摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-19页 |
1.1 口蹄疫病毒简介 | 第11-13页 |
1.1.1 口蹄疫流行病学研究 | 第11页 |
1.1.2 口蹄疫病毒基因组结构及功能研究 | 第11-13页 |
1.2 自噬 | 第13-16页 |
1.2.1 自噬简介 | 第13-15页 |
1.2.2 调控自噬的信号分子 | 第15-16页 |
1.3 自噬与病毒 | 第16-17页 |
1.4 HSPB1蛋白与自噬 | 第17-18页 |
1.5 研究目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 FMDVVP2蛋白诱导自噬的信号通路 | 第19-27页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.1 主要试剂材料 | 第19页 |
2.1.2 使用仪器及设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-21页 |
2.2.1 细胞转染、间接免疫荧光实验 | 第19-20页 |
2.2.2 Westernblotting实验 | 第20-21页 |
2.3 实验结果 | 第21-25页 |
2.3.1 FMDVVP2蛋白诱导宿主细胞发生自噬 | 第21-22页 |
2.3.2 FMDVVP2蛋白抑制AKT-MTOR通路诱导自噬 | 第22-23页 |
2.3.3 FMDVVP2蛋白激活EIF2S1-ATF4通路诱导自噬 | 第23-24页 |
2.3.4 AKT-MTOR通路与EIF2S1-ATF4通路之间的关系 | 第24-25页 |
2.4 讨论 | 第25-27页 |
第三章 FMDVVP2蛋白与宿主细胞内HSPB1蛋白相互作用 | 第27-34页 |
3.1 实验材料 | 第27页 |
3.1.1 主要试剂材料 | 第27页 |
3.1.2 使用仪器及设备 | 第27页 |
3.2 实验方法 | 第27-30页 |
3.2.1 PLV-HA-HSPB1质粒的构建 | 第27-30页 |
3.2.2 免疫沉淀实验 | 第30页 |
3.3 实验结果 | 第30-32页 |
3.3.1 筛选FMDVVP2蛋白与宿主细胞内的相互作用蛋白 | 第30-31页 |
3.3.2 PLV-HA-HSPB1载体酶切鉴定结果 | 第31页 |
3.3.3 外源性HSPB1蛋白与FMDVVP2蛋白相互作用 | 第31-32页 |
3.3.4 内源性HSPB1蛋白与FMDVVP2蛋白相互作用 | 第32页 |
3.4 讨论 | 第32-34页 |
第四章 HSPB1蛋白对VP2蛋白诱导自噬的信号通路的影响 | 第34-41页 |
4.1 材料与方法 | 第34页 |
4.1.1 主要试剂材料 | 第34页 |
4.1.2 使用仪器及设备 | 第34页 |
4.2 实验方法 | 第34-36页 |
4.2.1 慢病毒包装、感染以及筛选 | 第34页 |
4.2.2 提取细胞RNA | 第34-35页 |
4.2.3 反转录RNA实验 | 第35页 |
4.2.4 实时荧光定量PCR实验 | 第35-36页 |
4.3 实验结果 | 第36-38页 |
4.3.1 PK-15细胞内过表达HSPB1蛋白抑制VP2蛋白诱导的自噬 | 第36-37页 |
4.3.2 PK-15细胞内敲低HSPB1基因促进VP2蛋白诱导的自噬 | 第37-38页 |
4.4 讨论 | 第38-41页 |
第五章 全文结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简历 | 第49页 |