英文摘要 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
前言 | 第8-9页 |
1 实验材料 | 第9页 |
2 细胞类型和细胞培养 | 第9页 |
3 实验方法 | 第9-12页 |
·MTT实验检测细胞毒性 | 第9-10页 |
·采用流式细胞仪对BH3I-2’诱导白血病细胞凋亡的分析 | 第10页 |
·活性氧(ROS)的测定 | 第10页 |
·整体细胞水平分析膜电位(ΔΨm)和心磷脂(CL)的含量 | 第10-11页 |
·线粒体的分离 | 第11页 |
·线粒体水平分析膜电位(ΔΨm)和心磷脂(CL)的含量 | 第11页 |
·Caspase-3活性的分析 | 第11-12页 |
·免疫荧光法对线粒体内细胞色素C的定位 | 第12页 |
·Western Blotting法分析N-乙酰半胱氨酸酶活性 | 第12页 |
4 统计分析 | 第12-13页 |
5 实验结果 | 第13-17页 |
·H3I-2’诱导细胞毒性和凋亡呈细胞型特异性 | 第13页 |
·BH3I-2’诱导细胞凋亡呈N-乙酰半胱氨酸酶依赖性 | 第13-14页 |
·BH3I-2’诱导白血病细胞凋亡的敏感性与线粒体细胞色素C的释放相关 | 第14页 |
·BH3I-2’诱导的线粒体内膜变化为非细胞型特异性 | 第14-15页 |
·BH3I-2’诱导的凋亡在一定程度上与ROS的产生相关 | 第15页 |
·从整体细胞水平分析,NAC只能部分地抑制BH3I-2’诱导的细胞凋亡 | 第15-16页 |
·从线粒体水平分析,N-乙酰半胱氨酸能够抑制BH3I-2’诱导线粒体膜的损伤 | 第16页 |
·BcL-2和Bcl-X_L能够抑制由BH3I-2’诱导线粒体的改变 | 第16-17页 |
·BH3I-2’长时间诱导敏感性不同的白血病细胞凋亡反应仍保持一致的结果 | 第17页 |
6 讨论 | 第17-21页 |
7 附图 | 第21-42页 |
图1 BH31-2’诱导的白血病细胞株的细胞毒试验 | 第21-22页 |
图2.1 流式细胞术分析BH3I-2’诱导的CEM细胞凋亡 | 第22-23页 |
图2.2 流式细胞仪分析BH3I-2’诱导的CEM/VLB细胞凋亡 | 第23-24页 |
图2.3 流式细胞仪分析BH3I-2’诱导的K562细胞凋亡 | 第24-25页 |
图2.4 流式细胞仪分析BH3I-2’诱导的K/Bax细胞凋亡 | 第25-26页 |
图2.5 流式细胞术分析BH3I-2’诱导的凋亡呈时间依赖型 | 第26-27页 |
图3 BH3I-2’诱导pro-caspase-3的降低 | 第27-28页 |
图4 Z-VAD.fmk.抑制BH3I-2’诱导的细胞凋亡 | 第28-29页 |
图5 BH3I-2’诱导细胞色素C从线粒体的释放 | 第29-31页 |
图6 流式细胞术分析BH3I-2’诱导线粒体内膜的损伤 | 第31-32页 |
图7 流式细胞术分析BH3I-2’介导产生的活性氧 | 第32-33页 |
图8 NAC对BH3I-2’诱导细胞凋亡的抑制作用 | 第33-35页 |
图9.1 BH3I-2’诱导线粒体内膜损伤不能被CsA所抑制 | 第35-36页 |
图9.2 BH3I-2’诱导线粒体内膜损伤不能被BHA所抑制 | 第36-37页 |
图9.3 NAC能部分地抑制BH3I-2’诱导的细胞凋亡 | 第37-38页 |
图9.4 NAC能部分地抑制BH3I-2’诱导的线粒体内膜的损伤 | 第38-39页 |
图10.1 流式细胞术分析BH3I-2’介导线粒体ΔΨm及心磷脂的改变 | 第39-40页 |
图10.2 流式细胞术分析BH3I-2’介导线粒体心磷脂改变的比较 | 第40-41页 |
图11 流式细胞术比较BH3I-2’诱导敏感性不同的细胞凋亡呈时间依赖性 | 第41-42页 |
8 致谢 | 第42-43页 |
9 在校期间发表的文章 | 第43-45页 |
10 参考文献 | 第45-51页 |
11 英文全文 | 第51-246页 |