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湖羊瘤胃未培养微生物中木聚糖酶基因的克隆和表达

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 文献综述第12-34页
 1.宏基因组学简介第12-19页
   ·未培养微生物与宏基因组学第12-13页
   ·宏基因组文库的概念及分类第13-16页
   ·宏基因组文库的构建与筛选第16-19页
     ·环境样品总DNA的提取和纯化第16-17页
     ·宏基因组文库的构建第17-18页
     ·宏基因组文库的筛选第18-19页
 2.瘤胃微生物第19-22页
   ·瘤胃微生物的多样性第19-21页
   ·瘤胃微生物间相互关系的复杂性第21-22页
 3.木聚糖以及木聚糖酶第22-33页
   ·木聚糖第23-24页
     ·木聚糖的概念第23页
     ·木聚糖的结构第23-24页
   ·木聚糖酶第24-33页
     ·木聚糖酶的多样性及其分类第24-27页
     ·木聚糖酶的理化特性第27-28页
     ·木聚糖酶的分子结构及催化机制第28-29页
     ·木聚糖酶的筛选和测定方法第29-30页
     ·木聚糖酶的分子生物学研究第30-32页
     ·木聚糖酶的应用研究第32-33页
 4.本课题的立题依据和研究内容第33-34页
   ·立题依据第33页
   ·研究内容第33-34页
第二章 材料与方法第34-56页
   ·材料第34-37页
     ·菌株与质粒第34页
     ·菌种保存第34-35页
     ·培养基、培养条件和抗生素第35页
     ·常规溶液、缓冲液、酶及试剂第35-36页
     ·实验仪器第36-37页
   ·方法第37-56页
     ·质粒DNA的提取第37-38页
     ·DNA的酶切、电泳及DNA片段大小浓度测算第38页
     ·DNA的连接第38-39页
     ·质粒DNA以及DNA连接产物的转化第39-41页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第41-42页
     ·产木聚糖酶瘤胃微生物的富集第42页
     ·瘤胃总DNA的提取及纯化第42-45页
     ·Fosmid文库的构建第45-50页
     ·Fosmid文库的筛选和保存第50页
     ·木聚糖酶基因的鉴定第50-52页
     ·木聚糖酶基因的表达第52-54页
     ·木聚糖酶活性的初步测定第54-56页
第三章 结果与分析第56-74页
   ·湖羊瘤胃未培养微生物总DNA的提取和纯化第56-58页
   ·Fosmid文库的构建第58-59页
   ·文库的筛选第59-60页
   ·木聚糖酶基因的鉴定第60-66页
   ·UMXYL2-1-1蛋白、UMXYL2-1-2蛋白和UMXYL2-6-1蛋白的比较第66-67页
   ·UMXYL2-1-1蛋白、UMXYL2-1-2蛋白和UMXYL2-6-1蛋白的系统进化分析第67-68页
   ·UMXYL2-1-1蛋白和UMXYL2-1-2蛋白的表达第68-70页
   ·UMXYL2-1-2蛋白在BL21中的表达条件的研究及酶学活性的初步测定第70-74页
第四章 总结与讨论第74-76页
   ·湖羊瘤胃未培养微生物宏基因组文库的构建及筛选第74-75页
   ·木聚糖酶基因的鉴定及表达第75-76页
建议第76-77页
参考文献第77-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表的学术论文目录第83页

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