| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第1章 引言 | 第15-31页 |
| 1.1 自溶 | 第16-18页 |
| 1.2 水产动物自溶 | 第18-20页 |
| 1.3 海参自溶 | 第20-21页 |
| 1.4 胶原蛋白 | 第21-25页 |
| 1.5 与海参自溶相关蛋白酶研究 | 第25-28页 |
| 1.5.1 金属蛋白酶 | 第26-28页 |
| 1.5.2 丝氨酸蛋白酶 | 第28页 |
| 1.6 本课题研究的目的与内容 | 第28-31页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第28-29页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第29-30页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第30-31页 |
| 第2章 刺参胶原蛋白的研究 | 第31-63页 |
| 2.1 引言 | 第31-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 材料 | 第32-33页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第33-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-57页 |
| 2.3.1 刺参体壁的扫描电镜观察 | 第39-40页 |
| 2.3.2 刺参胶原(SjPSC)的制备 | 第40-41页 |
| 2.3.3 SjPSC的氨基酸组成分析 | 第41-42页 |
| 2.3.4 SjPSC扫描电镜分析 | 第42-43页 |
| 2.3.5 SjPSC的 Zeta电位分析 | 第43页 |
| 2.3.6 SjPSC的紫外可见分光光谱分析 | 第43-44页 |
| 2.3.7 SjPSC的傅立叶红外光谱分析 | 第44页 |
| 2.3.8 SjPSC的圆二色谱(CD)分析 | 第44-45页 |
| 2.3.9 不同动物I型胶原蛋白的热稳定性分析 | 第45-46页 |
| 2.3.10 抗SjPSC多克隆抗体的纯化 | 第46-48页 |
| 2.3.11 刺参胶原蛋白α1 链(SjCOLα)基因的克隆 | 第48-49页 |
| 2.3.12 SjCOLα生物信息学分析 | 第49-54页 |
| 2.3.13 胶原蛋白α_1链基因在刺参不同组织内表达水平分析 | 第54-56页 |
| 2.3.14 刺参胶原蛋白的质谱鉴定 | 第56-57页 |
| 2.4 讨论 | 第57-63页 |
| 2.4.1 刺参SjPSC的制备及生化特性分析 | 第58-59页 |
| 2.4.2 刺参SjCOLα基因的克隆及结构特征分析 | 第59-60页 |
| 2.4.3 刺参SjPSC的热稳定性分析 | 第60-63页 |
| 第3章 刺参基质金属蛋白酶-2的研究 | 第63-93页 |
| 3.1 引言 | 第63-64页 |
| 3.2 材料与方法 | 第64-70页 |
| 3.2.1 材料 | 第64-66页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第66-70页 |
| 3.3 结果与分析 | 第70-88页 |
| 3.3.1 MMP-2基因的克隆 | 第70-71页 |
| 3.3.2 MMP-2的生物信息学分析 | 第71-75页 |
| 3.3.3 MMP-2催化区的表达与纯化 | 第75-76页 |
| 3.3.4 rMMP-2的CD光谱分析 | 第76-77页 |
| 3.3.5 抗rMMP-2多克隆抗体的制备 | 第77-79页 |
| 3.3.6 蛋白酶抑制剂和金属离子对rMMP-2酶活力的影响 | 第79-80页 |
| 3.3.7 pH和温度对rMMP-2酶活力的影响 | 第80-81页 |
| 3.3.8 MMP-2对刺参自溶的影响 | 第81-85页 |
| 3.3.9 rMMP-2应用于制备生物活性胶原肽 | 第85-88页 |
| 3.4 讨论 | 第88-93页 |
| 3.4.1 刺参MMP-2基因的克隆 | 第88页 |
| 3.4.2 刺参MMP-2蛋白结构特点分析 | 第88-90页 |
| 3.4.3 刺参rMMP-2的制备及活性分析 | 第90-91页 |
| 3.4.4 刺参MMP-2在自溶过程中的作用分析 | 第91-93页 |
| 第4章 刺参丝氨酸蛋白酶(SP)的研究 | 第93-120页 |
| 4.1 引言 | 第93-94页 |
| 4.2 材料与方法 | 第94-99页 |
| 4.2.1 材料 | 第94-95页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第95-99页 |
| 4.3 结果与分析 | 第99-116页 |
| 4.3.1 SP基因的克隆 | 第99页 |
| 4.3.2 SP在刺参不同组织的表达分析 | 第99-101页 |
| 4.3.3 SP的表达与纯化 | 第101-105页 |
| 4.3.4 rSP的酶学性质 | 第105-108页 |
| 4.3.5 rSP对刺参自溶的影响 | 第108-112页 |
| 4.3.6 rSP降解刺参胶原蛋白过程的研究 | 第112-116页 |
| 4.4 讨论 | 第116-120页 |
| 4.4.1 刺参SP的制备 | 第116-117页 |
| 4.4.2 刺参rSP的酶活性分析 | 第117页 |
| 4.4.3 刺参SP降解胶原蛋白酶位点分析 | 第117-120页 |
| 第5章 结论与展望 | 第120-123页 |
| 5.1 结论 | 第120-121页 |
| 5.2 创新点 | 第121页 |
| 5.3 展望 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-138页 |
| 附录 | 第138-152页 |
| 攻读博士学位期间发表的相关成果 | 第152页 |
