| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-16页 |
| 第一部分 ：PAK4对肾小管细胞上皮-间质转分化的调节作用 | 第16-38页 |
| 1 前言 | 第16-17页 |
| 2 实验材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| 2.1.5 引物的设计与合成 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 细胞实验 | 第21-23页 |
| 2.2.2 RT-PCR | 第23-25页 |
| 2.2.3 蛋白提取 | 第25页 |
| 2.2.4 Western Blot | 第25-27页 |
| 2.2.5 Transwell | 第27页 |
| 2.2.6 细胞免疫荧光 | 第27-28页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第28页 |
| 3 实验结果 | 第28-35页 |
| 3.1 TGF-β1诱导肾小管上皮细胞发生EMT | 第28-33页 |
| 3.1.1 TGF-β1诱导对肾小管上皮细胞形态的影响 | 第28-29页 |
| 3.1.2 TGF-β1对肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin蛋白及mRNA表达的影响 | 第29-33页 |
| 3.1.3 TGF-β1对肾小管上皮细胞迁移能力的影响 | 第33页 |
| 3.2 TGF-β1诱导肾小管上皮细胞中PAK4蛋白及mRNA表达 | 第33-35页 |
| 3.2.1 不同浓度TGF-β1对肾小管上皮细胞PAK4蛋白及mRNA表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2 TGF-β1不同刺激时间对肾小管上皮细胞PAK4蛋白及mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 第二部分 ：PAK4在TGF-β诱导的人肾小管细胞上皮-间质转分化中的机制研究 | 第38-68页 |
| 1 前言 | 第38页 |
| 2 实验材料与方法 | 第38-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-42页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第38页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第38-40页 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 | 第40-41页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第41-42页 |
| 2.1.5 引物的设计与合成 | 第42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-51页 |
| 2.2.1 细胞实验 | 第42-44页 |
| 2.2.2 RT-PCR | 第44-46页 |
| 2.2.3 蛋白提取 | 第46页 |
| 2.2.4 Western Blot | 第46-48页 |
| 2.2.5 克隆PAK4基因的全长,构建到质粒载体中 | 第48-49页 |
| 2.2.6 慢病毒感染 | 第49-50页 |
| 2.2.7 shRNA | 第50页 |
| 2.2.8 Transwell | 第50页 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光 | 第50-51页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第51页 |
| 3 实验结果 | 第51-65页 |
| 3.1 过表达以及沉默PAK4对肾小管上皮细胞发生上皮间质转分化的影响 | 第51-57页 |
| 3.1.1 慢病毒感染效果验证 | 第51-52页 |
| 3.1.2 过表达PAK4对肾小管上皮细胞形态的影响 | 第52-53页 |
| 3.1.3 过表达PAK4对肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin表达的影响 | 第53-55页 |
| 3.1.4 过表达PAK4对肾小管上皮细胞迁移能力的影响 | 第55页 |
| 3.1.5 沉默PAK4对肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin表达的影响 | 第55-57页 |
| 3.2 过表达PAK4促进TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化 | 第57-59页 |
| 3.2.1 过表达PAK4对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.2 过表达PAK4对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin mRNA表达的影响 | 第58-59页 |
| 3.2.3 过表达PAK4对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞迁移能力的影响 | 第59页 |
| 3.3 沉默PAK4对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响 | 第59-63页 |
| 3.3.1 沉默PAK4对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin蛋白表达的影响 | 第59-61页 |
| 3.3.2 沉默PAK4对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞E-cadherin、Fibronectin及Vimentin mRNA表达的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.3 沉默PAK4对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞迁移能力的影响 | 第62-63页 |
| 3.4 PAK4对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的机制研究 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 综述 | 第78-87页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 个人简历 | 第89页 |
