摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-12页 |
第二章 血吸虫IPSE基因合成、克隆与鉴定 | 第12-29页 |
·实验材料 | 第12-15页 |
·菌株和质粒 | 第12页 |
·基因序列 | 第12页 |
·主要试剂 | 第12页 |
·培养基和缓冲液 | 第12-13页 |
·主要设备 | 第13-14页 |
·电转化感受态细胞的制备 | 第14-15页 |
·方法 | 第15-24页 |
·IPSE基因合成的寡核苷酸片段设计 | 第15-17页 |
·重叠PCR(Over lapping PCR)合成IPSE | 第17-21页 |
·IPSE全长基因的TA克隆与序列鉴定 | 第21-24页 |
·结果 | 第24-29页 |
·IPSE基因合成 | 第24-28页 |
·合成IPSE DNA片段的序列鉴定 | 第28-29页 |
第三章 血吸虫IPSE基因表达质粒的构建及融合蛋白的表达 | 第29-39页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要设备 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-35页 |
·原核重组表达质粒IPSE/pET32a(+)的构建与鉴定 | 第30-35页 |
·Trx-IPSE重组融合蛋白诱导表达 | 第35页 |
·结果 | 第35-39页 |
·重组质粒的构建 | 第35-37页 |
·Trx-IPSE重组融合蛋白诱导表达 | 第37-39页 |
第四章 TRX-IPSE重组融合蛋白纯化与功能分析 | 第39-48页 |
·实验材料 | 第39-41页 |
·菌株和质粒 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39-40页 |
·血清 | 第40页 |
·主要设备 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-44页 |
·Trx-IPSE重组融合蛋白的大量制备与纯化 | 第41-42页 |
·免疫印渍分析 | 第42-44页 |
·结果 | 第44-48页 |
·蛋白纯化与复性 | 第44-45页 |
·重组IPSE蛋白免疫反应性的分析 | 第45-47页 |
·重组IPSE蛋白与IgE结合能力分析 | 第47-48页 |
第五章 讨论 | 第48-51页 |
第六章 小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第57-58页 |
附录 | 第58-69页 |
1.本研究中重组质粒(SMIPSE/PGEM-T)测序结果 | 第58-59页 |
2.网络生物信息服务器SIGNAL P3.0对IPSE蛋白预测结果 | 第59-60页 |
3.发表的论文 | 第60-69页 |