中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
1 引言 | 第12-14页 |
2 材料、试剂与仪器 | 第14-20页 |
·细胞株 | 第14页 |
·主要试剂及配制 | 第14-18页 |
·主要仪器 | 第18-20页 |
3 方法与步骤 | 第20-38页 |
·细胞培养 | 第20页 |
·阿司匹林细胞毒性测定 | 第20-21页 |
·阿司匹林细胞毒性剂量依赖性测定 | 第20-21页 |
·阿司匹林细胞毒性时间依赖性测定 | 第21页 |
·细胞周期及亚二倍体分析流式细胞术 | 第21页 |
·细胞凋亡 | 第21-23页 |
·形态学观察 | 第21-22页 |
·DNA 电泳观察DNA 片段化 | 第22-23页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第23页 |
·DR5 分布及表达分析 | 第23-29页 |
·免疫细胞化学法观察食管癌细胞R5 表达分布 | 第23-24页 |
·免疫荧光方法观察食管癌细胞DR5 表达分布 | 第24-25页 |
·流式细胞检测细胞DR5 的表达 | 第25-26页 |
·荧光定量PCR 分析DR5 的基因表达 | 第26-29页 |
·流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位变化 JC-1 方法 | 第29-30页 |
·流式细胞仪检测细胞内ROS | 第30页 |
·流式细胞仪检测细胞内Ca~(2+)浓度变化 | 第30-31页 |
·免疫印迹技术检测细胞凋亡的信号转导分子 | 第31-37页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第31页 |
·总蛋白定量(BCA 法) | 第31-32页 |
·蛋白质凝胶电泳 | 第32-33页 |
·银染操作步骤 | 第33-34页 |
·Western blotting 蛋白转印 | 第34-35页 |
·Western blotting 检测蛋白 | 第35-36页 |
·免疫共沉淀法分析DISC 复合物的形成 | 第36-37页 |
·统计学处理 | 第37-38页 |
4 结果 | 第38-57页 |
·阿司匹林对食管癌细胞生长的影响 | 第38-40页 |
·阿司匹林的细胞毒作用 | 第38-39页 |
·阿司匹林对食管癌细胞周期的影响 | 第39-40页 |
·阿司匹林对食管癌细胞凋亡的影响 | 第40-45页 |
·阿司匹林诱导食管癌细胞死亡的形态学变化 | 第40-42页 |
·阿司匹林作用的食管癌鳞癌DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第42-43页 |
·流式细胞术分析食管癌细胞凋亡 | 第43-45页 |
·阿司匹林对食管癌DR5 表达及分布的影响 | 第45-51页 |
·酶免疫细胞化学法观察食管癌细胞DR5 的表达及分布 | 第45-46页 |
·免疫荧光法观察食管癌细胞DR5 的表达及分布 | 第46-47页 |
·流式细胞术分析阿司匹林增强DR5 表达 | 第47-49页 |
·定量PCR 分析DR5 的基因表达 | 第49-51页 |
·提高细胞内ROS 水平 | 第51-52页 |
·阿司匹林对食管癌细胞线粒体膜电位的影响 | 第52-53页 |
·阿司匹林对食管癌细胞内Ca2+的影响 | 第53-54页 |
·阿司匹林激活细胞凋亡的信号转导途径 | 第54-57页 |
5 讨论 | 第57-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
6 结论 | 第67-68页 |
·阿司匹林通过诱导细胞凋亡对食管鳞癌产生细胞毒作用 | 第67页 |
·阿司匹林主要通过激活DR5 启动死亡受体细胞凋亡信号转导途径诱导食管癌细胞凋亡 | 第67-68页 |
文献综述 | 第68-79页 |
附录 | 第79-81页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |