| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 戊型肝炎的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 戊型肝炎病毒病原学研究 | 第11-12页 |
| 1.1.2 戊型肝炎病毒基因组结构 | 第12-13页 |
| 1.1.3 戊型肝炎病毒宿主范围 | 第13页 |
| 1.1.4 戊型肝炎的流行病学 | 第13页 |
| 1.1.5 戊型肝炎的临床表现 | 第13-14页 |
| 1.1.6 戊型肝炎病毒的检测方法 | 第14页 |
| 1.1.7 戊型肝炎病毒疫苗的研究 | 第14-15页 |
| 1.2 禽戊型肝炎病毒研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 禽戊型肝炎病毒病原学 | 第16页 |
| 1.2.2 禽戊型肝炎病毒流行病学 | 第16页 |
| 1.2.3 禽戊型肝炎病毒免疫学 | 第16-17页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 间接 ELISA 检测禽 HEV 抗体方法的建立 | 第18-30页 |
| 2.1 材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 毒株，载体与菌种 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验试剂和耗材 | 第19页 |
| 2.1.3 主要设备和仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 设计和合成引物 | 第20页 |
| 2.2.2 获得目的基因并测序 | 第20-21页 |
| 2.2.3 带有酶切位点引物的设计 | 第21页 |
| 2.2.4 目的基因和载体的双酶切 | 第21-22页 |
| 2.2.5 筛选阳性克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.6 表达和纯化蛋白 | 第23-24页 |
| 2.2.7 敲定最终的间接 ELISA 检测血清方法 | 第24页 |
| 2.2.8 建立 ELISA 方法的重复性分析 | 第24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-29页 |
| 2.3.1 鉴定重组质粒 | 第24-25页 |
| 2.3.2 优化重组蛋白表达条件 | 第25页 |
| 2.3.3 Western blot 鉴定表达的重组蛋白 | 第25-26页 |
| 2.3.4 纯化蛋白 | 第26页 |
| 2.3.5 建立间接 ELISA 方法检测血清抗体 | 第26-29页 |
| 2.4 讨论与分析 | 第29-30页 |
| 第三章 我国鸡群戊型肝炎的血清学检测 | 第30-34页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 鸡血清 | 第30页 |
| 3.1.2 ELISA 检测抗原 | 第30页 |
| 3.1.3 实验试剂和耗材 | 第30-31页 |
| 3.1.4 仪器和设备 | 第31页 |
| 3.1.5 配制试剂 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31页 |
| 3.3 结果 | 第31-33页 |
| 3.3.1 不同省市鸡群禽 HEV抗体检测结果 | 第31-32页 |
| 3.3.2 不同品种鸡群禽 HEV抗体检测结果 | 第32页 |
| 3.3.3 不同周龄鸡群禽 HEV抗体检测结果 | 第32-33页 |
| 3.4 讨论和分析 | 第33-34页 |
| 第四章 我国鸡群的戊型肝炎病毒分子流行病学调查 | 第34-41页 |
| 4.1 材料 | 第34-36页 |
| 4.1.1 表达载体和菌种 | 第34页 |
| 4.1.2 实验试剂和耗材 | 第34-35页 |
| 4.1.3 主要设备和仪器 | 第35页 |
| 4.1.4 主要试剂的配制 | 第35页 |
| 4.1.5 检测样品的收集 | 第35-36页 |
| 4.2 方法 | 第36-38页 |
| 4.2.1 设计引物 | 第36页 |
| 4.2.2 Trizol 方法提取病毒 RNA | 第36页 |
| 4.2.3 RT-PCR检测 | 第36页 |
| 4.2.4 回收并纯化 PCR产物 | 第36页 |
| 4.2.5 连接至载体 | 第36页 |
| 4.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| 4.2.7 转化连接产物 | 第37页 |
| 4.2.8 提质粒 | 第37页 |
| 4.2.9 双酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 4.2.10 比对序列 | 第38页 |
| 4.3 结果 | 第38-40页 |
| 4.3.1 RT-PCR检测结果 | 第38页 |
| 4.3.2 双酶切鉴定克隆质粒 | 第38-39页 |
| 4.3.3 与 GenBank 上已知序列的同源性关系 | 第39页 |
| 4.3.4 进化树分析 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论和分析 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 英文缩略词 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介、发表论文情况 | 第51页 |
