2006-2007年狂犬病毒野毒株L基因3端及聚合酶活性部位序列分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 狂犬病研究近况 | 第10-11页 |
| 2 狂犬病病毒分子生物学研究 | 第11-12页 |
| ·狂犬病毒的形态与结构 | 第11页 |
| ·狂犬病毒基因分型 | 第11-12页 |
| 3 狂犬病病毒L基因及其编码蛋白功能研究 | 第12-14页 |
| ·L基因分子生物学研究 | 第12-13页 |
| ·L蛋白的功能特性研究 | 第13-14页 |
| 4 L蛋白在狂犬病毒转录和复制中的作用 | 第14-15页 |
| 5 L蛋白在狂犬病毒分子进化水平上的地位 | 第15-17页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第18-29页 |
| 1 材料 | 第18-22页 |
| ·野毒株来源 | 第18页 |
| ·试剂及配制 | 第18-19页 |
| ·载体与菌株 | 第19页 |
| ·引物 | 第19-20页 |
| ·参考毒株 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| 2 实验路线 | 第22-23页 |
| 3 实验方法 | 第23-29页 |
| ·病毒总RNA的提取 | 第23页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第23-24页 |
| ·电泳 | 第24页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第24-25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·抽提质粒 | 第26-27页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第27页 |
| ·基因测序 | 第27页 |
| ·序列比较和遗传进化分析 | 第27-28页 |
| ·重组DH5α的保存 | 第28-29页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第29-76页 |
| 1 脑组织病料RV阳性检测结果 | 第29-30页 |
| 2 狂犬病毒L基因3'端的克隆及序列分析 | 第30-54页 |
| ·L基因3'端扩增结果 | 第30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·L基因3'端核苷酸和推导氨基酸序列分析 | 第31-54页 |
| 3 狂犬病毒L基因聚合酶活性部位的克隆及序列分析 | 第54-76页 |
| ·L基因聚合酶活性部位扩增结果 | 第54页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·L基因聚合酶活性部位核昔酸和推导氨基酸序列分析 | 第55-76页 |
| 第四部分 讨论 | 第76-80页 |
| 1 本研究广西野毒株同源性 | 第76页 |
| 2 L基因3'端序列分析 | 第76-77页 |
| 3 L基因活性部位的序列分析 | 第77-78页 |
| 4 分子水平遗传进化发生 | 第78-79页 |
| 5 广西狂犬病毒地理分布 | 第79页 |
| 6 待解决问题及展望 | 第79-80页 |
| 第五部分 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
