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神经胶质瘤Wnt信号通路抑制基因甲基化调控研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
前言第11-13页
1 材料、试剂和仪器第13-16页
   ·细胞培养第13页
   ·主要试剂第13页
   ·主要试剂配制第13-15页
   ·主要仪器第15-16页
2 实验方法与步骤第16-23页
   ·组织样本收集第16页
   ·细胞培养及药物处理第16页
   ·基因组DNA 提取及甲基化特异性PCR 分析第16-20页
     ·组织DNA 提取第16-17页
     ·细胞DNA 提取第17页
     ·基因组DNA 重亚硫酸钠修饰第17-18页
     ·甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)分析第18-20页
   ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因的表达第20-22页
     ·Trizol 提取细胞总RNA第20页
     ·细胞总RNA 完整性的鉴定第20-21页
     ·逆转录合成cDNA 第一链第21页
     ·聚合酶链反应检测细胞系中SFRP1、SFRP2、SFRP5、DKK1、WIF-1 及CCND1 的基因表达水平第21-22页
   ·MTT 法测定药物对胶质瘤细胞增殖的影响第22-23页
   ·软琼脂集落形成实验第23页
   ·统计学分析第23页
3 实验结果第23-29页
   ·神经胶质瘤组织样本甲基化检测第23-25页
   ·胶质瘤细胞系A172、U251 甲基化检测第25-26页
   ·去甲基化处理后5 个抑制基因的表达第26页
   ·去甲基化处理后β-catenin 靶基因改变第26-27页
   ·去甲基化药物对细胞增殖能力的影响第27-29页
结论第29-30页
讨论第30-33页
参考文献第33-36页
文献综述第36-48页
附录第48-50页
致谢第50页

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