致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1.文献综述 | 第8-13页 |
1.1 奶牛乳房炎 | 第8-10页 |
1.1.1 奶牛乳房炎的危害 | 第8页 |
1.1.2 奶牛乳房炎的病因 | 第8页 |
1.1.3 奶牛乳腺上皮细胞免疫防御机制 | 第8页 |
1.1.4 奶牛乳腺上皮细胞信号通路转导 | 第8-9页 |
1.1.5 LPS/TLR4信号通路 | 第9页 |
1.1.6 NF-κB信号通路 | 第9-10页 |
1.2 褪黑素 | 第10-13页 |
1.2.1 褪黑素受体与分布 | 第10页 |
1.2.2 褪黑素的免疫作用 | 第10-11页 |
1.2.3 褪黑素抗氧化作用 | 第11页 |
1.2.4 炎症和氧化的关系 | 第11-13页 |
2 引言 | 第13-14页 |
3 材料与方法 | 第14-19页 |
3.1 材料 | 第14页 |
3.1.1 细胞 | 第14页 |
3.1.2 试剂 | 第14页 |
3.1.3 仪器 | 第14页 |
3.1.4 溶液配制 | 第14页 |
3.2 试验方法 | 第14-19页 |
3.2.1 细胞培养 | 第14-15页 |
3.2.1.1 细胞复苏 | 第14页 |
3.2.1.2 细胞传代 | 第14-15页 |
3.2.1.3 细胞冻存 | 第15页 |
3.2.2 细胞模型的建立 | 第15页 |
3.2.2.1 LPS细胞毒性检测 | 第15页 |
3.2.2.2 LPS对MAC-T细胞炎症因子的影响 | 第15页 |
3.2.3 褪黑素对LPS诱导的MAC-T细胞损伤的保护作用 | 第15-16页 |
3.2.3.1 褪黑素对MAC-T细胞增殖的影响 | 第15页 |
3.2.3.2 褪黑素对LPS诱导的MAC-T细胞炎症因子和TLR4/NF-κB信号通路的影响 | 第15-16页 |
3.2.4 实时荧光定量PCR法检测相关基因表达水平 | 第16-19页 |
3.2.4.1 引物设计 | 第16页 |
3.2.4.2 总RNA的提取及cDNA的合成 | 第16-17页 |
3.2.4.3 RNA检测 | 第17页 |
3.2.4.4 cDNA的合成 | 第17页 |
3.2.4.5 实时荧光定量PCR检测相关基因表达水平 | 第17-19页 |
4.结果与分析 | 第19-23页 |
4.1 LPS对牛乳腺上皮细胞活力的影响 | 第19-20页 |
4.2 LPS对炎症基因表达量的影响 | 第20页 |
4.3 褪黑素对乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第20-21页 |
4.4 褪黑素对LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性因子表达水平的影响 | 第21页 |
4.5 褪黑素对LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞NF-κB信号通路的影响 | 第21-23页 |
5 讨论和结论 | 第23-25页 |
5.1 讨论 | 第23-24页 |
5.1.1 LPS对MAC-T细胞增殖的影响 | 第23页 |
5.1.2 LPS对MAC-T细胞炎症因子表达的影响 | 第23-24页 |
5.1.3 MLT对MAC-T细胞增殖的作用 | 第24页 |
5.1.4 褪黑素对LPS诱导MAC-T细胞炎症的影响 | 第24页 |
5.2 结论 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-30页 |
英文摘要 | 第30页 |