摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略语索引 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 炎症及炎症反应 | 第11-14页 |
1.1.1 炎症与代谢紊乱 | 第11页 |
1.1.2 脂多糖(lipopolysaccharide,LPS) | 第11-12页 |
1.1.3 NLRP3受体通路 | 第12-13页 |
1.1.4 TLR4受体通路 | 第13-14页 |
1.2 抗炎策略 | 第14-17页 |
1.2.1 2种抗炎策略 | 第14页 |
1.2.2 抗炎活性多酚 | 第14-16页 |
1.2.3 抗炎干预新靶点-NLRP3炎性小体 | 第16-17页 |
1.3 荧光细胞传感器 | 第17-18页 |
1.4 代谢组学 | 第18-19页 |
1.4.1 代谢组学概述 | 第18-19页 |
1.4.2 代谢组学与抗炎症 | 第19页 |
1.5 立题背景及意义 | 第19-20页 |
1.6 本课题主要研究内容 | 第20-21页 |
第二章 以促炎细胞因子为靶点评价多酚的抗炎症活性 | 第21-32页 |
2.1 材料和仪器 | 第21页 |
2.1.1 材料及试剂 | 第21页 |
2.1.2 仪器和设备 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-24页 |
2.2.1 细胞培养及刺激 | 第21-22页 |
2.2.2 CCK-8检测细胞活性 | 第22页 |
2.2.3 检测胞内一氧化氮浓度 | 第22页 |
2.2.4 总RNA的抽提 | 第22页 |
2.2.5 反转录实验 | 第22-23页 |
2.2.6 RT-PCR操作 | 第23页 |
2.2.7 ELISA测定促炎症细胞因子浓度 | 第23-24页 |
2.2.8 统计分析 | 第24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-30页 |
2.3.1 各物质作用浓度的确定 | 第24-25页 |
2.3.2 LPS刺激使细胞发生炎症反应 | 第25-27页 |
2.3.3 多酚抑制了LPS刺激导致的一氧化氮累积 | 第27页 |
2.3.4 多酚对炎症细胞因子的干预 | 第27-30页 |
2.4 本章小结 | 第30-32页 |
第三章 NLRP3荧光细胞传感器的构建及应用 | 第32-48页 |
3.1 材料和仪器 | 第32页 |
3.1.1 材料及试剂 | 第32页 |
3.1.2 仪器和设备 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-35页 |
3.2.1 THP-1细胞培养 | 第32-33页 |
3.2.2 质粒的构建 | 第33页 |
3.2.3 病毒感染THP-1细胞 | 第33页 |
3.2.4 稳转细胞系的筛选和构建 | 第33-34页 |
3.2.5 RT-PCR实验 | 第34页 |
3.2.6 Western实验 | 第34-35页 |
3.2.7 细胞活力 | 第35页 |
3.2.8 细胞内活性氧检测 | 第35页 |
3.2.9 细胞内线粒体活性氧检测 | 第35页 |
3.2.10 细胞内线粒体膜电位检测 | 第35页 |
3.2.11 细胞内钙离子检测 | 第35页 |
3.2.12 统计分析 | 第35页 |
3.3 结果与讨论 | 第35-46页 |
3.3.1 荧光细胞传感器的原理 | 第35-36页 |
3.3.2 质粒的成功构建 | 第36-37页 |
3.3.3 转染后细胞活力评价 | 第37-38页 |
3.3.4 荧光细胞传感器的建立及验证 | 第38-41页 |
3.3.5 NLRP3激活抑制剂的筛选 | 第41-42页 |
3.3.6 光甘草定抑制NLRP3炎性小体机理初探 | 第42-46页 |
3.4 本章小结 | 第46-48页 |
第四章 代谢组学揭示光甘草定的抗炎症功能 | 第48-61页 |
4.1 材料和仪器 | 第48页 |
4.1.1 材料及试剂 | 第48页 |
4.1.2 仪器和设备 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-50页 |
4.2.1 实验分组 | 第48页 |
4.2.2 细胞培养 | 第48页 |
4.2.3 代谢物萃取 | 第48-49页 |
4.2.4 代谢物衍生化 | 第49页 |
4.2.5 气相色谱-质谱联用分析 | 第49页 |
4.2.6 代谢数据处理 | 第49页 |
4.2.7 多元统计分析及通路分析 | 第49-50页 |
4.3 结果与讨论 | 第50-59页 |
4.3.1 代谢物鉴定 | 第50-51页 |
4.3.2 代谢物谱的多元统计分析 | 第51-55页 |
4.3.3 代谢通路分析 | 第55-59页 |
4.4 本章小结 | 第59-61页 |
主要结论和展望 | 第61-63页 |
主要结论 | 第61-62页 |
展望 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录A:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第71页 |