| 缩略词 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 细胞凋亡 | 第11页 |
| 2 细胞凋亡的信号转导途径 | 第11-13页 |
| 2.1 线粒体介导的细胞凋亡途径 | 第11-12页 |
| 2.2 死亡受体信号通路 | 第12-13页 |
| 2.3 内质网信号通路 | 第13页 |
| 3 细胞凋亡的机制 | 第13-15页 |
| 3.1 线虫的细胞凋亡机制 | 第14页 |
| 3.2 果蝇的细胞凋亡机制 | 第14页 |
| 3.3 哺乳动物的细胞凋亡机制 | 第14-15页 |
| 4 bcl-2(B-celllymphoma/leukemia-2)家族 | 第15-17页 |
| 4.1 bcl-2蛋白家族成员的分类 | 第15-16页 |
| 4.1.1 抗凋亡成员 | 第15-16页 |
| 4.1.2 促凋亡成员 | 第16页 |
| 4.2 bcl-2蛋白家族的作用模式 | 第16-17页 |
| 4.2.1 线虫中bcl-2蛋白家族 | 第16页 |
| 4.2.2 果蝇中bcl-2蛋白家族 | 第16-17页 |
| 4.2.3 哺乳动物中bcl-2蛋白家族 | 第17页 |
| 5 温度对细胞凋亡的影响 | 第17-18页 |
| 6 选题的目的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 小菜蛾线粒体凋亡基因bcl-2和bax的克隆 | 第19-41页 |
| 1 材料与方法 | 第19-29页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第19-21页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第19-20页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 1.1.3 常用药品的配制 | 第20-21页 |
| 1.2 供试昆虫 | 第21页 |
| 1.3 bcl-2和bax基因中间片段克隆 | 第21-25页 |
| 1.3.1 bcl-2和bax中间片段克隆引物设计 | 第21页 |
| 1.3.2 小菜蛾总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 1.3.3 合成cDNA第一链 | 第22-23页 |
| 1.3.4 PCR体系及程序 | 第23-24页 |
| 1.3.5 PCR产物回收纯化 | 第24页 |
| 1.3.6 克隆片段的连接 | 第24页 |
| 1.3.7 转化、筛选及测序 | 第24-25页 |
| 1.3.8 序列分析 | 第25页 |
| 1.4 bcl-2和bax 3'和5'RACE | 第25-28页 |
| 1.4.1 设计RACE引物 | 第25-26页 |
| 1.4.2 3'和5'RACE-Ready cDNA第一链合成 | 第26页 |
| 1.4.3 巢式PCR体系及程序 | 第26-28页 |
| 1.5 bcl-2和bax ORF扩增 | 第28-29页 |
| 1.6 基因序列分析 | 第29页 |
| 2 结果和分析 | 第29-40页 |
| 2.1 中间片段克隆 | 第29-30页 |
| 2.2 3'RACE克隆 | 第30-31页 |
| 2.3 5'RACE克隆 | 第31-32页 |
| 2.4 ORF克隆 | 第32页 |
| 2.5 序列分析 | 第32-34页 |
| 2.6 同源性分析 | 第34-38页 |
| 2.7 小菜蛾bc1-2和bax生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 2.7.1 小菜蛾bc1-2和bax基本理化性质 | 第38页 |
| 2.7.2 小菜蛾bc1-2和bax蛋白的信号肽预测 | 第38页 |
| 2.7.3 小菜蛾bc1-2和bax蛋白的磷酸化位点预测 | 第38-39页 |
| 2.7.4 小菜蛾bc1-2和bax的保守结构域预测 | 第39-40页 |
| 3 小结 | 第40-41页 |
| 第三章 线粒体凋亡路径基因热激后mRNA表达研究 | 第41-52页 |
| 1 材料与方法 | 第41-44页 |
| 1.1 仪器试剂 | 第41页 |
| 1.1.1 仪器设备 | 第41页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.2 供试昆虫 | 第41-42页 |
| 1.3 不同温度处理 | 第42页 |
| 1.4 荧光定量引物设计 | 第42-43页 |
| 1.5 小菜蛾总RNA的提取 | 第43页 |
| 1.6 合成cDNA第一条链 | 第43页 |
| 1.7 反应体系和程序 | 第43-44页 |
| 1.8 制作标准曲线 | 第44页 |
| 1.9 相对表达量计算 | 第44页 |
| 1.10 数据分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-50页 |
| 2.1 抗性和敏感小菜蛾不同温度处理的表达分析 | 第44-50页 |
| 2.1.1 抗性杂合子和敏感纯合子小菜蛾幼虫线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第44-45页 |
| 2.1.2 抗性纯合子和敏感纯合子小菜蛾蛹线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第45-47页 |
| 2.1.3 抗性杂合子和敏感纯合子小菜蛾成虫线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第47-48页 |
| 2.1.4. 抗性纯合子和敏感纯合子小菜蛾成虫线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第48-50页 |
| 3 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 3.1 高温界定标准 | 第50页 |
| 3.2 高温对细胞凋亡基因mRNA表达影响 | 第50-52页 |
| 第四章 总结与展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
