| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第14-31页 |
| 1.1 线粒体 | 第14-23页 |
| 1.1.1 线粒体融合 | 第14-18页 |
| 1.1.2 线粒体分裂 | 第18-20页 |
| 1.1.3 线粒体生物合成 | 第20-23页 |
| 1.2 骨骼肌 | 第23-27页 |
| 1.2.1 骨骼肌再生 | 第24-25页 |
| 1.2.2 骨骼肌降解 | 第25-27页 |
| 1.3 糖基化与胰岛素抵抗 | 第27-29页 |
| 1.4 研究目的 | 第29-31页 |
| 2 高脂饲喂和db/db小鼠骨骼肌糖基化修饰变化和线粒体相关功能变化 | 第31-56页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料和主要仪器 | 第31-33页 |
| 2.2.1 试剂及抗体 | 第31-32页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.3.1 实验动物 | 第33-34页 |
| 2.3.2 口服糖耐力测试(OGTT) | 第34页 |
| 2.3.3 胰岛素测定 | 第34页 |
| 2.3.4 骨骼肌线粒体提取 | 第34-36页 |
| 2.3.5 线粒体复合物Ⅰ活性测定 | 第36-37页 |
| 2.3.6 线粒体复合物Ⅱ活性测定 | 第37-38页 |
| 2.3.7 线粒体复合物Ⅲ活性测定 | 第38-39页 |
| 2.3.8 线粒体复合物Ⅳ活性测定 | 第39-40页 |
| 2.3.9 线粒体复合物Ⅴ活性测定 | 第40-41页 |
| 2.3.10 BCA分析法检测蛋白浓度 | 第41页 |
| 2.3.11 WesternBlot | 第41-45页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第45页 |
| 2.4 实验结果 | 第45-55页 |
| 2.4.1 高脂饲喂诱导小鼠胰岛素抵抗 | 第45-47页 |
| 2.4.2 高脂饮食诱导骨骼肌线粒体功能障碍 | 第47-48页 |
| 2.4.3 高脂饮食诱导骨骼肌蛋白糖基化修饰失衡 | 第48-50页 |
| 2.4.4 db/db小鼠骨骼肌线粒体功能障碍 | 第50-52页 |
| 2.4.5 db/db小鼠骨骼肌蛋白糖基化修饰失衡 | 第52-55页 |
| 2.5 讨论 | 第55-56页 |
| 3 OGA敲低通过抑制线粒体功能影响骨骼肌稳态 | 第56-96页 |
| 3.1 引言 | 第56页 |
| 3.2 实验材料和主要仪器 | 第56-59页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第56-58页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第58-59页 |
| 3.3 实验方法 | 第59-72页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第59-60页 |
| 3.3.2 C2C12成肌细胞中siRNA转染 | 第60页 |
| 3.3.3 C2C12肌管细胞中siRNA转染 | 第60-61页 |
| 3.3.4 C2C12成肌细胞中质粒转染 | 第61页 |
| 3.3.5 C2C12肌管细胞中质粒转染 | 第61页 |
| 3.3.6 细胞线粒体提取 | 第61-63页 |
| 3.3.7 活性氧(ROS)检测 | 第63页 |
| 3.3.8 4-羟基壬烯醛(4-HNE)检测 | 第63-64页 |
| 3.3.9 蛋白羰基化检测 | 第64页 |
| 3.3.10 细胞免疫荧光 | 第64页 |
| 3.3.11 葡萄糖摄取检测 | 第64-65页 |
| 3.3.12 实时定量荧光定量PCR | 第65-66页 |
| 3.3.13 线粒体生物能量代谢测定 | 第66-70页 |
| 3.3.14 WesternBlot | 第70-72页 |
| 3.3.15 co-IP | 第72页 |
| 3.3.16 统计学分析 | 第72页 |
| 3.4 实验结果 | 第72-91页 |
| 3.4.1 C2C12成肌细胞分化过程中蛋白糖基化修饰变化 | 第72-73页 |
| 3.4.2 C2C12成肌细胞分化过程中线粒体重塑 | 第73-76页 |
| 3.4.3 OGA敲低抑制C2C12成肌细胞分化 | 第76-80页 |
| 3.4.4 OGA敲低降低PGC-1α稳定性而抑制C2C12成肌分化 | 第80-85页 |
| 3.4.5 OGA敲低损伤成肌分化中线粒体功能 | 第85-87页 |
| 3.4.6 OGA敲低损伤肌管细胞线粒体功能 | 第87-88页 |
| 3.4.7 OGA敲低降低肌管细胞胰岛素敏感性 | 第88-91页 |
| 3.5 讨论 | 第91-96页 |
| 4 结论与展望 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-107页 |
| 攻读学位期间取得的成果 | 第107-109页 |
