| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 MEF2C蛋白 | 第11-20页 |
| 1.2.1 MEF2C蛋白简述 | 第11-12页 |
| 1.2.2 MEF2C蛋白结构 | 第12-13页 |
| 1.2.3 MEF2C蛋白功能 | 第13-14页 |
| 1.2.4 MEF2C蛋白相关疾病 | 第14页 |
| 1.2.5 MEF2C相互作用蛋白 | 第14-20页 |
| 1.3 原核表达系统 | 第20-22页 |
| 1.3.1 原核表达系统简介 | 第20-21页 |
| 1.3.2 本文所用的原核表达系统 | 第21-22页 |
| 1.4 真核表达系统 | 第22-23页 |
| 1.4.1 真核表达系统简介 | 第22-23页 |
| 1.4.2 本文所用的真核表达系统 | 第23页 |
| 1.5 蛋白纯化的一般方法 | 第23-25页 |
| 1.5.1 蛋白纯化依据与原则 | 第23页 |
| 1.5.2 蛋白预处理与粗分离纯化 | 第23-24页 |
| 1.5.3 蛋白精细纯化 | 第24-25页 |
| 1.5.4 去垢剂防止蛋白聚集性研究 | 第25页 |
| 1.6 蛋白结晶 | 第25-26页 |
| 1.6.1 蛋白结晶原理 | 第25页 |
| 1.6.2 蛋白结晶过程 | 第25-26页 |
| 1.6.3 蛋白结晶方法 | 第26页 |
| 1.7 本论文的主要内容和研究意义 | 第26-29页 |
| 1.7.1 技术路线 | 第26-27页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第27页 |
| 1.7.3 研究意义 | 第27-29页 |
| 第二章 MEF2C分段蛋白原核和真核表达载体构建 | 第29-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 基因、菌种和质粒 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.1.4 实验仪器和设备 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 2.2.1 MEF2C分段蛋白原核表达系统构建 | 第32-35页 |
| 2.2.2 MEF2C蛋白真核表达系统构建 | 第35-38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-41页 |
| 2.3.1 MEF2C分段蛋白原核表达系统构建 | 第38-40页 |
| 2.3.2 MEF2C蛋白真核表达系统构建 | 第40-41页 |
| 2.4 本章小结 | 第41-43页 |
| 第三章 MEF2C分段蛋白表达、纯化和晶体初筛 | 第43-57页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第43-45页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第43-44页 |
| 3.1.2 主要溶液配制 | 第44页 |
| 3.1.3 实验仪器和设备 | 第44-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-51页 |
| 3.2.1 蛋白表达条件的筛选 | 第45-48页 |
| 3.2.2 蛋白纯化条件的筛选 | 第48-50页 |
| 3.2.3 蛋白结晶条件的筛选及初步衍射 | 第50-51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-56页 |
| 3.3.1 蛋白表达条件的筛选 | 第51-53页 |
| 3.3.2 蛋白纯化条件的筛选 | 第53-55页 |
| 3.3.3 蛋白结晶条件的筛选及初步衍射 | 第55-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 MEF2C细胞生物学功能研究 | 第57-85页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第57-62页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.2 主要溶液配制 | 第58-59页 |
| 4.1.3 实验仪器和设备 | 第59-60页 |
| 4.1.4 研究所用siRNA及qPCR引物序列 | 第60-62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-68页 |
| 4.2.1 转染效率的检测 | 第62-64页 |
| 4.2.2 MEF2C表达变化对细胞形态的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.3 MEF2C表达变化对细胞增殖的影响 | 第65页 |
| 4.2.4 MEF2C表达变化对细胞周期的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.5 MEF2C表达变化对细胞分化的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.6 MEF2C影响其直接蛋白表达的检测 | 第67页 |
| 4.2.7 模拟失重条件对MEF2C及其直接作用蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-83页 |
| 4.3.1 转染效率的测定 | 第68-69页 |
| 4.3.2 MEF2C表达变化对细胞形态的影响 | 第69-71页 |
| 4.3.3 MEF2C表达变化对细胞增殖的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.4 MEF2C表达变化对细胞周期的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.5 MEF2C表达变化对细胞分化的影响 | 第73-76页 |
| 4.3.6 MEF2C对其直接作用蛋白表达的影响 | 第76-80页 |
| 4.3.7 使用Western Blot法检测MEF2C直接作用蛋白表达情况 | 第80页 |
| 4.3.8 模拟失重条件对MEF2C及其直接作用蛋白表达的影响 | 第80-83页 |
| 4.4 本章小结 | 第83-85页 |
| 第五章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 5.1 结论 | 第85页 |
| 5.2 展望 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 附录Ⅰ MEF2C mRNA序列 | 第95-97页 |
| 附录Ⅱ pET30a(+)质粒图谱 | 第97-99页 |
| 附录Ⅲ pcDNA3.1(+)质粒图谱 | 第99-101页 |
| 附录Ⅳ 在校期间所获奖励情况 | 第101-103页 |
| 附录Ⅴ 在校期间发表论文、申报专利情况 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
