPLC分析 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-54页 |
·叶黄素循环组分的HPLC分离与鉴定 | 第43-45页 |
·标准曲线的确定 | 第43-44页 |
·茶树鲜叶中叶黄素循环组分的鉴定 | 第44-45页 |
·保留时间的重复性和精密度分析 | 第45页 |
·DTT对茶树叶黄素循环和荧光参数的影响 | 第45-49页 |
·茶树叶片中绿素和叶黄素循环组分含量变化特征 | 第49-53页 |
·叶绿素变化特征 | 第49-50页 |
·叶黄素循环库的变化特征 | 第50-51页 |
·叶黄素循环的脱环氧化状态变化特征 | 第51-53页 |
·非光化学猝灭与叶黄素循环组分间的相关分析 | 第53-54页 |
3 讨论与小结 | 第54-59页 |
·讨论 | 第54-57页 |
·小结 | 第57-59页 |
第四章 茶树VDE基因的cDNA克隆与序列特征的生物信息学分析 | 第59-82页 |
1 材料与方法 | 第59-65页 |
·材料 | 第59页 |
·方法 | 第59-65页 |
·茶树叶片总RNA的提取与鉴定 | 第59-60页 |
·cDNA第一链的合成 | 第60-61页 |
·cDNA特异片段的RT-PCR扩增 | 第61页 |
·cDNA 3’/5’端的RACE-PCR扩增 | 第61-62页 |
·全长PCR扩增 | 第62页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第62-63页 |
·PCR产物的克隆与阳性克隆的鉴定和测序 | 第63-65页 |
·蛋白质结构分析和预测 | 第65页 |
2 结果与分析 | 第65-78页 |
·茶树叶片总RNA的提取鉴定 | 第65页 |
·VDE cDNA特异片段的RT-PCR扩增与鉴定 | 第65-66页 |
·VDE cDNA的3’/5’-RACE扩增与鉴定 | 第66-68页 |
·全长序列的扩增与鉴定 | 第68页 |
·茶树VDE cDNA全序列及其蛋白质特征分析 | 第68-70页 |
·VDE cDNA全序列分析 | 第68-69页 |
·蛋白质特征分析 | 第69-70页 |
·植物VDE的序列分析与结构功能预测 | 第70-78页 |
·VDE核酸和氨基酸序列分析 | 第70-72页 |
·VDE转运肽的比较分析 | 第72页 |
·VDE成熟蛋白结构与序列模式的预测及比较 | 第72-77页 |
·VDE的疏水性分析 | 第77-78页 |
·VDE系统进化树的分析 | 第78页 |
3 讨论与小节 | 第78-82页 |
·讨论 | 第78-80页 |
·小结 | 第80-82页 |
第五章 茶树VDE基因cDNA的体外表达 | 第82-92页 |
1 材料与方法 | 第82-86页 |
·材料 | 第82页 |
·方法 | 第82-86页 |
·茶树VDE成熟蛋白编码区序列的扩增 | 第82-83页 |
·PCR扩增产物的纯化回收 | 第83页 |
·重组表达质粒构建和重组菌株筛选 | 第83-85页 |
·重组菌株的诱导表达 | 第85页 |
·表达蛋白的亲和纯化 | 第85-86页 |
·表达蛋白分子量确定 | 第86页 |
2 结果与分析 | 第86-90页 |
·茶树VDE成熟蛋白编码区序列片段的获得 | 第86页 |
·重组表达质粒的构建和鉴定 | 第86-88页 |
·重组表达载体的诱导表达 | 第88-90页 |
3 讨论与小结 | 第90-92页 |
·讨论 | 第90-91页 |
·小结 | 第91-92页 |
第六章 茶树VDE基因cDNA的体外定点突变、表达和活性鉴定 | 第92-102页 |
1 材料与方法 | 第92-96页 |
·材料 | 第92页 |
·方法 | 第92-96页 |
·定点突变位点的确定 | 第92页 |
·定点突变 | 第92-95页 |
·表达载体构建 | 第95页 |
·重组菌株的诱导表达、亲和纯化、分子量的确定和定量 | 第95-96页 |
·VDE表达蛋白的体外活性测定 | 第96页 |
·叶黄素循环组分的HPLC分析 | 第96页 |
2 结果与分析 | 第96-99页 |
·定点突变体的获得 | 第96页 |
·重组表达载体的构建 | 第96-98页 |
·重组表达载体的诱导表达 | 第98页 |
·表达蛋白酶促反应产物的HPLC分析 | 第98-99页 |
3 讨论与小节 | 第99-102页 |
·讨论 | 第100-101页 |
·小结 | 第101-102页 |
总结 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-116页 |
附录 | 第116-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
作者简介与攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第119页 |