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叶黄素循环对茶树光抑制破坏的防御及其关键酶基因的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-15页
第一章 文献综述第15-30页
 1 植物光合作用的光抑制及叶黄素循环的光保护机制第15-27页
   ·光合作用的光抑制第15-17页
   ·植物体内的叶黄素循环第17-27页
     ·叶黄素循环组分及机制第17页
     ·叶黄素循环中色素的定位第17-19页
     ·叶黄素循环的功能第19-23页
     ·叶黄素循环的调控第23-25页
     ·叶黄素循环的关键酶分离及其cDNA克隆和表达第25-27页
 2 立论依据、意义及研究内容第27-30页
   ·立论依据及意义第27-29页
   ·研究内容第29-30页
第二章 茶树叶片光合作用的光抑制第30-41页
 1 材料与方法第30-31页
   ·材料第30页
   ·处理第30-31页
     ·干旱处理第30页
     ·光抑制处理第30-31页
   ·测定第31页
 2 结果与分析第31-38页
   ·叶片光合速率的日变化第31-32页
   ·午间强光对叶片表观量子效率的影响第32-33页
   ·午间强光对叶片细胞间隙CO_2浓度的影响第33页
   ·叶绿素荧光参数的日变化和对强光的响应第33-35页
   ·光抑制的恢复第35页
   ·干旱胁迫对PSⅡ光化学效率的影响第35-37页
   ·不同叶龄叶片的光抑制比较第37-38页
 3 讨论与小结第38-41页
   ·讨论第38-40页
   ·小结第40-41页
第三章 叶黄素循环对茶树光抑制破坏的防御作用第41-59页
 1 材料与方法第41-43页
   ·材料第41页
   ·方法第41-43页
     ·叶黄素循环抑制剂的引入第41页
     ·遮荫和干旱处理第41页
     ·光抑制处理第41页
     ·叶黄素循环组分的变化第41-42页
     ·叶绿素荧光参数的测定第42页
     ·叶黄素循环组分的HPLC分析第42-43页
 2 结果与分析第43-54页
   ·叶黄素循环组分的HPLC分离与鉴定第43-45页
     ·标准曲线的确定第43-44页
     ·茶树鲜叶中叶黄素循环组分的鉴定第44-45页
     ·保留时间的重复性和精密度分析第45页
   ·DTT对茶树叶黄素循环和荧光参数的影响第45-49页
   ·茶树叶片中绿素和叶黄素循环组分含量变化特征第49-53页
     ·叶绿素变化特征第49-50页
     ·叶黄素循环库的变化特征第50-51页
     ·叶黄素循环的脱环氧化状态变化特征第51-53页
   ·非光化学猝灭与叶黄素循环组分间的相关分析第53-54页
 3 讨论与小结第54-59页
   ·讨论第54-57页
   ·小结第57-59页
第四章 茶树VDE基因的cDNA克隆与序列特征的生物信息学分析第59-82页
 1 材料与方法第59-65页
   ·材料第59页
   ·方法第59-65页
     ·茶树叶片总RNA的提取与鉴定第59-60页
     ·cDNA第一链的合成第60-61页
     ·cDNA特异片段的RT-PCR扩增第61页
     ·cDNA 3’/5’端的RACE-PCR扩增第61-62页
     ·全长PCR扩增第62页
     ·PCR产物的纯化回收第62-63页
     ·PCR产物的克隆与阳性克隆的鉴定和测序第63-65页
     ·蛋白质结构分析和预测第65页
 2 结果与分析第65-78页
   ·茶树叶片总RNA的提取鉴定第65页
   ·VDE cDNA特异片段的RT-PCR扩增与鉴定第65-66页
   ·VDE cDNA的3’/5’-RACE扩增与鉴定第66-68页
   ·全长序列的扩增与鉴定第68页
   ·茶树VDE cDNA全序列及其蛋白质特征分析第68-70页
     ·VDE cDNA全序列分析第68-69页
     ·蛋白质特征分析第69-70页
   ·植物VDE的序列分析与结构功能预测第70-78页
     ·VDE核酸和氨基酸序列分析第70-72页
     ·VDE转运肽的比较分析第72页
     ·VDE成熟蛋白结构与序列模式的预测及比较第72-77页
     ·VDE的疏水性分析第77-78页
     ·VDE系统进化树的分析第78页
 3 讨论与小节第78-82页
   ·讨论第78-80页
   ·小结第80-82页
第五章 茶树VDE基因cDNA的体外表达第82-92页
 1 材料与方法第82-86页
   ·材料第82页
   ·方法第82-86页
     ·茶树VDE成熟蛋白编码区序列的扩增第82-83页
     ·PCR扩增产物的纯化回收第83页
     ·重组表达质粒构建和重组菌株筛选第83-85页
     ·重组菌株的诱导表达第85页
     ·表达蛋白的亲和纯化第85-86页
     ·表达蛋白分子量确定第86页
 2 结果与分析第86-90页
   ·茶树VDE成熟蛋白编码区序列片段的获得第86页
   ·重组表达质粒的构建和鉴定第86-88页
   ·重组表达载体的诱导表达第88-90页
 3 讨论与小结第90-92页
   ·讨论第90-91页
   ·小结第91-92页
第六章 茶树VDE基因cDNA的体外定点突变、表达和活性鉴定第92-102页
 1 材料与方法第92-96页
   ·材料第92页
   ·方法第92-96页
     ·定点突变位点的确定第92页
     ·定点突变第92-95页
     ·表达载体构建第95页
     ·重组菌株的诱导表达、亲和纯化、分子量的确定和定量第95-96页
     ·VDE表达蛋白的体外活性测定第96页
     ·叶黄素循环组分的HPLC分析第96页
 2 结果与分析第96-99页
   ·定点突变体的获得第96页
   ·重组表达载体的构建第96-98页
   ·重组表达载体的诱导表达第98页
   ·表达蛋白酶促反应产物的HPLC分析第98-99页
 3 讨论与小节第99-102页
   ·讨论第100-101页
   ·小结第101-102页
总结第102-103页
参考文献第103-116页
附录第116-118页
致谢第118-119页
作者简介与攻读博士学位期间发表的论文目录第119页

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