摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-34页 |
1.宏基因组学简介 | 第12-19页 |
·未培养微生物与宏基因组学 | 第12-13页 |
·宏基因组文库的概念及分类 | 第13-16页 |
·宏基因组文库的构建与筛选 | 第16-19页 |
·环境样品总DNA的提取和纯化 | 第16-17页 |
·宏基因组文库的构建 | 第17-18页 |
·宏基因组文库的筛选 | 第18-19页 |
2.瘤胃微生物 | 第19-22页 |
·瘤胃微生物的多样性 | 第19-21页 |
·瘤胃微生物间相互关系的复杂性 | 第21-22页 |
3.木聚糖以及木聚糖酶 | 第22-33页 |
·木聚糖 | 第23-24页 |
·木聚糖的概念 | 第23页 |
·木聚糖的结构 | 第23-24页 |
·木聚糖酶 | 第24-33页 |
·木聚糖酶的多样性及其分类 | 第24-27页 |
·木聚糖酶的理化特性 | 第27-28页 |
·木聚糖酶的分子结构及催化机制 | 第28-29页 |
·木聚糖酶的筛选和测定方法 | 第29-30页 |
·木聚糖酶的分子生物学研究 | 第30-32页 |
·木聚糖酶的应用研究 | 第32-33页 |
4.本课题的立题依据和研究内容 | 第33-34页 |
·立题依据 | 第33页 |
·研究内容 | 第33-34页 |
第二章 材料与方法 | 第34-56页 |
·材料 | 第34-37页 |
·菌株与质粒 | 第34页 |
·菌种保存 | 第34-35页 |
·培养基、培养条件和抗生素 | 第35页 |
·常规溶液、缓冲液、酶及试剂 | 第35-36页 |
·实验仪器 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-56页 |
·质粒DNA的提取 | 第37-38页 |
·DNA的酶切、电泳及DNA片段大小浓度测算 | 第38页 |
·DNA的连接 | 第38-39页 |
·质粒DNA以及DNA连接产物的转化 | 第39-41页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第41-42页 |
·产木聚糖酶瘤胃微生物的富集 | 第42页 |
·瘤胃总DNA的提取及纯化 | 第42-45页 |
·Fosmid文库的构建 | 第45-50页 |
·Fosmid文库的筛选和保存 | 第50页 |
·木聚糖酶基因的鉴定 | 第50-52页 |
·木聚糖酶基因的表达 | 第52-54页 |
·木聚糖酶活性的初步测定 | 第54-56页 |
第三章 结果与分析 | 第56-74页 |
·湖羊瘤胃未培养微生物总DNA的提取和纯化 | 第56-58页 |
·Fosmid文库的构建 | 第58-59页 |
·文库的筛选 | 第59-60页 |
·木聚糖酶基因的鉴定 | 第60-66页 |
·UMXYL2-1-1蛋白、UMXYL2-1-2蛋白和UMXYL2-6-1蛋白的比较 | 第66-67页 |
·UMXYL2-1-1蛋白、UMXYL2-1-2蛋白和UMXYL2-6-1蛋白的系统进化分析 | 第67-68页 |
·UMXYL2-1-1蛋白和UMXYL2-1-2蛋白的表达 | 第68-70页 |
·UMXYL2-1-2蛋白在BL21中的表达条件的研究及酶学活性的初步测定 | 第70-74页 |
第四章 总结与讨论 | 第74-76页 |
·湖羊瘤胃未培养微生物宏基因组文库的构建及筛选 | 第74-75页 |
·木聚糖酶基因的鉴定及表达 | 第75-76页 |
建议 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第83页 |