中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第13-25页 |
1.1 角膜缘干细胞及其缺乏 | 第13-16页 |
1.1.1 角膜缘干细胞 | 第13-14页 |
1.1.2 角膜缘干细胞缺乏 | 第14-15页 |
1.1.3 角膜缘干细胞缺乏的治疗 | 第15-16页 |
1.2 组织工程的概述 | 第16-17页 |
1.2.1 组织工程概述 | 第16页 |
1.2.2 组织工程材料 | 第16页 |
1.2.3 组织工程的临床应用 | 第16-17页 |
1.3 组织工程角膜 | 第17-22页 |
1.3.1 组织工程角膜 | 第17页 |
1.3.2 组织工程角膜的种子细胞 | 第17-18页 |
1.3.3 组织工程角膜的支架材料 | 第18-22页 |
1.4 洋葱表皮 | 第22-23页 |
1.5 研究意义 | 第23-25页 |
第二章 实验材料与方法 | 第25-38页 |
2.1 实验材料 | 第25-29页 |
2.1.1 仪器与设备 | 第25-26页 |
2.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 抗体 | 第27页 |
2.1.4 实验动物 | 第27页 |
2.1.5 试剂配制 | 第27-28页 |
2.1.6 培养基配制 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-37页 |
2.2.1 293T细胞复苏 | 第29页 |
2.2.2 293T细胞冻存 | 第29页 |
2.2.3 3T3、HCE、HUVCE、TKE2的复苏与冻存 | 第29-30页 |
2.2.4 293T和3T3的细胞培养 | 第30页 |
2.2.5 HCE和HUVEC的细胞培养 | 第30页 |
2.2.6 TKE2细胞的培养 | 第30-31页 |
2.2.7 细胞的计数 | 第31页 |
2.2.8 兔角膜细胞的取材和消化 | 第31页 |
2.2.9 兔角膜上皮片分离与单细胞的消化 | 第31-32页 |
2.2.10 兔角膜上皮细胞在OEM上空气暴露培养 | 第32页 |
2.2.11 原代兔角膜基质细胞培养 | 第32-33页 |
2.2.12 苏木素-伊红染色 | 第33页 |
2.2.13 角膜上皮细胞免疫荧光染色 | 第33-34页 |
2.2.14 冰冻切片的制备 | 第34页 |
2.2.15 组织工程角膜上皮免疫荧光染色 | 第34-35页 |
2.2.16 扫描电镜 | 第35-36页 |
2.2.17 透射电镜 | 第36页 |
2.2.18 OEM的分离与制备 | 第36-37页 |
2.3 主要软件 | 第37-38页 |
第三章 结果与分析 | 第38-51页 |
3.1 材料的制备与观察 | 第38-43页 |
3.1.1 OEM的分离与制作过程 | 第38页 |
3.1.2 OEM的透明度观察 | 第38-39页 |
3.1.3 OEM的表面微观形态 | 第39-40页 |
3.1.4 OEM的超微结构 | 第40-41页 |
3.1.5 以OEM为载体细胞系和原代细胞的培养 | 第41-43页 |
3.2 组织工程角膜上皮的构建 | 第43-51页 |
3.2.1 以OEM为载体兔角膜上皮细胞培养过程观察 | 第43-45页 |
3.2.2 以OEM为载体兔角膜上皮细胞的超微形态 | 第45-46页 |
3.2.3 以OEM为载体兔角膜上皮细胞的增殖情况 | 第46页 |
3.2.4 以OEM为载体兔角膜上皮细胞连接蛋白的检测 | 第46-47页 |
3.2.5 以OEM为载体兔角膜上皮细胞分化蛋白的检测 | 第47-48页 |
3.2.6 以OEM为载体构建的组织工程角膜上皮 | 第48-49页 |
3.2.7 以OEM为载体组织工程角膜上皮连接蛋白和分化蛋白检测 | 第49-51页 |
第四章 讨论 | 第51-54页 |
4.1 OEM载体的光学特性和超微结构 | 第51页 |
4.2 OEM载体对其他细胞的影响 | 第51-52页 |
4.3 以OEM为载体构建组织工程角膜上皮组织形态学分析 | 第52页 |
4.4 以OEM为载体体外培养的角膜上皮细胞的表型分析 | 第52-53页 |
4.5 以OEM为载体构建组织工程角膜上皮表型分析 | 第53-54页 |
第五章 结论 | 第54-55页 |
问题与展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
缩略词索引 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |