| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1 植物细胞骨架结合蛋白研究进展 | 第9-12页 |
| ·植物细胞骨架系统 | 第9-10页 |
| ·植物微丝结合蛋白 | 第10-12页 |
| ·微丝骨架结合蛋白 | 第10页 |
| ·植物AIP1的研究 | 第10-12页 |
| 2 水稻转基因研究进展 | 第12-14页 |
| ·传统的水稻转化方法 | 第12-13页 |
| ·一种快速的水稻转化方法 | 第13-14页 |
| 3 RNA干扰的原理及应用 | 第14页 |
| ·RNA干扰的原理 | 第14页 |
| ·一种有效的RNA干扰载体TCK303 | 第14页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第14-16页 |
| 第二章 OsAIP-RNAi载体的构建及其对水稻的快速转化 | 第16-42页 |
| 1 材料与方法 | 第16-26页 |
| ·水稻材料、质粒和菌株 | 第16页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第16-17页 |
| ·DH5α超级感受态细胞的制备 | 第16-17页 |
| ·EHA105电激感受态细胞制备 | 第17页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第17-22页 |
| ·引物及PCR | 第17页 |
| ·OsAIP-RNAi的扩增 | 第17-18页 |
| ·OsAIP-RNAi目标序列的T克隆 | 第18-20页 |
| ·OsAIPi载体的构建 | 第20-22页 |
| ·电激转化农杆菌 | 第22-25页 |
| ·农杆菌介导的水稻快速转化 | 第25-26页 |
| ·各种培养基成分 | 第25页 |
| ·种子的消毒 | 第25页 |
| ·种子的接种和愈伤组织诱导 | 第25页 |
| ·浸染液的制备 | 第25页 |
| ·愈伤组织侵染和共培养 | 第25-26页 |
| ·抗性愈伤的筛选 | 第26页 |
| ·分化再生 | 第26页 |
| ·生根培养 | 第26页 |
| ·炼苗及移栽 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-40页 |
| ·序列比对 | 第26-29页 |
| ·RNA干扰载体的构建 | 第29-32页 |
| ·OsAIP目标序列的选取 | 第29-30页 |
| ·OsAIPi克隆 | 第30-31页 |
| ·两步法构建RNA干扰载体 | 第31-32页 |
| ·水稻快速转化方法的优化 | 第32-36页 |
| ·不同水稻品种的快速转化 | 第32-33页 |
| ·愈伤组织浸染的优化 | 第33-34页 |
| ·种子培养时间选择 | 第34-35页 |
| ·荧光标记的转基因植株 | 第35-36页 |
| ·OsAIPi的转化和分析 | 第36-40页 |
| ·RNA干扰载体的转化 | 第36-37页 |
| ·RNAi对再生植株生根的影响 | 第37页 |
| ·RNAi对再生植株死亡率的影响 | 第37-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| ·OsAIP-RNAi载体的构建 | 第40页 |
| ·对水稻快速转化方法的优化 | 第40-41页 |
| ·RNA干扰载体的转化 | 第41-42页 |
| 第三章 OsAIP的原核表达及蛋白质纯化 | 第42-57页 |
| 1 材料与方法 | 第42-49页 |
| ·质粒和原核表达菌株 | 第42页 |
| ·OsAIP 的克隆 | 第42-45页 |
| ·引物设计和PCR | 第42-43页 |
| ·PCR反应体系 | 第43页 |
| ·PCR产物加poly A尾 | 第43页 |
| ·OsAIP-e的T克隆 | 第43-45页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第45页 |
| ·蛋白质纯化 | 第45-49页 |
| ·表达菌株转化及鉴定 | 第45页 |
| ·GST-OsAIP融合蛋白质的小规模纯化 | 第45-46页 |
| ·GST-OsAIP融合蛋白质大规模纯化 | 第46-49页 |
| ·GST-OsAIP的纯化和抗体的制备 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-55页 |
| ·OsAIP | 第50-52页 |
| ·OsAIP的原核表达载体的构建 | 第52页 |
| ·OsAIP的原核表达条件 | 第52-54页 |
| ·诱导温度对OsAIP表达量的影响 | 第53页 |
| ·不同菌株对OsAIP表达量的影响 | 第53-54页 |
| ·大规模纯化OsAIP | 第54-55页 |
| ·制抗体用蛋白的纯化 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简介 | 第67页 |