| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-28页 |
| 1. 植物细菌性青枯病研究进展 | 第15-21页 |
| ·植物细菌性青枯病发生及危害 | 第15-17页 |
| ·分布 | 第15页 |
| ·发生条件及危害 | 第15-16页 |
| ·防治 | 第16-17页 |
| ·病原菌的研究概况 | 第17-19页 |
| ·病原菌的分类 | 第17-18页 |
| ·青枯菌的形态特征及菌落特征 | 第18-19页 |
| ·植物细菌性青枯病的致病机理研究 | 第19-21页 |
| ·植物细菌性青枯菌的侵染过程 | 第19页 |
| ·植物细菌性青枯菌致病性的生化基础 | 第19-20页 |
| ·植物细菌性青枯菌致病性的分子生物学研究 | 第20-21页 |
| 2. 植物青枯病抗性鉴定研究进展 | 第21-22页 |
| ·烟草青枯病的抗性鉴定 | 第21页 |
| ·番茄青枯病的抗性鉴定 | 第21-22页 |
| ·马铃薯青枯病的抗性鉴定 | 第22页 |
| ·花生青枯病的抗性鉴定 | 第22页 |
| 3 植物青枯病抗性研究进展 | 第22-26页 |
| ·抗病研究 | 第23-25页 |
| ·拟南芥(Arabidopsis thaliana)抗青枯病研究: | 第23页 |
| ·烟草( Nicotiana tabacum)抗青枯病研究: | 第23-24页 |
| ·番茄(Lycopersicon esculentum)抗青枯病研究 | 第24页 |
| ·马铃薯(Solanum tuberosum L.)抗青枯病研究 | 第24页 |
| ·花生(Arachis hypogaea L.）抗青枯病研究 | 第24-25页 |
| ·抗青枯病基因的克隆 | 第25页 |
| ·植物抗青枯病基因的克隆策略 | 第25-26页 |
| ·花生抗青枯病遗传研究 | 第26页 |
| 4. 本研究的内容和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 花生青枯病抗性鉴定方法的研究 | 第28-36页 |
| 1. 实验材料和方法 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·青枯菌(Ralstonia solanacearum）菌种 | 第28页 |
| ·研究花生青枯病抗病多样性的品种 | 第28-29页 |
| ·青枯菌的培养 | 第29页 |
| ·花生的室内种植 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·菌株致病性的测定 | 第29页 |
| ·几种抗性鉴定方法（室内） | 第29-31页 |
| 2 结果和分析 | 第31-33页 |
| ·不同菌种对同一花生品种（闽花6 号）致病力的测定 | 第31页 |
| ·菌液浓度和OD_(600) 值关系的测定 | 第31-32页 |
| ·伤根灌菌液接种不同花生品种接种天数和品种抗性的关系 | 第32页 |
| ·剪叶法接种不同花生品种接种天数和品种抗性的关系 | 第32-33页 |
| ·叶腋针刺接种法接种不同花生品种接种天数和品种抗性的关系 | 第33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| ·花生青枯病接种的方法、接种和培养的环境条件对抗性鉴定的影响 | 第33-34页 |
| ·几种抗性鉴定方法的优缺点 | 第34页 |
| ·如何客观评价花生品种的青枯病抗性值得商榷 | 第34-36页 |
| 第三章 受青枯菌诱导的花生根全长cDNA 文库的构建及生物信息学分析 | 第36-57页 |
| 1 材料与方法 | 第36-44页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·供试材料 | 第36页 |
| ·供试菌株 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·引物 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-43页 |
| ·花生材料的处理及取样 | 第37页 |
| ·总RNA 提取 | 第37-38页 |
| ·青枯菌接种和对照花生根部组织总RNA 提取 | 第37-38页 |
| ·RNA 的质量检测 | 第38页 |
| ·总RNA 的浓缩 | 第38页 |
| ·全长cDNA 文库的构建 | 第38-42页 |
| ·第一链的合成 | 第39页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第39-40页 |
| ·蛋白酶Ｋ消化 | 第40页 |
| ·Sfi I 酶切 | 第40-41页 |
| ·连接反应 | 第41页 |
| ·电击转化 | 第41-42页 |
| ·文库的扩增和保存 | 第42页 |
| ·文库的鉴定 | 第42-43页 |
| ·文库的初步测序与生物信息学分析 | 第43页 |
| ·受青枯菌诱导的花生全长cDNA 文库的小批量测序及Blast2Go 注释 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-55页 |
| ·取样 | 第44-45页 |
| ·受青枯菌诱导的花生根全长cDNA 文库的构建 | 第45-47页 |
| ·总RNA 的提取 | 第45页 |
| ·浓缩后的总RNA | 第45页 |
| ·双链cDNA 结果 | 第45-47页 |
| ·Sfi I 酶切及胶回收 | 第47页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第47页 |
| ·所构建全长文库的质量分析 | 第47-52页 |
| ·菌落PCR | 第47-48页 |
| ·文库的滴度检测 | 第48页 |
| ·酶切鉴定 | 第48页 |
| ·文库测序结果初步分析 | 第48-52页 |
| ·受青枯菌诱导的花生全长cDNA 文库的小批量测序及Blast2Go 注释 | 第52-55页 |
| ·物种相似性分布（species distribution） | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| ·构建全长cDNA 的重要性 | 第55-56页 |
| ·高质量全长cDNA 文库的筛选在植物抗病中利用价值 | 第56页 |
| ·关于基因的生物信息学分析的有效性 | 第56-57页 |
| 第四章 拟南芥抗青枯病基因的克隆以及植物表达载体的构建 | 第57-71页 |
| 1. 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·植物材料 | 第57页 |
| ·菌种与质粒 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57-58页 |
| ·引物 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·植物材料的准备和处理 | 第58页 |
| ·拟南芥Nd-1 整株总RNA 的提取 | 第58页 |
| ·RT-PCR 克隆RRS1-R 基因 | 第58-59页 |
| ·目的基因的回收以及与T 载体的连接 | 第59页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌DH5 a 感受态细胞和连接产物的转化 | 第59-60页 |
| ·挑取阳性克隆做菌落PCR 鉴定 | 第60页 |
| ·单双酶切鉴定及测序 | 第60页 |
| ·目的片段和重组质粒载体双酶切连接转化及重组质粒鉴定 | 第60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-69页 |
| ·拟南芥Nd-1 整株总RNA 的提取 | 第60-61页 |
| ·RRS1-R 基因的克隆 | 第61页 |
| ·由35s 启动子启动的RRS1-R 植物表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·RRS1-R 基因核苷酸序列的分析 | 第62-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 花生抗青枯病遗传规律基础研究 | 第71-79页 |
| 1. 材料和方法 | 第72-75页 |
| ·花生品种 | 第72页 |
| ·接种用青枯菌菌株 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-75页 |
| ·抗感亲本杂交和种植 | 第72页 |
| ·杂交F_2 代的制备和种植 | 第72-73页 |
| ·杂交F_3 代的种植 | 第73页 |
| ·杂交 F_2、F_3 代青枯病的抗性鉴定 | 第73-74页 |
| ·抗青枯病基因的表型遗传分析 | 第74页 |
| ·抗青枯病基因的基因型遗传分析 | 第74-75页 |
| ·抗、感杂交后代重组近交系群体（RIL）的构建 | 第75页 |
| 2. 结果与分析 | 第75-77页 |
| ·田间抗性鉴定F2代表型分离 | 第75-76页 |
| ·室内抗性鉴定F2 代表型分离 | 第76-77页 |
| ·抗青枯病基因的基因型遗传分析 | 第77页 |
| 3 讨论和与结论 | 第77-79页 |
| ·花生抗青枯病遗传与亲本材料的基因有关 | 第77-78页 |
| ·克隆抗青枯病基因应从抗性属单基因遗传的材料入手 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 附录I 缩写词表 | 第84-85页 |
| 附录II 用到的Marker 电泳图 | 第85-86页 |
| 附录III 本实验所用质粒载体 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
