| 中文摘要 | 第1-18页 |
| ABSTRACT | 第18-29页 |
| 符号说明 | 第29-31页 |
| 第一部分 驱动蛋白Kif2a在乳腺癌中表达的临床意义 | 第31-46页 |
| 前言 | 第31-36页 |
| 一.微管驱动蛋白Kif2a的来源、结构与功能 | 第32-33页 |
| 二.微管驱动蛋白Kif2a与肿瘤及侵袭转移的关系 | 第33-35页 |
| 三.研究微管驱动蛋白Kif2a的意义和目的 | 第35-36页 |
| 实验材料 | 第36-37页 |
| 一.病例资料 | 第36页 |
| 二.免疫组织化学(IHC)试剂 | 第36页 |
| 三.Real time-PCR主要试剂 | 第36页 |
| 四.主要仪器和设备 | 第36-37页 |
| 实验方法 | 第37-40页 |
| 一.组织收集与保存 | 第37页 |
| 1. 石蜡组织 | 第37页 |
| 2. 新鲜组织总RNA提取 | 第37页 |
| 二.新鲜组织实时定量逆转录多聚酶链反应(Real time RT-PCR) | 第37-40页 |
| 1. Real time RT-PCR | 第37-38页 |
| 2. 琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
| 三.免疫组织化学染色 | 第38-40页 |
| 四.统计学处理方法 | 第40页 |
| 结果 | 第40-41页 |
| 一.驱动蛋白Kif2a在乳腺癌和癌旁组织中的表达情况 | 第40页 |
| 1. Kif2a在乳腺癌组织中的表达高于相应癌旁组织 | 第40页 |
| 2. Kif2a在乳腺癌和癌旁组织中mRNA水平的表达 | 第40页 |
| 二.Kif2a在乳腺癌组织中过表达与临床病理特点的相关性分析 | 第40-41页 |
| 三.Kif2a在乳腺癌组织中表达与病人预后的关系 | 第41页 |
| 讨论 | 第41-42页 |
| 小结 | 第42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 第二部分 转染Kif2a-siRNA对乳腺癌MCF-7细胞恶性行为的影响 | 第46-64页 |
| 前言 | 第46-58页 |
| 实验材料 | 第47-51页 |
| 一.细胞系 | 第47页 |
| 二.Kif2a-siRNA转染 | 第47页 |
| 三.RNA提取及RT-PCR试剂 | 第47-48页 |
| 四.Western Blot检测试剂 | 第48-49页 |
| 五.细胞功能实验试剂 | 第49页 |
| 六.四甲基偶氮唑蓝法(Methyl Thiazolyl Tetrazoliun,MTT)检测试剂 | 第49-50页 |
| 七.细胞凋亡检测 | 第50页 |
| 八.迁移和侵袭实验 | 第50页 |
| 九.主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 实验方法 | 第51-56页 |
| 一.乳腺癌细胞株筛选 | 第51页 |
| 二.细胞总RNA提取 | 第51-52页 |
| 三.Western Blotting检测 | 第52-53页 |
| 四.Kif2a-siRNA转染 | 第53-54页 |
| 五.MTT增殖检测 | 第54页 |
| 六.细胞迁移能力的检测 | 第54-55页 |
| 七.细胞侵袭能力的检测 | 第55页 |
| 八.流式细胞术检测细胞凋亡 | 第55-56页 |
| 九.统计学处理方法 | 第56页 |
| 实验结果 | 第56-58页 |
| 一.沉默Kif2a基因对乳腺癌细胞MCF-7形态的影响 | 第56页 |
| 二.乳腺癌MCF-7细胞转染Kif2a-siRNA后Kif2a转录水平和蛋白水平的表达降低 | 第56页 |
| 三.沉默Kif2a基因抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖 | 第56-57页 |
| 四.沉默Kif2a基因抑制乳腺癌MCF-7细胞的迁移能力 | 第57页 |
| 五.沉默Kif2a基因抑制乳腺癌MCF-7细胞的侵袭能力 | 第57页 |
| 六.沉默Kif2a基因对乳腺癌MCF-7细胞凋亡率无明显影响 | 第57-58页 |
| 讨论 | 第58-61页 |
| 小结 | 第61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 第三部分 驱动蛋白Kif2a与癌胚抗原黏附分子CEACAM1在乳腺癌组织中表达以及与预后的关系 | 第64-78页 |
| 前言 | 第64-66页 |
| 一.CEACAM1的结构 | 第64页 |
| 二.CEACAM1与肿瘤细胞生长 | 第64-65页 |
| 三.CEACAMl与肿瘤血管生成 | 第65-66页 |
| 实验材料 | 第66-67页 |
| 一.病例资料 | 第66页 |
| 二.免疫组织化学染色试剂 | 第66-67页 |
| 三.主要仪器和设备 | 第67页 |
| 实验方法 | 第67-68页 |
| 一.病人和组织标本收集 | 第67页 |
| 二.免疫组织化学染色(IHC) | 第67-68页 |
| 三.统计学处理方法 | 第68页 |
| 实验结果 | 第68-69页 |
| 一.驱动蛋白Kif2a在乳腺癌组织中表达低于相应癌旁组织 | 第68页 |
| 二.CEACAM1在乳腺癌组织中表达低于相应癌旁组织 | 第68-69页 |
| 三.驱动蛋白Kif2a与CEACAM1在乳腺癌组织中表达的相关性 | 第69页 |
| 四.CEACAM1在乳腺癌组织的表达水平与生存率有关 | 第69页 |
| 讨论 | 第69-72页 |
| 小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 论文不足之处 | 第78-79页 |
| 附图表 | 第79-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第92-93页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第93-94页 |
| 附件 | 第94-112页 |
