| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·细菌生物被膜研究进展 | 第13-18页 |
| ·细菌生物被膜的形成机制研究 | 第13页 |
| ·细菌生物被膜形成功能研究 | 第13-15页 |
| ·细菌生物被膜形成相关基因及功能研究 | 第15-16页 |
| ·密度感应信号AI-2与生物被膜形成 | 第16-18页 |
| ·副猪嗜血杆菌研究进展 | 第18-20页 |
| ·病原学特性 | 第18-19页 |
| ·生理生化特性 | 第19页 |
| ·流行病学特征 | 第19-20页 |
| ·突变株构建方法研究 | 第20-21页 |
| ·自然诱变 | 第20页 |
| ·人工诱变方法 | 第20页 |
| ·分子生物学方法 | 第20-21页 |
| ·基因DNA水平和转录水平检测技术研究 | 第21-22页 |
| ·实时定量PCR(real-time PCR) | 第22页 |
| ·Southern杂交 | 第22页 |
| ·本研究的目的及其意义 | 第22-23页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其生物被膜形成能力检测 | 第23-32页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验菌株、培养基、实验质粒 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-27页 |
| ·溶液配制 | 第23页 |
| ·细菌分离培养 | 第23页 |
| ·细菌菌株的纯化 | 第23-24页 |
| ·染色镜检 | 第24页 |
| ·生化试验 | 第24页 |
| ·PCR鉴定方法 | 第24-26页 |
| ·副猪嗜血杆菌生物被膜形成能力检测 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-30页 |
| ·细菌分离 | 第27页 |
| ·生化试验结果 | 第27-28页 |
| ·PCR反应结果 | 第28-29页 |
| ·副猪嗜血杆菌生物被膜形成能力检测 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌生物被膜与耐药性关系分析 | 第32-36页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验菌株、培养基 | 第32页 |
| ·实验主要试剂 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·生物被膜形成鉴定 | 第32页 |
| ·浮游细菌药敏试验 | 第32页 |
| ·副猪嗜血杆菌生物被膜药敏试验 | 第32页 |
| ·统计分析 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-35页 |
| ·浮游细菌药敏试验结果 | 第33页 |
| ·副猪嗜血杆菌生物被膜药敏试验结果 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌生物被膜缺失突变体的构建 | 第36-69页 |
| ·实验材料 | 第36-39页 |
| ·实验菌株、培养基、实验质粒 | 第36页 |
| ·菌种保存 | 第36-37页 |
| ·培养基、抗生素 | 第37-38页 |
| ·常规溶液、缓冲液配制 | 第38页 |
| ·试验中的引物 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-56页 |
| ·细菌培养 | 第39-40页 |
| ·HPS-LZ001基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·HPS-LZ001 luxS基因的扩增 | 第41-42页 |
| ·HPS-LZ001 pilA基因的扩增 | 第42页 |
| ·HPS-LZ001 luxS下游基因的扩增 | 第42页 |
| ·HPS-LZ001 luxS上游基因的扩增 | 第42-44页 |
| ·HPS-LZ001 pilA上、下游基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·HPS-LZ001菌株luxS上下游基因的融合 | 第45-46页 |
| ·HPS-LZ001 pilA上下游基因的融合 | 第46-47页 |
| ·自杀质粒pDM4的提取,转化活化 | 第47-48页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第48页 |
| ·HPS-LZ001菌株缺失突变体的构建 | 第48-50页 |
| ·基因缺失突变载体与HPS-LZ001菌株的同源交换 | 第50-51页 |
| ·HPS-LZ001ΔluxS缺失突变体luxS基因互补验证 | 第51页 |
| ·HPS-LZ001ΔpilA缺失突变体pilA基因互补验证 | 第51页 |
| ·缺失基因的DNA水平和基因转录水平鉴定 | 第51-55页 |
| ·生物被膜形成能力检测 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-67页 |
| ·HPS-LZ001 luxS扩增结果 | 第56-57页 |
| ·HPS-LZ001 pilA基因扩增结果 | 第57页 |
| ·luxS基因缺失载体的构建 | 第57-58页 |
| ·pilA基因缺失突变载体的构建结果 | 第58-59页 |
| ·luxS基因突变载体与HPS-LZ001菌株同源交换结果 | 第59-60页 |
| ·pilA基因突变载体与HPS-LZ001菌株同源交换结果 | 第60-61页 |
| ·HPS-LZ001 ΔluxS菌株luxS基因互补结果 | 第61页 |
| ·HPS-LZ001 △pilA菌株pilA基因互补结果 | 第61-62页 |
| ·Southern杂交结果 | 第62-64页 |
| ·RT-PCR结果 | 第64-65页 |
| ·生物被膜形成能力检测结果 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 全文结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
