摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 NLRP基因家族研究进展 | 第10-15页 |
1.1.1 NLR基因家族 | 第10页 |
1.1.2 NLRP基因家族 | 第10页 |
1.1.3 NLRP基因家族的功能 | 第10页 |
1.1.4 NLRP家族中与先天免疫有关的成员 | 第10-13页 |
1.1.5 NLRP家族中与生殖系统有关的成员 | 第13-15页 |
1.1.6 NLRP9研究进展 | 第15页 |
1.2 猪肠上皮细胞IPEC-J2概述 | 第15-17页 |
1.2.1 肠上皮细胞 | 第15-16页 |
1.2.2 IPEC-J2 | 第16-17页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
第2章 NLRP9的生物信息学分析 | 第18-27页 |
2.1 材料与方法 | 第18-19页 |
2.1.1 NLRP9基因序列 | 第18页 |
2.1.2 分析软件与网站 | 第18-19页 |
2.2 结果 | 第19-25页 |
2.2.1 构建系统发生树 | 第19-20页 |
2.2.2 NLRP9蛋白的基本信息 | 第20-25页 |
2.3 讨论 | 第25-26页 |
2.4 小结 | 第26-27页 |
第3章 NLRP9在仔猪不同组织中的表达与定位 | 第27-37页 |
3.1 引言 | 第27页 |
3.2 实验材料与方法 | 第27页 |
3.2.1 动物 | 第27页 |
3.2.2 主要试剂 | 第27页 |
3.3 实验方法 | 第27-31页 |
3.3.1 组织RNA的提取 | 第27-28页 |
3.3.2 cDNA的合成与扩曾 | 第28-29页 |
3.3.3 免疫印迹 | 第29-30页 |
3.3.4 免疫组化 | 第30-31页 |
3.4 结果 | 第31-35页 |
3.4.1 抗体特异性检测 | 第31-32页 |
3.4.2 NLRP9在仔猪不同组织中的表达 | 第32-33页 |
3.4.3 NLRP9蛋白在仔猪不同组织中的表达 | 第33页 |
3.4.4 NLRP9蛋白在仔猪不同组织中的定位 | 第33-35页 |
3.5 讨论 | 第35-36页 |
3.6 小结 | 第36-37页 |
第4章 NLRP9在IPEC-J2细胞中的功能研究 | 第37-49页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 实验材料与方法 | 第37页 |
4.2.1 实验材料 | 第37页 |
4.2.2 实验试剂盒 | 第37页 |
4.3 实验方法 | 第37-42页 |
4.3.1 IPEC-J2细胞培养 | 第37-38页 |
4.3.2 LPS溶液的配制 | 第38页 |
4.3.3 细胞总RNA的提取 | 第38页 |
4.3.4 cDNA的合成 | 第38-39页 |
4.3.5 细胞总蛋白的提取 | 第39-40页 |
4.3.6 荧光定量 | 第40页 |
4.3.7 免疫荧光 | 第40-41页 |
4.3.8 RNA干扰 | 第41-42页 |
4.3.9 MTT的配制 | 第42页 |
4.4 结果 | 第42-48页 |
4.4.1 NLRP9在IPEC-J2细胞中的表达 | 第42页 |
4.4.2 NLRP9蛋白在IPEC-J2细胞中的定位 | 第42-43页 |
4.4.3 沉默NLRP9对IPEC-J2细胞形态和细胞活性的影响 | 第43-46页 |
4.4.4 LPS处理对IPEC-J2活性的影响 | 第46-48页 |
4.5 讨论 | 第48页 |
4.6 小结 | 第48-49页 |
第5章 全文总结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |