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鸭副粘病毒分离鉴定、F基因序列分析及生物学特性研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
引言第14-34页
 1 鸭副粘病毒概述第14-16页
   ·流行病学第14-16页
   ·临床症状及病理变化第16页
 2 病原学研究第16-18页
 3 分子生物学研究第18-26页
   ·融合蛋白第18-20页
   ·HN 蛋白第20-23页
   ·M 蛋白第23-24页
   ·NP 蛋白第24-25页
   ·P 蛋白第25页
   ·L 蛋白第25-26页
 4 鸭副粘病毒检测方法的研究第26-29页
   ·病毒的分离与鉴定第26页
   ·血凝、血凝抑制试验第26-27页
   ·荧光抗体技术第27页
   ·酶联免疫吸附试验第27-28页
   ·RT-PCR 技术第28-29页
   ·核酸探针检测技术第29页
 5 鸭副粘病毒病的预防与控制第29-32页
   ·活疫苗第29-30页
   ·灭活苗第30页
   ·亚单位疫苗第30页
   ·核酸疫苗第30-31页
   ·重组活载体疫苗第31-32页
 6 研究的目的与意义第32-34页
实验一 一株经鸭胚传递的鸭副粘病毒的分离鉴定 及生物学特性研究第34-48页
 1 材料与方法第35-39页
   ·材料第35-36页
     ·病毒第35页
     ·试验用 SPF 鸡胚、健康鸭胚第35页
     ·仪器与试剂第35-36页
   ·方法第36-39页
     ·病毒的分离与增值第36页
     ·血凝、血凝抑制试验第36页
     ·MDT(鸡胚最小致死量)测定第36-37页
     ·ICPI(1日龄雏鸡脑内注射的致病指数)的测定第37页
     ·IVPI (6周龄雏鸡静脉接种致病指数)的测定第37页
     ·ELD50(鸭胚半数致死量)测定第37-38页
     ·动物致病性试验第38页
       ·鸭胚攻毒试验第38页
       ·雏鸭攻毒试验第38页
     ·分离株F 基因 RT-PCR 扩增及序列测定第38-39页
       ·病毒RNA 提取第38页
       ·RT-PCR第38-39页
       ·PCR 产物的克隆与序列分析第39页
 2 结果第39-45页
   ·病毒分离、增殖与鉴定第39页
   ·生物学毒力指标测定结果第39-41页
     ·鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)测定结果第39-40页
     ·1 日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)测定结果第40页
     ·6 周龄鸡静脉内接种致病指数(IVPI)测定结果第40-41页
   ·鸭胚半数致死量测定第41-42页
   ·动物回归试验第42页
     ·雏鸭攻毒试验第42页
     ·鸭胚攻毒试验第42页
   ·F 基因RT-PCR 扩增第42-43页
   ·扩增产物克隆与鉴定第43页
   ·序列分析第43-45页
 3 讨论第45-48页
实验二 六株鸭副粘病毒株 F 基因的克隆 及序列分析第48-66页
 1 材料与方法第49-58页
   ·材料第49-51页
     ·病毒第49页
     ·载体与受体菌第49-50页
     ·仪器和试剂第50页
     ·RT-PCR 引物第50-51页
     ·SPF 鸡胚第51页
     ·主要溶液的配制第51页
   ·方法第51-58页
     ·病毒的增殖与浓缩第51页
     ·病毒基因组 RNA 的提取第51-52页
     ·cDNA 的合成第52页
     ·PCR 扩增第52-53页
     ·PCR 产物的克隆及序列分析第53-58页
       ·PCR 产物的回收与纯化第53-54页
       ·PCR 产物的连接第54页
       ·大肠杆菌 BL21 感受态细胞的制备第54-55页
       ·连接产物的转化第55页
       ·质粒 DNA 的提取第55-56页
       ·质粒DNA的PCR鉴定第56-57页
       ·阳性质粒的酶切鉴定第57页
       ·重组质粒的序列测定及分析第57-58页
 2 结果第58-64页
   ·RT-PCR第58-60页
   ·重组质粒的酶切鉴定结果第60-62页
   ·测序结果及序列分析第62-64页
 3 讨论第64-66页
结论第66-67页
参考文献第67-80页
附录第80-90页
致谢第90-91页
攻读学位期间发表论文情况第91页

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