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MR1-MAIT细胞轴在猪体内存在的研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-33页
    1.1 机体的免疫系统第13-20页
        1.1.1 概述第13页
        1.1.2 先天性免疫系统第13-14页
        1.1.3 适应性免疫系统第14-15页
        1.1.4 先天性免疫系统和适应性免疫系统的联系第15页
        1.1.5 T细胞第15-17页
        1.1.6 MHC分子第17-20页
    1.2 MR1分子第20-24页
        1.2.1 MR1的特征描述第20-21页
        1.2.2 MR1抗原加工和呈递途径第21-22页
        1.2.3 MR1的配体第22-24页
    1.3 MAIT细胞第24-32页
        1.3.1 MAIT细胞的发现第24-25页
        1.3.2 MATI细胞的组织分布第25-27页
        1.3.3 MAIT细胞的发育和表型第27-28页
        1.3.4 MAIT细胞的活化第28-31页
        1.3.5 MAIT细胞在疾病中的作用第31-32页
    1.4 研究的目的和意义第32-33页
第二章 猪MR1基因的克隆及特征描述第33-42页
    2.1 材料与方法第34-35页
        2.1.1 实验动物第34页
        2.1.2 猪MR1基因扩增第34页
        2.1.3 猪MR1基因全长的获得第34页
        2.1.4 猪MR1基因的组织表达分析第34-35页
        2.1.5 在线资源和序列比较第35页
    2.2 结果与分析第35-40页
        2.2.1 猪MR1转录本的克隆第35-38页
        2.2.2 pMR1在组织中的表达分布第38-39页
        2.2.3 MR1核苷酸序列在物种间的比对第39-40页
    2.3 讨论第40-42页
第三章 猪MR1的表达及结构分析第42-53页
    3.1 材料与方法第42-45页
        3.1.1 实验动物第42-43页
        3.1.2 重组质粒pEGFP-N1-pMR1的构建第43页
        3.1.3 pEGFP-N1和pEGFP-N1-pMR1质粒转染HEK293和HeLa细胞第43页
        3.1.4 Western blot检测pMR1-EGFP融合蛋白的表达第43-44页
        3.1.5 细胞免疫荧光染色检测EGFP和猪MR1在细胞内的表达定位第44页
        3.1.6 细胞悬液制备第44-45页
        3.1.7 流式细胞检测细胞猪MR1的表达第45页
        3.1.8 MR1氨基酸序列比对第45页
        3.1.9 预测猪MR1的空间结构以及pMR1与5-OP-RU对接模式第45页
    3.2 结果与分析第45-51页
        3.2.1 重组质粒pEGFP-N1-pMR1的鉴定第45-46页
        3.2.2 转染细胞荧光检测第46-47页
        3.2.3 mAb26.5与猪MR1 的交叉反应性第47-48页
        3.2.4 mAb26.5检测猪细胞MR1的表达第48-49页
        3.2.5 MR1氨基酸序列在物种间的比对第49-50页
        3.2.6 pMR1-5-OP-RU复合物的对接结构第50-51页
    3.3 讨论第51-53页
第四章 猪MAIT细胞TCR的克隆及多样性分析第53-63页
    4.1 材料和方法第54-57页
        4.1.1 动物、组织和细胞第54页
        4.1.2 猪MAIT细胞TCRα链的扩增第54页
        4.1.3 单细胞PCR分析MAIT细胞TCRβ链的使用情况第54-56页
        4.1.4 序列比对第56-57页
    4.2 结果与分析第57-61页
        4.2.1 猪MAIT细胞TCRα链的扩增第57页
        4.2.2 分析猪MAIT细胞TCRα链的多样性第57-58页
        4.2.3 人、小鼠、牛和猪MAIT细胞TCR Vα-Jα的比对第58-59页
        4.2.4 猪MAIT细胞TCRβ链的多样性分析第59-61页
    4.3 讨论第61-63页
第五章 猪MAIT细胞的组织分布及表型分析第63-74页
    5.1 材料和方法第64-67页
        5.1.1 动物、组织和细胞第64-66页
        5.1.2 流式细胞仪分选CD8~+、CD4~+和DNT细胞第66页
        5.1.3 qPCR分析MAIT细胞TCR Vα-Jα在组织和细胞中的表达第66页
        5.1.4 MAIT细胞表面分子和转录因子的表达分析第66-67页
        5.1.5 统计分析第67页
    5.2 结果与分析第67-72页
        5.2.1 猪MAIT细胞在组织中的相对分布第67-68页
        5.2.2 猪MAIT细胞在不同组织的3个T细胞亚群中的分布第68-70页
        5.2.3 引物特异性分析第70页
        5.2.4 猪MAIT细胞表面分子的表达分析第70-71页
        5.2.5 猪MAIT细胞转录因子的表达分析第71-72页
    5.3 讨论第72-74页
第六章 全文结论第74-75页
参考文献第75-89页
附录第89-92页
致谢第92-93页
作者简历第93页

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