| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·RV 基本特征 | 第11-14页 |
| ·RV 粒子的结构 | 第11-12页 |
| ·RV 结构蛋白结构与功能 | 第12-13页 |
| ·RV 非结构蛋白结构与功能 | 第13-14页 |
| ·RV 的血清学分型 | 第14页 |
| ·轮状病毒对机体的感染机理及病理变化 | 第14-15页 |
| ·RV 诊断研究进展 | 第15-17页 |
| ·病原检测方法 | 第15-16页 |
| ·免疫学检测方法 | 第16-17页 |
| ·基因检测技术 | 第17页 |
| ·本课题研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·毒株、细胞和实验动物 | 第19页 |
| ·菌种、质粒、全病毒血清 | 第19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·细胞培养及核酸提取试剂 | 第19-20页 |
| ·酶类及主要生化试剂 | 第20页 |
| ·培养基及培养溶液配制方法 | 第20页 |
| ·碱裂解法小量提取大肠杆菌质粒所用试剂 | 第20页 |
| ·纯化蛋白、SDS-PAGE 和Western-blot 所用主要试剂 | 第20-21页 |
| ·ELISA 主要试剂配方 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·PCR 检测方法的建立 | 第23-25页 |
| ·间接ELISA 检测牛轮状病毒血清抗体方法的初步建立 | 第25-34页 |
| 3 结果 | 第34-45页 |
| ·PCR 检测结果 | 第34-37页 |
| ·PCR 产物测序鉴定结果 | 第34页 |
| ·NCDV TCID_(50) 的测定 | 第34-35页 |
| ·PCR 反应退火温度的摸索 | 第35页 |
| ·RT-PCR 灵敏度试验 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR 特异性试验 | 第36页 |
| ·检测粪便样品 | 第36-37页 |
| ·间接 ELISA 检测牛轮状病毒血清抗体方法的初步建立 | 第37-45页 |
| ·牛轮状病毒 NCDV 株 VP6 蛋白的表达 | 第37-41页 |
| ·ELISA 工作条件的初步探索 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·影响牛轮状病毒 RT-PCR 检测的几个关键要素的选择 | 第45-46页 |
| ·VP6 重组蛋白作为检测抗原在血清抗体检测中的作用 | 第46页 |
| ·基于 VP6 重组蛋白检测血清抗体间接 ELISA 方法的初步建立 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
