中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
英语缩写词及符号 | 第7-10页 |
绪言 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 乳腺癌研究进展 | 第12-15页 |
1.1.1 乳腺癌发展现状 | 第12页 |
1.1.2 乳腺癌的诊断分期 | 第12-13页 |
1.1.3 乳腺癌的分子分型 | 第13-14页 |
1.1.4 乳腺癌的治疗手段 | 第14页 |
1.1.5 乳腺癌致病因素 | 第14-15页 |
1.2 HSP90与乳腺癌 | 第15-21页 |
1.2.1 HSP家族 | 第15页 |
1.2.2 HSP90的生物学特性 | 第15-17页 |
1.2.3 HSP90在乳腺癌中的表达 | 第17页 |
1.2.4 HSP90抑制剂 | 第17-20页 |
1.2.4.1 格尔德霉素及其衍生物 | 第18-19页 |
1.2.4.2 根赤壳菌素 | 第19-20页 |
1.2.4.3 嘌呤结构为基础的HSP90抑制剂 | 第20页 |
1.2.4.4 氨基苯甲酰胺类衍生物 | 第20页 |
1.2.5 HSP90抑制剂与乳腺癌 | 第20-21页 |
1.3 HDAC6-HSP90相互作用 | 第21-22页 |
1.3.1 HDAC6的结构特征 | 第21页 |
1.3.2 HDAC6-HSP90调控 | 第21-22页 |
1.3.3 HDAC6与乳腺癌 | 第22页 |
1.4 Hippo信号通路 | 第22-24页 |
1.4.1 Hippo信号通路的核心组件 | 第22-23页 |
1.4.2 Hippo信号通路与肿瘤 | 第23-24页 |
1.5 小结 | 第24-25页 |
第二章 实验材料与方法 | 第25-33页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 细胞系 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 实验药物 | 第26页 |
2.1.4 抗体 | 第26页 |
2.2 常用溶液配方 | 第26-27页 |
2.3 主要耗材和仪器 | 第27页 |
2.4 实验方法 | 第27-33页 |
2.4.1 细胞复苏 | 第27页 |
2.4.2 细胞传代 | 第27-28页 |
2.4.3 细胞冻存 | 第28页 |
2.4.4 17-DMAG (Alvespimycin) HCI和Tubacin处理乳腺癌细胞 | 第28页 |
2.4.5 CCK-8 (Cell Counting Kit-8)检测细胞活性 | 第28-29页 |
2.4.6 流式细胞仪检测药物作用后对细胞周期的影响 | 第29页 |
2.4.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第29页 |
2.4.8 siRNA瞬时转染细胞 | 第29页 |
2.4.9 Western blot检测蛋白表达水平 | 第29-30页 |
2.4.9.1 细胞裂解 | 第29页 |
2.4.9.2 SDS-PAGE凝胶电泳及蛋白免疫印迹(Western blot) | 第29-30页 |
2.4.10 组合指数和IC_(50)值的计算 | 第30-31页 |
2.4.11 Nocodazole诱导微管解聚实验 | 第31页 |
2.4.12 免疫荧光 | 第31页 |
2.4.13 Total RNA的提取 | 第31页 |
2.4.14 RNA逆转录 | 第31-32页 |
2.4.15 实时定量PCR | 第32页 |
2.4.16 细胞划痕实验 | 第32页 |
2.4.17 实验中所用的引物序列 | 第32页 |
2.4.18 统计分析 | 第32-33页 |
第三章 实验结果及讨论 | 第33-45页 |
3.1 引言 | 第33页 |
3.2 TNBC比non-TNBC细胞对HSP90抑制剂更敏感 | 第33-36页 |
3.2.1 17-DMAG对乳腺癌细胞活性的影响 | 第33-34页 |
3.2.2 TNBC和non-TNBC细胞的IC_(50)比较 | 第34页 |
3.2.3 17-DMAG对乳腺癌细胞周期的影响 | 第34-35页 |
3.2.4 17-DMAG诱导乳腺癌细胞的凋亡作用 | 第35-36页 |
3.2.5 17-DMAG对乳腺细胞迁移能力的影响 | 第36页 |
3.3 HDAC6在non-TNBC细胞中高表达 | 第36-37页 |
3.4 Non-TNBC细胞中HDAC6高表达是其对HSP90抑制较不敏感的主要原因 | 第37-40页 |
3.4.1 联合给药对乳腺癌细胞活性的影响 | 第37-38页 |
3.4.2 抑制HSP90对HDAC6蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
3.4.3 抑制HSP90/HDAC6增强了微管蛋白的稳定性 | 第39-40页 |
3.5 Hippo信号通路参与HSP90在TNBC和non-TNBC细胞中的差异调控网络 | 第40-42页 |
3.5.1 YAP在TNBC和non-TNBC病人中的表达情况 | 第40页 |
3.5.2 17-DMAG对Hippo信号通路的影响 | 第40-41页 |
3.5.3 YAP敲减后对细胞活性的影响 | 第41-42页 |
3.5.4 17-DMAG对Bcl-xl表达的影响 | 第42页 |
3.6 讨论 | 第42-44页 |
3.7 结论与展望 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
作者简介 | 第51-52页 |
致谢 | 第52页 |