| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-24页 |
| 1.1 天然橡胶的生产现状 | 第9页 |
| 1.2 巴西橡胶树的生物学研究现状 | 第9-10页 |
| 1.3 巴西橡胶树产胶及排胶机制的研究现状 | 第10-12页 |
| 1.4 巴西橡胶树响应乙烯刺激的生理及其分子调控机制研究进展 | 第12-15页 |
| 1.4.1 橡胶树中乙烯合成及信号转导通路 | 第12页 |
| 1.4.2 橡胶树响应乙烯刺激的生理生化基础 | 第12-13页 |
| 1.4.3 橡胶树响应乙烯利刺激的分子生物学基础 | 第13-15页 |
| 1.5 REF/SRPP蛋白家族的研究进展 | 第15-23页 |
| 1.5.1 简介 | 第15-17页 |
| 1.5.2 REF/SRPP家族成员的性质及进化分析 | 第17-18页 |
| 1.5.3 REF/SRPP家族成员的表达调控分析 | 第18-19页 |
| 1.5.4 REF/SRPP蛋白的定位、结构和功能 | 第19-23页 |
| 1.6 本项研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-35页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.1 植物材料和处理 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第25-35页 |
| 2.2.1 家族基因的获取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR分析 | 第26-28页 |
| 2.2.4 Southern印迹分析 | 第28-29页 |
| 2.2.5 REF/SRPP-GFP融合标签的瞬时表达 | 第29页 |
| 2.2.6 胶乳蛋白提取及浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.2.7 胶乳蛋白2-DE | 第30页 |
| 2.2.8 MALDI-TOF和MALDI-TOF-TOF质谱鉴定蛋白 | 第30-31页 |
| 2.2.9 REF/SRPP蛋白表达情况分析 | 第31页 |
| 2.2.10 多克隆兔血清抗体制备 | 第31-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-51页 |
| 3.1 RNA的提取及反转录 | 第35页 |
| 3.2 巴西橡胶树REF/SRPP家族成员 | 第35-37页 |
| 3.3 巴西橡胶树REF/SRPP家族成员进化树的构建及分析 | 第37-38页 |
| 3.4 巴西橡胶树REF/SRPP家族14个成员基因及蛋白结构分析 | 第38页 |
| 3.5 巴西橡胶树REF/SRPP家族14个成员的基因表达分析 | 第38-40页 |
| 3.6 巴西橡胶树REF/SRPP家族14个成员的蛋白表达情况分析 | 第40页 |
| 3.7 基因的同源拷贝数分析 | 第40-41页 |
| 3.8 REF/SRPP蛋白的瞬时表达分析 | 第41-42页 |
| 3.9 REF/SRPP蛋白异构体的鉴定 | 第42-44页 |
| 3.10 REF/SRPP异构体的表达特性分析 | 第44-46页 |
| 3.11 REF/SRPP的抗体制备及检测 | 第46-51页 |
| 3.11.1 原核表达载体构建及诱导表达 | 第46页 |
| 3.11.2 诱导蛋白的纯化 | 第46-48页 |
| 3.11.3 抗体的制备及检测 | 第48-49页 |
| 3.11.4 REF138、SRPP204和REF258总蛋白的western检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 REF/SRPP基因家族的整体性分析 | 第51页 |
| 4.2 REF亚家族与SRPP亚家族之间的差异 | 第51-52页 |
| 4.3 特异的多结构域成员 | 第52-53页 |
| 4.4 REF/SRPP的表达分析 | 第53页 |
| 4.5 REF/SRPP的异构体分析 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 攻读学位期间发表学术论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
