摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-34页 |
第一章 肌纤维的特性、构成肌纤维的蛋白亚型及肉品质 | 第14-23页 |
·肌纤维特性 | 第15-18页 |
·肌纤维 | 第15页 |
·肌纤维类型的分类方法 | 第15-16页 |
·肌纤维类型的特征 | 第16页 |
·影响组织化学特性的因素 | 第16-18页 |
·肌球蛋白和其他肌纤维蛋白亚型的多样性 | 第18-23页 |
·肌球蛋白亚型 | 第18-19页 |
·其他蛋白亚型 | 第19-20页 |
·肌纤维的蛋白亚型和肌纤维类型的关系 | 第20-21页 |
·肌纤维类型,MyHC 亚型和肉质 | 第21-23页 |
第二章 调控肌纤维类型的关键信号分子 | 第23-26页 |
·MRFs | 第23页 |
·PGC-1s | 第23-24页 |
·PPARs | 第24页 |
·CaN | 第24页 |
·MEF2 | 第24-25页 |
·NFAT | 第25页 |
·FoxO1 | 第25-26页 |
第三章 FoxO 蛋白家族介绍 | 第26-34页 |
·FoxO 的结构特点 | 第26-27页 |
·Fox 的命名与分类 | 第26-27页 |
·FoxO1 的结构特点及染色体定位 | 第27页 |
·FoxO1 转录活性的调节 | 第27-34页 |
·磷酸化/去磷酸化 | 第28页 |
·乙酰化/去乙酰化 | 第28-29页 |
·蛋白之间的互作 | 第29-34页 |
第二部分 实验研究 | 第34-61页 |
第四章 猪骨骼肌中FoxO1 与MyHCs 的相关性研究 | 第34-41页 |
·材料与方法 | 第34-36页 |
·实验动物 | 第34-35页 |
·主要仪器和试剂 | 第35页 |
·real-time RT-PCR 分析 | 第35页 |
·Western blotting 检测 | 第35-36页 |
·免疫组织化学检测 | 第36页 |
·统计学分析 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-39页 |
·猪比目鱼肌和趾长伸肌的组织结构特点 | 第36页 |
·猪比目鱼肌和趾长伸肌中FoxO1 的表达情况 | 第36-38页 |
·猪比目鱼肌和趾长伸肌中MyHCsmRNA 的表达情况 | 第38-39页 |
·猪骨骼肌中FoxO1 与MyHCs 的相关性分析 | 第39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第五章 FoxO1 脱磷酸化对猪骨骼肌卫星细胞分化及肌纤维类型组成的影响 | 第41-48页 |
·材料与方法 | 第41-42页 |
·主要材料 | 第41页 |
·Wortmannin 处理猪骨骼肌卫星细胞 | 第41页 |
·细胞免疫化学染色检测 | 第41页 |
·Western blotting 分析 | 第41页 |
·real-time RT- PCR 分析 | 第41-42页 |
·统计学分析 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·猪骨骼肌卫星细胞细胞分化过程中形态学变化 | 第42-43页 |
·WM 对FoxO1 磷酸化水平的影响 | 第43-44页 |
·FoxO1 去磷酸化后对骨骼肌卫星细胞分化的影响 | 第44页 |
·FoxO1 去磷酸化后对骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响 | 第44-45页 |
·FoxO1 去磷酸化对猪成肌细胞MyHCs 基因表达的影响 | 第45页 |
·FoxO1 去磷酸化对氧化型肌纤维相关基因的影响 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第六章 猪FoxO1 基因shRNA 慢病毒包装与干扰效率检测 | 第48-53页 |
·材料与方法 | 第48-49页 |
·主要试剂与细胞系 | 第48页 |
·慢病毒包装与病毒滴度测定 | 第48页 |
·重组慢病毒感染猪骨骼肌卫星细胞 | 第48页 |
·real-time RT-PCR 检测 | 第48页 |
·Western blotting 分析 | 第48-49页 |
·统计学分析 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-51页 |
·慢病毒载体包装 | 第49页 |
·病毒滴度测定 | 第49页 |
·重组慢病毒感染猪骨骼肌卫星细胞的效率 | 第49-50页 |
·重组慢病毒感染猪骨骼肌卫星细胞后对FoxO1 表达的影响 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第七章 干扰FoxO1 对猪骨骼肌卫星细胞分化及肌纤维类型组成的影响 | 第53-56页 |
·材料与方法 | 第53页 |
·主要材料 | 第53页 |
·细胞免疫化学染色检测 | 第53页 |
·real-time RT-PCR | 第53页 |
·Western blotting 分析 | 第53页 |
·统计学分析 | 第53页 |
·结果与分析 | 第53-55页 |
·干扰FoxO1 对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响 | 第53-54页 |
·干扰FoxO1 对MyHCs 表达的影响 | 第54-55页 |
·干扰 FoxO1 对肌纤维类型相关基因表达的影响 | 第55页 |
·讨论 | 第55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第八章 FoxO1 调控猪骨骼肌纤维类型的作用机理研究 | 第56-61页 |
·材料与方法 | 第56-57页 |
·主要材料 | 第56页 |
·CsA 处理猪骨骼肌卫星细胞 | 第56页 |
·CaN 酶活性测定 | 第56页 |
·细胞免疫化学分析 | 第56页 |
·real-time RT-PCR 分析 | 第56页 |
·Western blotting 分析 | 第56页 |
·统计学分析 | 第56-57页 |
·结果与分析 | 第57-59页 |
·CsA 对CaN/NFAT 的抑制作用 | 第57页 |
·阻断CaN 抑制猪骨骼肌卫星细胞分化及MyHCs 的比例 | 第57-58页 |
·干扰FoxO1 削弱了CsA 对氧化型肌纤维形成的抑制作用 | 第58-59页 |
·FoxO1 对CaN/NFAT 信号通路的影响 | 第59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
·小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
创新点 | 第62-63页 |
进一步研究内容 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-80页 |
附录 | 第80-92页 |
缩略词表 | 第92-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
作者简介 | 第95-97页 |