副猪嗜血杆菌保护性抗原的筛选与鉴定
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-24页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的病原学 | 第10-15页 |
| ·副猪嗜血杆菌的概述 | 第10页 |
| ·副猪嗜血杆菌的病原特性 | 第10-11页 |
| ·副猪嗜血杆菌的血清型 | 第11-12页 |
| ·副猪嗜血杆菌的毒力因子 | 第12-15页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的流行病学 | 第15-16页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的临床症状与病理变化 | 第16-18页 |
| ·临床症状 | 第16-17页 |
| ·病理变化 | 第17-18页 |
| ·副猪嗜血杆菌病诊断 | 第18-20页 |
| ·免疫学诊断 | 第18-19页 |
| ·分子生物学诊断 | 第19-20页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的防控现状 | 第20-24页 |
| ·加强饲养管理 | 第20-21页 |
| ·药物控制 | 第21页 |
| ·免疫预防 | 第21-24页 |
| 2 研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 3 材料与方法 | 第25-43页 |
| ·材料 | 第25-31页 |
| ·菌株与培养基 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25-27页 |
| ·PCR引物 | 第27-29页 |
| ·常用分子生物学试剂 | 第29-31页 |
| ·其它试剂盒材料 | 第31页 |
| ·试验动物: | 第31页 |
| ·生物信息学分析 | 第31页 |
| ·细菌的培养 | 第31页 |
| ·副猪嗜血杆菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增 | 第32页 |
| ·质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·DNA酶切 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
| ·DNA的回收 | 第34页 |
| ·DNA的连接 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第35页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的提取与纯化 | 第36-37页 |
| ·上清中重组蛋白的提取与纯化 | 第36页 |
| ·包涵体中重组蛋白的提取与纯化 | 第36-37页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第37-38页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第38-39页 |
| ·副猪嗜血杆菌膜蛋白的提取 | 第39页 |
| ·Western blot | 第39-40页 |
| ·流式细胞术分析蛋白在细菌表面的分布 | 第40页 |
| ·重组蛋白与猪肺上皮细胞的相互作用 | 第40-41页 |
| ·仔猪免疫与攻毒试验 | 第41页 |
| ·仔猪免疫试验 | 第41页 |
| ·仔猪攻毒实验 | 第41页 |
| ·仔猪临床症状和病理变化的综合评分标准 | 第41-42页 |
| ·ELISA方法检测重组蛋白抗体滴度 | 第42-43页 |
| 4 结果与分析 | 第43-52页 |
| ·候选基因在副猪嗜血杆菌不同血清型菌株中的分布 | 第43页 |
| ·候选基因的克隆、表达与纯化 | 第43-45页 |
| ·多克隆抗体的的效价测定 | 第45页 |
| ·候选蛋白质的细胞定位 | 第45-50页 |
| ·候选蛋白生物信息学预测 | 第45-46页 |
| ·候选蛋白Western blot验证 | 第46-47页 |
| ·流式细胞仪术进行蛋白定位分析 | 第47-48页 |
| ·免疫保护性抗原对细胞的粘附作用 | 第48-50页 |
| ·重组蛋白的免疫原性 | 第50-52页 |
| ·重组蛋白的免疫保护效率 | 第50-51页 |
| ·抗体滴度 | 第51页 |
| ·蛋白对仔猪免疫效力实验 | 第51-52页 |
| 5 讨论 | 第52-55页 |
| 6 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
