| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 材料与试剂 | 第13-18页 |
| 1.1 实验动物 | 第13页 |
| 1.2 实验细胞株 | 第13页 |
| 1.3 主要实验设备 | 第13页 |
| 1.4 主要实验试剂 | 第13-14页 |
| 1.5 主要实验试剂配制 | 第14-16页 |
| 1.6 引物序列 | 第16-17页 |
| 1.6.1 荧光定量PCR引物 | 第16页 |
| 1.6.2 重组质粒构建的引物 | 第16-17页 |
| 1.7 载体 | 第17-18页 |
| 实验方法与步骤 | 第18-37页 |
| 2.1 鼠尾DNA提取 | 第18页 |
| 2.2 PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳结果分析 | 第18-19页 |
| 2.3 石蜡切片制作 | 第19-20页 |
| 2.4 Trizol法提取组织/细胞总RNA | 第20-21页 |
| 2.5 RNA反转录成cDNA | 第21页 |
| 2.6 RNA-Sequencing | 第21-26页 |
| 2.7 实时定量PCR | 第26-27页 |
| 2.8 重组质粒构建 | 第27-32页 |
| 2.9 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.10 双荧光素酶报告基因实验 | 第33-34页 |
| 2.11 慢病毒的包装及感染效果的验证 | 第34页 |
| 2.12 稳定过表达miR194-5p P19细胞株的建立 | 第34页 |
| 2.13 Western blotting | 第34-36页 |
| 2.14 细胞免疫荧光法 | 第36页 |
| 统计学处理 | 第36-37页 |
| 实验结果 | 第37-49页 |
| 3.1 Stra8.KO小鼠基因型鉴定及睾丸组织形态学分析 | 第37-38页 |
| 3.1.1 Stra8.KO小鼠基因型鉴定 | 第37页 |
| 3.1.2 Stra8.KO小鼠睾丸组织形态学分析 | 第37-38页 |
| 3.2 差异表达miRNAs的筛选及验证 | 第38-39页 |
| 3.3 qRT-PCR检测差异表达miRNAs在小鼠多组织中的表达 | 第39-40页 |
| 3.4 Stra8与差异表达的miRNA之间的相关性分析 | 第40-44页 |
| 3.4.1 重组质粒构建 | 第40-42页 |
| 3.4.2双荧光素酶报告基因实验检测Stra8与miR-194-5p、miR-3544-3p及miR-205-3p的关系 | 第42-44页 |
| 3.5 过表达pMSCV-PIG- miR-194-5p慢病毒的制备 | 第44-45页 |
| 3.6 过表达miR-194-5p P19细胞系的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 3.7 miR-194-5p在P19细胞分化为生精细胞中的作用 | 第46-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 总结 | 第57-58页 |
| 综述 | 第58-66页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67-68页 |
