| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 Doublesex基因 | 第12-14页 |
| 1.1.1 Doublesex基因的发现 | 第12页 |
| 1.1.2 Doublesex基因的选择性剪接 | 第12-13页 |
| 1.1.3 Doublesex基因功能及其研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9技术原理及应用 | 第14-18页 |
| 1.2.1 CRISPR/Cas9技术原理 | 第14-16页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas9技术优缺点 | 第16页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9技术方法 | 第16页 |
| 1.2.4 CRISPR/Cas9技术在昆虫中的应用 | 第16-18页 |
| 1.3 橘小实蝇的危害及其防治现状 | 第18-19页 |
| 1.4 研究内容和目的意义 | 第19-20页 |
| 1.4.1 研究内容和目的意义 | 第19页 |
| 1.4.2 拟采用的技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-63页 |
| 3.1 Bddsx基因克隆与分析 | 第37-45页 |
| 3.1.1 Bddsx基因系统进化分析 | 第37页 |
| 3.1.2 Bddsx基因蛋白序列分析 | 第37-39页 |
| 3.1.3 Bddsx基因克隆 | 第39-41页 |
| 3.1.4 Bddsx基因剪接模式与结构域分析 | 第41-43页 |
| 3.1.5 Bddsx基因表达模式分析 | 第43-45页 |
| 3.2 BddsxsgRNA设计与筛选 | 第45-51页 |
| 3.2.1 sgRNA靶标位点设计 | 第45-47页 |
| 3.2.2 sgRNA转录效率评估 | 第47-50页 |
| 3.2.3 sgRNA活性检测 | 第50-51页 |
| 3.3 基于Cas9mRNA和蛋白的橘小实蝇CRISPR/Cas9技术 | 第51-59页 |
| 3.3.1 Cas9mRNA转录与RNP复合体制备 | 第51-53页 |
| 3.3.2 橘小实蝇胚胎显微注射 | 第53页 |
| 3.3.3 两种方法删除效率评估 | 第53-55页 |
| 3.3.4 橘小实蝇BddsxF基因敲除检测 | 第55-57页 |
| 3.3.5 脱靶效应评估 | 第57-59页 |
| 3.4 Bddsx基因功能研究 | 第59-63页 |
| 3.4.1 对橘小实蝇生殖力的影响 | 第59-60页 |
| 3.4.2 对橘小实蝇性比的影响 | 第60-61页 |
| 3.4.3 对橘小实蝇表型特征的影响 | 第61-63页 |
| 4 总结与展望 | 第63-67页 |
| 4.1 橘小实蝇CRISPR/Cas9技术 | 第63-64页 |
| 4.2 Bddsx基因及其功能研究 | 第64-66页 |
| 4.2.1 Bddsx基因的选择性剪接模式 | 第64-65页 |
| 4.2.2 Bddsx基因表达模式分析 | 第65页 |
| 4.2.3 Bddsx基因的功能 | 第65-66页 |
| 4.3 研究创新点 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
