致谢 | 第1-12页 |
中文摘要 | 第12-14页 |
ABSTRACT | 第14-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-32页 |
1 IgG Fc 受体 | 第17页 |
2 Fc 受体的命名、分类 | 第17-20页 |
3 IgG Fc 受体的基本生物学特性及家畜IgG Fc 受体研究进展 | 第20-22页 |
·FcγRI (CD64) | 第20页 |
·FcγRII (CD32) | 第20-21页 |
·FcγRIII (CD16) | 第21-22页 |
·boFcγ2R | 第22页 |
·moFcγRIV | 第22页 |
4 FcγR 的免疫学功能研究进展 | 第22-26页 |
·调节抗体介导的免疫细胞活化 | 第22-23页 |
·介导抗体亚类的不同免疫功能 | 第23-25页 |
·介导细胞吞噬作用 | 第25页 |
·介导ADCC 作用 | 第25页 |
·介导树突状细胞抗原提呈 | 第25-26页 |
5 PRRSV 免疫学研究进展 | 第26-30页 |
·PRRSV | 第26页 |
·PRRSV 体液免疫研究进展 | 第26-27页 |
·PRRSV 细胞免疫研究进展 | 第27页 |
·PRRSV 免疫调节和免疫逃逸研究进展 | 第27-29页 |
·PRRSV 毒力变异与分子遗传标记研究进展 | 第29页 |
·PRRSV 遗传多样性和疫苗研究进展 | 第29-30页 |
6 抗体依赖增强作用(ADE)研究进展 | 第30-31页 |
7 PRRSV 存在ADE 作用 | 第31页 |
8 本研究的意义 | 第31-32页 |
第二章 猪IgG Fc 受体基因克隆、鉴定 | 第32-68页 |
1 前言 | 第32页 |
2 材料 | 第32-36页 |
·菌种、质粒、酶 | 第32-33页 |
·细胞 | 第33页 |
·试剂配制 | 第33-35页 |
·试验动物 | 第35页 |
·主要试剂盒 | 第35-36页 |
3 方法 | 第36-47页 |
·poFcγRI cDNA 克隆 | 第36-41页 |
·poFcγRI 在COS-7 细胞表面的表达 | 第41-44页 |
·RT-PCR 检测poFcγRI 在猪免疫细胞中的表达分布 | 第44-46页 |
·poFcγRII 基因克隆及变异分析 | 第46-47页 |
·poFcγRIII 基因克隆及重组表达质粒的构建 | 第47页 |
·序列分析 | 第47页 |
4 结果 | 第47-61页 |
·poFcγRI cDNA 克隆 | 第47-49页 |
·poFcγRI EST 检索 | 第47-48页 |
·PCR 扩增poFcγRI | 第48页 |
·重组质粒 T-SR1 的酶切及 PCR 鉴定 | 第48-49页 |
·poFcγRI cDNA 序列 | 第49页 |
·poFcγRI 在COS-7 细胞表面的表达 | 第49-53页 |
·poFcγRI mRNA 在猪免疫细胞中的转录 | 第53页 |
·poFcγRII 基因克隆及变异分析 | 第53-58页 |
·poFcγRIII 基因克隆及重组真核表达质粒的构建 | 第58-61页 |
5 讨论 | 第61-68页 |
·猪IgG Fc 受体克隆策略 | 第61页 |
·poFcγRI 序列分析 | 第61-63页 |
·poFcγRI 在COS-7 细胞表面的表达 | 第63-64页 |
·poFcγRI mRNA 在猪免疫细胞中的转录 | 第64页 |
·poFcγRII 存在两个亚类 | 第64-66页 |
·poFcγRIII 序列分析 | 第66-67页 |
·FcγRs cDNA 进化分析 | 第67-68页 |
第三章 PRRSV 感染后FcγRs mRNA 转录与免疫抑制 | 第68-84页 |
1 前言 | 第68-70页 |
2 材料 | 第70页 |
·病毒和细胞 | 第70页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·试验动物及分组 | 第70页 |
3 方法 | 第70-73页 |
·试验动物感染 | 第70页 |
·外周血免疫细胞检测 | 第70-71页 |
·体温检测及剖检 | 第71页 |
·PRRSV 特异抗体检测 | 第71页 |
·FcγRs Real-time PCR 检测 | 第71-73页 |
4 结果 | 第73-81页 |
·不同毒株PRRSV 感染后猪外周血免疫细胞含量 | 第73-74页 |
·血清抗体水平检测结果 | 第74-75页 |
·体温变化、症状及病理变化 | 第75-76页 |
·不同毒株PRRSV 感染后猪外周血白细胞FcγRs 转录 | 第76-81页 |
5 讨论 | 第81-84页 |
·PRRSV 变异株HN07-01 引起高热 | 第81-82页 |
·PRRSV 感染与免疫抑制 | 第82-83页 |
·PRRSV 免疫抑制与活化性Fc 受体转录下调 | 第83-84页 |
第四章 poFcγRII 介导PRRSV 抗体依赖增强作用(ADE) | 第84-99页 |
1 前言 | 第84-85页 |
2 材料 | 第85-86页 |
·病毒和细胞 | 第85页 |
·菌种、质粒、酶 | 第85页 |
·主要试剂盒 | 第85-86页 |
3 方法 | 第86-89页 |
·表达猪FcγRII 的Marc-145 细胞系建立 | 第86-87页 |
·猪FcγRII 介导PRRSV 抗体依赖增强作用(ADE) | 第87页 |
·猪FcγRII 重组蛋白的制备 | 第87-88页 |
·猪FcγRII 重组蛋白活性鉴定 | 第88-89页 |
·兔抗猪FcγRII 多抗的制备 | 第89页 |
·rsFcγRII 抗体对转染FcγRII Marc-145 细胞系介导PRRSV ADE 的阻断 | 第89页 |
·数据分析 | 第89页 |
4 结果 | 第89-97页 |
·poFcγRII 重组真核表达质粒的构建 | 第89-90页 |
·表达猪FcγRII 的Marc-145 细胞系建立 | 第90-91页 |
·poFcγRII 介异PRRSV ADE 作用 | 第91-92页 |
·猪FcγRII 重组蛋白的制备 | 第92-95页 |
·流式细胞测定rspoRII 阻断猪IgG 与Marc-145 细胞的poFcγRII 结合 | 第95页 |
·兔抗猪FcγRII 多抗的制备 | 第95-96页 |
·抗rsFcγRII 多抗对PRRSV ADE 的阻断作用 | 第96-97页 |
5 讨论 | 第97-99页 |
研究总结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-111页 |
附录A:英文缩略词表 | 第111-112页 |
附录B:博士在读期间投稿和已发表的论文 | 第112-113页 |