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葡萄茎尖的超低温保存及其再生植株的遗传稳定性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 前言第12-32页
 1 问题提出第12-15页
 2 研究进展第15-27页
   ·植物种质资源保存技术研究进展第15-23页
     ·一般保存第15页
     ·缓慢生长法离体保存第15-16页
     ·超低温保存(Cryopreservation)第16-23页
   ·植物种质资源离体保存过程中的遗传变异研究第23-27页
     ·体细胞无性系产生的原因及其影响因素第23-25页
     ·体细胞无性系变异的检测第25-26页
     ·超低温保存过程中的遗传变异第26-27页
 3 SRAP标记技术第27-30页
   ·SRAP标记的原理第28页
   ·SRAP标记的技术流程第28-29页
     ·SRAP-PCR扩增第28页
     ·产物的凝胶电泳分析第28-29页
   ·SRAP标记的应用第29-30页
     ·遗传多样性分析第29页
     ·遗传图谱的构建第29页
     ·比较基因组学第29-30页
     ·重要性状的标记第30页
 4 本研究的目的和内容第30-32页
第二章 玻璃化法超低温保存葡萄茎尖体系的建立第32-42页
 1 材料与方法第32-35页
   ·试验材料第32页
   ·试验仪器和试剂第32页
     ·试验仪器第32页
     ·试验试剂第32页
   ·试验设计第32-33页
   ·试验基本过程第33页
   ·试验方法第33-35页
     ·材料的组织培养第33页
     ·茎尖的预培养第33页
     ·预处理第33-34页
     ·玻璃化溶液的筛选、处理和冰冻保存第34页
     ·解冻与洗涤第34页
     ·恢复培养第34-35页
 2 结果与分析第35-38页
   ·蔗糖预培养第35页
   ·预处理第35页
   ·PVS_2处理第35-37页
   ·不同玻璃化保护剂对茎尖成活率和再生率的影响第37页
   ·恢复培养基对茎尖成活率和再生率的影响第37-38页
 3 讨论第38-40页
   ·预培养对保存后茎尖成活率和再生率的影响第38页
   ·冰冻保护剂第38-39页
   ·解冻和洗涤方式对保存后茎尖成活率和再生率的影响第39-40页
   ·恢复培养条件对保存后茎尖成活率和再生率的影响第40页
   ·材料培养再生及其形态发生第40页
 4 小结第40-42页
第三章 再生植株遗传稳定性的分析第42-57页
 1 材料与方法第42-45页
   ·试验材料第42页
   ·试验仪器和试剂第42-43页
     ·试验仪器第42页
     ·试验试剂第42-43页
   ·试验方法第43-45页
     ·CTAB法提取幼苗基因组DNA第43页
     ·基因组DNA质量的检测第43-44页
       ·DNA浓度和质量检测第43-44页
       ·电泳检测 DNA的完整性第44页
     ·SRAP-PCR反应体系的优化第44页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法第44-45页
     ·引物的筛选第45页
     ·数据的处理第45页
 2 结果与分析第45-54页
   ·CTAB法提取幼苗基因组DNA的质量第45-47页
     ·基因组 DNA质量的检测第45-47页
     ·基因组 DNA完整性的检测第47页
   ·SRAP-PCR反应体系的优化第47-49页
     ·Mg~(2+)浓度对SRAP反应的影响第47-48页
     ·dNTPs浓度对SRAP反应的影响第48页
     ·Taq酶浓度对SRAP反应的影响第48页
     ·引物浓度对SRAP反应的影响第48页
     ·模板DNA浓度对SRAP反应的影响第48-49页
   ·引物筛选第49-50页
   ·再生植株遗传稳定性的分析第50-54页
 3 讨论第54-55页
   ·基因组 DNA的质量第54页
   ·SRAP-PCR反应体系第54页
   ·再生植株的遗传稳定性第54-55页
 4 小结第55-57页
   ·获得了适合葡萄的SRAP反应体系和程序第55页
   ·初步对超低温保存后再生植株的遗传稳定性进行了研究第55-57页
结论第57-59页
创新点第59-60页
参考文献第60-73页
附录 Ⅰ第73-74页
附录 Ⅱ第74-75页
附录 Ⅲ第75-76页
致谢第76-77页
作者简介第77页

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