| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 PDA研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 PDA简介 | 第10页 |
| 1.1.2 PDA表型 | 第10-11页 |
| 1.1.3 PDA发生因素 | 第11页 |
| 1.1.4 PDA治疗手段 | 第11-12页 |
| 1.1.5 PDA发生机制 | 第12-13页 |
| 1.2 TFAP2B的研究概况及生物学功能 | 第13-16页 |
| 1.2.1 AP-2家族 | 第13-14页 |
| 1.2.2 转录因子AP-2β | 第14页 |
| 1.2.3 PDA与TFAP2B相关研究 | 第14-16页 |
| 1.3 PDA相关基因 | 第16-17页 |
| 1.3.1 钙-钾离子通道 | 第16页 |
| 1.3.2 BMP-ALK通路 | 第16-17页 |
| 1.3.3 Et-1 | 第17页 |
| 1.3.4 ERBB3 | 第17页 |
| 1.3.5 其他PDA相关基因 | 第17页 |
| 1.4 课题研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-37页 |
| 2.1 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第19-23页 |
| 2.2.1 细胞株和菌株 | 第19页 |
| 2.2.2 质粒载体和工具酶 | 第19页 |
| 2.2.3 抗体和试剂盒 | 第19-20页 |
| 2.2.4 其他试剂和耗材 | 第20页 |
| 2.2.5 溶液配制 | 第20-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.3.1 质粒构建 | 第23-26页 |
| 2.3.2 中量制备 | 第26页 |
| 2.3.3 细胞实验 | 第26-28页 |
| 2.3.4 RNA提取和RT-qPCR | 第28-32页 |
| 2.3.5 单荧光素酶报告实验 | 第32-33页 |
| 2.3.6 软件预测 | 第33页 |
| 2.3.7 Western blotting | 第33-35页 |
| 2.3.8 免疫荧光染色 | 第35-36页 |
| 2.3.9 统计学分析 | 第36-37页 |
| 3 实验结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 TFAP2B的SNP分析 | 第37页 |
| 3.2 成功构建带有His-Tag的WT、A275D、R285Q、R300C的TFAP2B表达质粒 | 第37-38页 |
| 3.3 5种常见细胞系内源TFAP2B mRNA的表达水平 | 第38-39页 |
| 3.4 A275D、R285Q、R300C突变显著下调TFAP2B转录活性 | 第39-40页 |
| 3.5 A275D、R285Q、R300C突变位于TFAP2B的核定位信号区 | 第40-42页 |
| 3.6 A275D、R285Q、R300C编码的TFAP2B蛋白在细胞中的定位发生改变 | 第42-43页 |
| 3.7 提高CITED2的剂量促进激活R285Q、R300C TFAP2B转录活性 | 第43-45页 |
| 3.8 提高A275D、R285Q、R300C的剂量下调了WT TFAP2B的转录活性 | 第45-46页 |
| 3.9 A275D、R285Q、R300C突变改变了TFAP2B下游与PDA相关基因的mRNA表达水平 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 中英文缩写表 | 第63-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
