摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略语 | 第8-9页 |
第一部分 | 第9-45页 |
1. 前言 | 第10-12页 |
2. 实验材料与方法 | 第12-32页 |
·实验材料 | 第12-14页 |
·细胞系及菌株 | 第12页 |
·实验动物 | 第12页 |
·主要载体及构建载体使用的PCR引物 | 第12-13页 |
·主要试剂,耗材及抗体 | 第13页 |
·仪器设备 | 第13-14页 |
·分析软件 | 第14页 |
·实验方法 | 第14-32页 |
·载体质粒的构建 | 第14-20页 |
·PCR扩增目的片段 | 第14页 |
·琼脂糖凝胶电泳及DNA片段的回收 | 第14-16页 |
·双酶切反应 | 第16页 |
·连接反应 | 第16-17页 |
·感受态细胞的制备 | 第17-18页 |
·质粒转化DH5α感受态细胞 | 第18页 |
·PCR鉴定重组菌落 | 第18-19页 |
·小提质粒 | 第19-20页 |
·菌株的保存 | 第20页 |
·细胞培养,外源基因的脂质体转染及细胞稳定株的构建 | 第20-23页 |
·逆转录病毒转染外源基因 | 第23-24页 |
·慢病毒转染外源基因 | 第24-25页 |
·SDS-PAGE蛋白质电泳及湿转法Western blot | 第25-27页 |
·SDS-PAGE梯度凝胶电泳 | 第25-26页 |
·湿转法Western Blot | 第26-27页 |
·抗NIP-IgM的提纯 | 第27-28页 |
·IC的制备 | 第28页 |
·激光共聚焦显微术 | 第28-29页 |
·流式细胞术 | 第29-30页 |
·豚鼠补体血清的制备 | 第30页 |
·MTT法检测细胞生长情况 | 第30-31页 |
·补体杀伤实验以及台盼蓝染色 | 第31-32页 |
3. 实验结果 | 第32-40页 |
·表达Fcα/μR的人肾小球系膜细胞稳定株的建立 | 第32-34页 |
·HMC-Fcα/μR与IgA,IgM及IgM-IC的结合 | 第34-36页 |
·配体结合对HMC-Fcα/μR增殖情况的影响 | 第36-37页 |
·补体对结合IgM-IC的HMC-Fcα/μR的杀伤 | 第37-40页 |
4. 讨论 | 第40-43页 |
·Fcα/μR单体可以在HMC细胞膜表面表达及其生理学意义 | 第40页 |
·Fcα/μR在HMC上的表达能促进IgM及IgM-IC与细胞的结合 | 第40-41页 |
·IgM-IC与系膜细胞表面Fcα/μR结合后能激活补体杀伤细胞 | 第41页 |
·Fcα/μR在肾脏疾病中可能的影响以及进一步研究的展望 | 第41-43页 |
小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
第二部分 | 第45-58页 |
1. 前言 | 第46-47页 |
2. 材料与方法 | 第47-51页 |
·血液标本 | 第47页 |
·EB病毒转化 | 第47-49页 |
·EB病毒的培养 | 第47-48页 |
·病毒转化IgAN病人外周血B细胞 | 第48-49页 |
·ELISA检测永生化B细胞上清中IgA含量 | 第49-51页 |
3. 实验结果 | 第51-54页 |
·IgAN病人外周血B细胞的转化 | 第51页 |
·三明治ELISA配对抗体的筛选 | 第51-52页 |
·三明治ELISA检测转化细胞IgA的分泌 | 第52-54页 |
4. 讨论 | 第54-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-58页 |
综述 异常糖基化的IgA1——找不着家的黏膜免疫球蛋白? | 第58-70页 |
1. 前言 | 第58-59页 |
2. 体内IgA的产生位点及各自特点 | 第59-63页 |
·体内IgA的合成与清除 | 第59-60页 |
·IgA1的结构与糖基化 | 第60页 |
·黏膜区IgA的产生及其特点 | 第60-62页 |
·黏膜区IgA分泌型B细胞的活化以及黏膜B细胞的归巢相关的受体 | 第62-63页 |
3. IgAN病人体内IgA的特点 | 第63-65页 |
·IgAN病人体内存在异常糖基化的IgA分子 | 第63-64页 |
·异常糖基化位点及结构特点 | 第64页 |
·异常糖基化IgA引起的自身免疫病 | 第64-65页 |
4. 异常糖基化IgA的来源 | 第65-66页 |
·IgAN中的IgA产生 | 第65页 |
·关于黏膜来源的推测 | 第65-66页 |
5. 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
附录 质粒图谱 | 第70-72页 |
个人简历 | 第72页 |
硕士研究生阶段发表文章情况 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |