摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-33页 |
1.1 机体的免疫系统 | 第13-20页 |
1.1.1 概述 | 第13页 |
1.1.2 先天性免疫系统 | 第13-14页 |
1.1.3 适应性免疫系统 | 第14-15页 |
1.1.4 先天性免疫系统和适应性免疫系统的联系 | 第15页 |
1.1.5 T细胞 | 第15-17页 |
1.1.6 MHC分子 | 第17-20页 |
1.2 MR1分子 | 第20-24页 |
1.2.1 MR1的特征描述 | 第20-21页 |
1.2.2 MR1抗原加工和呈递途径 | 第21-22页 |
1.2.3 MR1的配体 | 第22-24页 |
1.3 MAIT细胞 | 第24-32页 |
1.3.1 MAIT细胞的发现 | 第24-25页 |
1.3.2 MATI细胞的组织分布 | 第25-27页 |
1.3.3 MAIT细胞的发育和表型 | 第27-28页 |
1.3.4 MAIT细胞的活化 | 第28-31页 |
1.3.5 MAIT细胞在疾病中的作用 | 第31-32页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 猪MR1基因的克隆及特征描述 | 第33-42页 |
2.1 材料与方法 | 第34-35页 |
2.1.1 实验动物 | 第34页 |
2.1.2 猪MR1基因扩增 | 第34页 |
2.1.3 猪MR1基因全长的获得 | 第34页 |
2.1.4 猪MR1基因的组织表达分析 | 第34-35页 |
2.1.5 在线资源和序列比较 | 第35页 |
2.2 结果与分析 | 第35-40页 |
2.2.1 猪MR1转录本的克隆 | 第35-38页 |
2.2.2 pMR1在组织中的表达分布 | 第38-39页 |
2.2.3 MR1核苷酸序列在物种间的比对 | 第39-40页 |
2.3 讨论 | 第40-42页 |
第三章 猪MR1的表达及结构分析 | 第42-53页 |
3.1 材料与方法 | 第42-45页 |
3.1.1 实验动物 | 第42-43页 |
3.1.2 重组质粒pEGFP-N1-pMR1的构建 | 第43页 |
3.1.3 pEGFP-N1和pEGFP-N1-pMR1质粒转染HEK293和HeLa细胞 | 第43页 |
3.1.4 Western blot检测pMR1-EGFP融合蛋白的表达 | 第43-44页 |
3.1.5 细胞免疫荧光染色检测EGFP和猪MR1在细胞内的表达定位 | 第44页 |
3.1.6 细胞悬液制备 | 第44-45页 |
3.1.7 流式细胞检测细胞猪MR1的表达 | 第45页 |
3.1.8 MR1氨基酸序列比对 | 第45页 |
3.1.9 预测猪MR1的空间结构以及pMR1与5-OP-RU对接模式 | 第45页 |
3.2 结果与分析 | 第45-51页 |
3.2.1 重组质粒pEGFP-N1-pMR1的鉴定 | 第45-46页 |
3.2.2 转染细胞荧光检测 | 第46-47页 |
3.2.3 mAb26.5与猪MR1 的交叉反应性 | 第47-48页 |
3.2.4 mAb26.5检测猪细胞MR1的表达 | 第48-49页 |
3.2.5 MR1氨基酸序列在物种间的比对 | 第49-50页 |
3.2.6 pMR1-5-OP-RU复合物的对接结构 | 第50-51页 |
3.3 讨论 | 第51-53页 |
第四章 猪MAIT细胞TCR的克隆及多样性分析 | 第53-63页 |
4.1 材料和方法 | 第54-57页 |
4.1.1 动物、组织和细胞 | 第54页 |
4.1.2 猪MAIT细胞TCRα链的扩增 | 第54页 |
4.1.3 单细胞PCR分析MAIT细胞TCRβ链的使用情况 | 第54-56页 |
4.1.4 序列比对 | 第56-57页 |
4.2 结果与分析 | 第57-61页 |
4.2.1 猪MAIT细胞TCRα链的扩增 | 第57页 |
4.2.2 分析猪MAIT细胞TCRα链的多样性 | 第57-58页 |
4.2.3 人、小鼠、牛和猪MAIT细胞TCR Vα-Jα的比对 | 第58-59页 |
4.2.4 猪MAIT细胞TCRβ链的多样性分析 | 第59-61页 |
4.3 讨论 | 第61-63页 |
第五章 猪MAIT细胞的组织分布及表型分析 | 第63-74页 |
5.1 材料和方法 | 第64-67页 |
5.1.1 动物、组织和细胞 | 第64-66页 |
5.1.2 流式细胞仪分选CD8~+、CD4~+和DNT细胞 | 第66页 |
5.1.3 qPCR分析MAIT细胞TCR Vα-Jα在组织和细胞中的表达 | 第66页 |
5.1.4 MAIT细胞表面分子和转录因子的表达分析 | 第66-67页 |
5.1.5 统计分析 | 第67页 |
5.2 结果与分析 | 第67-72页 |
5.2.1 猪MAIT细胞在组织中的相对分布 | 第67-68页 |
5.2.2 猪MAIT细胞在不同组织的3个T细胞亚群中的分布 | 第68-70页 |
5.2.3 引物特异性分析 | 第70页 |
5.2.4 猪MAIT细胞表面分子的表达分析 | 第70-71页 |
5.2.5 猪MAIT细胞转录因子的表达分析 | 第71-72页 |
5.3 讨论 | 第72-74页 |
第六章 全文结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-89页 |
附录 | 第89-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
作者简历 | 第93页 |