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BH3I-2诱导心磷脂的氧化和细胞色素C从线粒体的释放

英文摘要第1-7页
中文摘要第7-8页
前言第8-9页
1 实验材料第9页
2 细胞类型和细胞培养第9页
3 实验方法第9-12页
   ·MTT实验检测细胞毒性第9-10页
   ·采用流式细胞仪对BH3I-2’诱导白血病细胞凋亡的分析第10页
   ·活性氧(ROS)的测定第10页
   ·整体细胞水平分析膜电位(ΔΨm)和心磷脂(CL)的含量第10-11页
   ·线粒体的分离第11页
   ·线粒体水平分析膜电位(ΔΨm)和心磷脂(CL)的含量第11页
   ·Caspase-3活性的分析第11-12页
   ·免疫荧光法对线粒体内细胞色素C的定位第12页
   ·Western Blotting法分析N-乙酰半胱氨酸酶活性第12页
4 统计分析第12-13页
5 实验结果第13-17页
   ·H3I-2’诱导细胞毒性和凋亡呈细胞型特异性第13页
   ·BH3I-2’诱导细胞凋亡呈N-乙酰半胱氨酸酶依赖性第13-14页
   ·BH3I-2’诱导白血病细胞凋亡的敏感性与线粒体细胞色素C的释放相关第14页
   ·BH3I-2’诱导的线粒体内膜变化为非细胞型特异性第14-15页
   ·BH3I-2’诱导的凋亡在一定程度上与ROS的产生相关第15页
   ·从整体细胞水平分析,NAC只能部分地抑制BH3I-2’诱导的细胞凋亡第15-16页
   ·从线粒体水平分析,N-乙酰半胱氨酸能够抑制BH3I-2’诱导线粒体膜的损伤第16页
   ·BcL-2和Bcl-X_L能够抑制由BH3I-2’诱导线粒体的改变第16-17页
   ·BH3I-2’长时间诱导敏感性不同的白血病细胞凋亡反应仍保持一致的结果第17页
6 讨论第17-21页
7 附图第21-42页
 图1 BH31-2’诱导的白血病细胞株的细胞毒试验第21-22页
 图2.1 流式细胞术分析BH3I-2’诱导的CEM细胞凋亡第22-23页
 图2.2 流式细胞仪分析BH3I-2’诱导的CEM/VLB细胞凋亡第23-24页
 图2.3 流式细胞仪分析BH3I-2’诱导的K562细胞凋亡第24-25页
 图2.4 流式细胞仪分析BH3I-2’诱导的K/Bax细胞凋亡第25-26页
 图2.5 流式细胞术分析BH3I-2’诱导的凋亡呈时间依赖型第26-27页
 图3 BH3I-2’诱导pro-caspase-3的降低第27-28页
 图4 Z-VAD.fmk.抑制BH3I-2’诱导的细胞凋亡第28-29页
 图5 BH3I-2’诱导细胞色素C从线粒体的释放第29-31页
 图6 流式细胞术分析BH3I-2’诱导线粒体内膜的损伤第31-32页
 图7 流式细胞术分析BH3I-2’介导产生的活性氧第32-33页
 图8 NAC对BH3I-2’诱导细胞凋亡的抑制作用第33-35页
 图9.1 BH3I-2’诱导线粒体内膜损伤不能被CsA所抑制第35-36页
 图9.2 BH3I-2’诱导线粒体内膜损伤不能被BHA所抑制第36-37页
 图9.3 NAC能部分地抑制BH3I-2’诱导的细胞凋亡第37-38页
 图9.4 NAC能部分地抑制BH3I-2’诱导的线粒体内膜的损伤第38-39页
 图10.1 流式细胞术分析BH3I-2’介导线粒体ΔΨm及心磷脂的改变第39-40页
 图10.2 流式细胞术分析BH3I-2’介导线粒体心磷脂改变的比较第40-41页
 图11 流式细胞术比较BH3I-2’诱导敏感性不同的细胞凋亡呈时间依赖性第41-42页
8 致谢第42-43页
9 在校期间发表的文章第43-45页
10 参考文献第45-51页
11 英文全文第51-246页

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