| 中文摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 中英文缩写 | 第16-17页 |
| 第一部分 前言 | 第17-20页 |
| 第二部分 pIRES-IL-24-ES表达载体的构建与鉴定 | 第20-36页 |
| 一、pIRES-IL-24表达载体的构建与鉴定 | 第20-29页 |
| 1 材料和方法 | 第20-26页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| 2 实验结果 | 第26-28页 |
| ·IL-24 CDNA的扩增 | 第26-27页 |
| ·pGEM-T-IL-24的酶切鉴定 | 第27页 |
| ·pGEM-T-IL-24序列测定结果 | 第27-28页 |
| ·pIRES-IL-24鉴定 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-29页 |
| 4 结论 | 第29页 |
| 二、pIRES-IL-24-ES表达载体的构建与鉴定 | 第29-36页 |
| 1 材料和方法 | 第29-32页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| 2 实验结果 | 第32-34页 |
| ·ES基因的RT-PCR扩增 | 第32页 |
| ·ES的测序结果 | 第32-33页 |
| ·pIRES-ES重组表达载体的鉴定 | 第33页 |
| ·pIRES-IL-24-ES重组表达载体的鉴定 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 4 结论 | 第35-36页 |
| 第三部分 pIRES-IL-24-ES表达载体蛋白活性的测定 | 第36-48页 |
| 1 材料和方法 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| 2 实验结果 | 第41-46页 |
| ·IL-24和ES在NIH3T3细胞转录水平的表达 | 第41页 |
| ·ELISA检测IL-24和ES表达的蛋白 | 第41页 |
| ·Western blot检测IL-24与ES的表达 | 第41-43页 |
| ·IL-24对肝癌细胞凋亡的影响 | 第43页 |
| ·RT-PCR检测IL-24对肝癌细胞凋亡基因表达的影响 | 第43-44页 |
| ·ES对ECV304内皮细胞的影响 | 第44-46页 |
| ·FCM检测ECV304内皮细胞的凋亡 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 4 结论 | 第47-48页 |
| 第四部分 IL-24和ES基因联合治疗小鼠肝癌的实验研究 | 第48-66页 |
| 1 材料和方法 | 第48-52页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| 2 实验结果 | 第52-59页 |
| ·脂质体转染条件的优化 | 第52页 |
| ·重组质粒转染NIH3T3细胞及阳性克隆筛选 | 第52-53页 |
| ·检测肿瘤凋亡和抗凋亡基因mRNA表达 | 第53-54页 |
| ·ELISA检测裸鼠外周血中IL-24和ES表达量 | 第54页 |
| ·免疫组织化学检测肿瘤血管密度 | 第54-57页 |
| ·裸鼠肝肿瘤体积的观察 | 第57-58页 |
| ·实验小鼠生存期检测 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-64页 |
| 4 结论 | 第64-66页 |
| 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附:技术路线图 | 第73-75页 |
| 学习期间已(待)发表文章 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附:两篇待发表的英文论文 | 第77-97页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第97页 |
