| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 英文缩略语 | 第13-18页 |
| 第一部分 ：宫内蛋白营养不良对IUGR子鼠胰腺发育的影响 | 第18-35页 |
| 1 前言 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-24页 |
| 2.1 实验动物、仪器和试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验动物和饲料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 实验试剂的配置 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 建立IUGR大鼠动物模型 | 第21页 |
| 2.2.2 实验对象选择 | 第21页 |
| 2.2.3 新生鼠标本采集及处理 | 第21-22页 |
| 2.2.4 幼鼠和成年鼠标本采集及处理 | 第22-23页 |
| 2.2.5 10 M大鼠行正糖-高胰岛素钳夹实验 | 第23-24页 |
| 2.2.6 检测血清胰岛素水平 | 第24页 |
| 2.2.7 胰腺石蜡切片免疫荧光染色 | 第24页 |
| 2.3 统计学分析 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-32页 |
| 3.1 宫内蛋白营养不良对IUGR子鼠胰腺发育的影响 | 第24-29页 |
| 3.2 宫内蛋白营养不良对IUGR对子鼠胰岛功能的影响 | 第29-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 第二部分 ：MeDIP-chip筛选IUGR新生鼠胰腺发育相关基因差异性DNA甲基化位点 | 第35-60页 |
| 1 前言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-42页 |
| 2.1 DNA甲基化芯片 | 第36-41页 |
| 2.1.1 实验标本 | 第36页 |
| 2.1.2 试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 2.1.4 MeDIP-chip方法(图2.1) | 第37-39页 |
| 2.1.5 DNA标记和序列杂交 | 第39页 |
| 2.1.6 图像采集和数据分析 | 第39-41页 |
| 2.2 通过文本挖掘建立胰腺发育相关基因数据库 | 第41页 |
| 2.2.1 检索文献条目 | 第41页 |
| 2.2.2 处理 | 第41页 |
| 2.3 确立候选差异性DNA甲基化位点 | 第41-42页 |
| 3 实验结果 | 第42-56页 |
| 3.1 定量和定性检测DNA | 第42页 |
| 3.2 DNA甲基化芯片结果判断 | 第42页 |
| 3.3 MeDIP-realtime PCR方法检测免疫共沉淀后的DNA | 第42-43页 |
| 3.4 DNA甲基化芯片对原始数据的质量评估 | 第43-44页 |
| 3.5 IUGR新生鼠胰岛差异DNA甲基化位点分析 | 第44-51页 |
| 3.6 差异性DNA甲基化位点的功能分类 | 第51-53页 |
| 3.7 通过文本挖掘建立胰腺发育相关基因数据库 | 第53-55页 |
| 3.8 再次筛选候选差异性DNA甲基化位点 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 第三部分 ：IUGR大鼠胰腺发育关键基因启动子区DNA甲基化水平的变化规律 | 第60-78页 |
| 1 前言 | 第60-61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-67页 |
| 2.1 实验动物 | 第61页 |
| 2.2 试剂 | 第61页 |
| 2.3 主要仪器 | 第61-62页 |
| 2.4 实验方法 | 第62-67页 |
| 2.4.1 MeDIP-realtime PCR方法检测单个位点DNA甲基化水平 | 第62-63页 |
| 2.4.2 realtime PCR方法检测基因mRNA表达情况 | 第63-65页 |
| 2.4.3 免疫荧光双染方法检测Nkx2.2和Nkx6.1在大鼠胰腺β细胞表达情况 | 第65-66页 |
| 2.4.4 Western blot方法检测Nkx2.2和Nkx6.1在大鼠胰岛的表达 | 第66-67页 |
| 2.5 统计学处理 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-75页 |
| 3.1 六个候选位点在IUGR新生鼠胰岛启动子区DNA甲基化水平及其相对应基因mRNA表达情况 | 第67-69页 |
| 3.2 六个候选位点在10M两组大鼠胰岛启动子区DNA甲基化水平及其相对应基因mRNA表达情况 | 第69-70页 |
| 3.3 Nkx2.2和Nkx6.1在IUGR新生鼠和10M大鼠胰岛的表达情况 | 第70-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 综述 | 第86-95页 |
| 参考文献 | 第90-95页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 个人简介 | 第97页 |
