| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 白藜芦醇的研究进展 | 第10-24页 |
| ·白藜芦醇及其理化性质 | 第10页 |
| ·白黎芦醇生物学作用 | 第10-12页 |
| ·改善心脑血管循环的作用 | 第10-11页 |
| ·抗氧化、抗衰老作用 | 第11页 |
| ·抗病毒、保护肝脏的作用 | 第11页 |
| ·抗肿瘤、抗癌作用 | 第11-12页 |
| ·皮肤保健和美容作用 | 第12页 |
| ·白黎芦醇合酶的研究现状 | 第12-14页 |
| ·水稻遗传转化技术 | 第14-19页 |
| ·水稻转化受体系统 | 第14-15页 |
| ·转基因水稻遗传转化方法 | 第15-18页 |
| ·基因枪法 | 第15页 |
| ·农杆菌介导法 | 第15-16页 |
| ·聚乙二醇法 | 第16页 |
| ·电激法 | 第16-17页 |
| ·花粉管通道法 | 第17页 |
| ·脂质体转化法 | 第17页 |
| ·激光微束转化法 | 第17页 |
| ·超声波转化法 | 第17-18页 |
| ·转基因植物的筛选和鉴定方法 | 第18页 |
| ·转基因水稻面临的问题 | 第18-19页 |
| ·转化技术不完善 | 第18页 |
| ·组织培养过程引起遗传变异 | 第18-19页 |
| ·外源基因的位置效应 | 第19页 |
| ·无选择标记转基因植物研究进展 | 第19-22页 |
| ·标记基因 | 第19-20页 |
| ·去除转基因植物中选择标记基因的必要性 | 第20页 |
| ·去除选择标记基因的策略 | 第20-22页 |
| ·共转化法 | 第20-21页 |
| ·转座子法 | 第21页 |
| ·位点特异性重组系统 | 第21-22页 |
| ·同源序列重组删除选择标记基因 | 第22页 |
| ·多元自主转化(MAT)载体系统 | 第22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·水稻受体材料 | 第24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·质粒载体 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·培养基的配制 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·总RNA 的提取和检测 | 第26-27页 |
| ·材料处理 | 第26页 |
| ·准备工作 | 第26页 |
| ·RNA 抽提 | 第26页 |
| ·总RNA 的纯化 | 第26-27页 |
| ·总RNA 检测 | 第27页 |
| ·目的基因保守区域的获得 | 第27-29页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第27-28页 |
| ·RS 基因保守区域的PCR | 第28-29页 |
| ·目的基因的TA 克隆 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第29页 |
| ·小量提取重组质粒 | 第29页 |
| ·植物表达载体构建 | 第29-32页 |
| ·重组质粒验证 | 第32页 |
| ·水稻幼胚的组织培养及植株再生 | 第32页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌 | 第32页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·根癌农杆菌转化 | 第32页 |
| ·农杆菌转化子PCR 的快速鉴定 | 第32页 |
| ·农杆菌介导转化水稻 | 第32-33页 |
| ·胚性愈伤预培养 | 第32页 |
| ·农杆菌培养 | 第32-33页 |
| ·共培养 | 第33页 |
| ·除菌 | 第33页 |
| ·抗性愈伤的筛选与植株再生 | 第33页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第33-34页 |
| ·植株DNA 分子的抽提 | 第33页 |
| ·抗性植株PCR 检测 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-42页 |
| ·总RNA 的提取 | 第34页 |
| ·葡萄RS 基因ORF 的克隆 | 第34-37页 |
| ·RS 基因双T-DNA 植物表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·植物表达载体导入农杆菌 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导转化台粳九号 | 第40-42页 |
| ·农杆菌介导的RS 基因转化台粳九号 | 第40-41页 |
| ·农杆菌介导转化水稻T0 代植株的分子检测 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·RNA 提取 | 第42页 |
| ·转基因受体材料的选择 | 第42页 |
| ·双T-DNA 植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·农杆菌的生长状态、浓度及浸染 | 第43-44页 |
| 5 主要结论 | 第44页 |
| 6 后继研究展望 | 第44-45页 |
| 7 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录1 本研究所采用的培养基配方 | 第52-55页 |
| 附录2 大肠杆菌质粒的小量提取 | 第55-56页 |
| 附录3 琼脂糖凝胶电泳回收目的片段 | 第56-57页 |
| 附录4 PCR 产物或者酶切片段等DNA 纯化回收 | 第57-59页 |
| 附录6 植物基因组DNA 提取方法 | 第59-60页 |
| 附录7 RS 序列 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |