摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 脂肪分解作用研究进展 | 第14-27页 |
·参与脂解作用的重要脂酶 | 第14-18页 |
·激素敏感脂酶 | 第14-16页 |
·ATGL | 第16-17页 |
·单酰甘油脂酶 | 第17页 |
·其他脂酶 | 第17-18页 |
·脂滴相关蛋白和脂质结合蛋白 | 第18-22页 |
·Perilipins | 第18-19页 |
·小窝蛋白 | 第19-20页 |
·与HSL 相互作用的蛋白 | 第20页 |
·与ATGL 相互作用蛋白 | 第20-21页 |
·水通道蛋白 | 第21页 |
·CIDEs 家族 | 第21-22页 |
·激素调控脂解作用机制 | 第22-26页 |
·腺苷酸环化酶和G 蛋白偶联受体 | 第22-23页 |
·尿钠肽通路 | 第23-24页 |
·受体酪氨酸激酶信号通路 | 第24-25页 |
·其他脂解通路 | 第25-26页 |
·脂质代谢研究方法 | 第26-27页 |
第二章 ATGL 研究进展 | 第27-38页 |
·ATGL 基因、m RNA 和蛋白结构 | 第27-29页 |
·ATGL 生理功能 | 第29-30页 |
·ATGL 的表达与调控 | 第30-33页 |
·激素和细胞因子对ATGL 的调控 | 第30-32页 |
·脂滴蛋白(lipid droplet proteins) | 第32-33页 |
·人类ATGL 或CGI-58 突变疾病 | 第33-35页 |
·ATGL 基因突变体 | 第33-34页 |
·CGI-58 基因突变体 | 第34-35页 |
·ATGL/CGI58 组织特异性作用 | 第35-38页 |
·心肌(Cardiac muscle) | 第35-36页 |
·骨骼肌(Sketetal muscle) | 第36页 |
·其他组织(Otheret issues) | 第36-38页 |
实验研究 | 第38-67页 |
第三章 异丙肾上腺素调控ATGL 表达研究 | 第39-46页 |
·材料与方法 | 第39-40页 |
·实验动物 | 第39页 |
·试剂 | 第39页 |
·实验仪器与器械 | 第39页 |
·猪原代脂肪细胞的培养 | 第39-40页 |
·主要试剂配制 | 第40页 |
·培养液中甘油含量测定 | 第40页 |
·Western blot 检测ATGL 蛋白的表达 | 第40页 |
·RT-PCR 检测ATGL mRNA 的表达 | 第40页 |
·数据统计分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·ISO 对猪脂肪细胞脂肪分解作用的影响 | 第40页 |
·不同浓度ISO 对猪脂肪细胞ATGL mRNA 和蛋白表达的影响 | 第40-42页 |
·不同时间ISO 对猪脂肪细胞ATGL mRNA 和蛋白表达的影响 | 第42页 |
·PKA 抑制剂对ISO 作用的ATGL mRNA 和蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第四章 TNFα调控ATGL 表达研究 | 第46-52页 |
·材料与方法 | 第46-47页 |
·实验动物 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
·实验仪器与器械 | 第46页 |
·猪原代脂肪细胞的培养 | 第46页 |
·主要试剂配制 | 第46-47页 |
·培养液中甘油含量测定 | 第47页 |
·RT-PCR 检测ATGL mRNA 的表达 | 第47页 |
·数据分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-50页 |
·TNFα对猪脂肪细胞甘油释放量的影响 | 第47-48页 |
·不同浓度TNFα对猪脂肪细胞ATGL mRNA 表达的影响 | 第48页 |
·TNFα不同处理时间对猪脂肪细胞ATGL m RNA 表达的影响 | 第48-49页 |
·p38 MAPK 和 p42/44 MAPK 通路抑制剂对 TNFα 刺激的 ATGL mRNA 表达的影响 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第五章 猪ATGL 基因干扰载体构建 | 第52-59页 |
·实验材料与方法 | 第52-55页 |
·实验材料 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-55页 |
·结果 | 第55-57页 |
·重组克隆载体的构建与鉴定 | 第55-56页 |
·慢病毒载体的包装及滴度测定 | 第56页 |
·LentiH1-ATGL siRNA 感染猪成熟脂肪细胞对ATGL 和HSL mRNA 和蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第六章 ATGL 在猪脂肪细胞中脂解作用及机理研究 | 第59-67页 |
·实验材料与方法 | 第59-60页 |
·实验动物 | 第59页 |
·试剂 | 第59页 |
·实验仪器与器械 | 第59页 |
·猪原代脂肪细胞的培养 | 第59-60页 |
·培养液中甘油含量测定 | 第60页 |
·培养液中游离脂肪酸含量的测定 | 第60页 |
·ATGL 和CGI-58 的免疫荧光化学染色 | 第60页 |
·免疫共沉淀分析ATGL、CGI-58 和perilipin 间的相互作用 | 第60页 |
·结果 | 第60-64页 |
·干扰 ATGL 表达抑制猪脂肪细胞基础脂肪分解作用 | 第60-61页 |
·干扰 ATGL 表达抑制异丙肾上腺素刺激的脂肪分解作用 | 第61-62页 |
·干扰 ATGL 表达抑制TNFα刺激的脂肪分解作用 | 第62页 |
·ATGL 和CGI-58 在脂肪细胞中的定位 | 第62-63页 |
·异丙肾上腺素促进ATGL 与CGI-58 的结合 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
创新点 | 第68-69页 |
进一步研究的内容 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-85页 |
附录 | 第85-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
作者简介 | 第100页 |