| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 白蚁 | 第12-13页 |
| 1.1.1 白蚁概述 | 第12-13页 |
| 1.2 β-葡聚糖酶 | 第13-17页 |
| 1.2.1 β-葡聚糖概述 | 第13页 |
| 1.2.2 β-葡聚糖酶分类 | 第13-14页 |
| 1.2.3 β-1,3-葡聚糖酶 | 第14-17页 |
| 1.3 几丁质酶概述 | 第17-19页 |
| 1.3.1 昆虫几丁质酶研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 本文的立题依据以及研究内容 | 第19-22页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第19-20页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 黄翅大白蚁转录组数据总结分析 | 第22-28页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 结果 | 第22-25页 |
| 2.2.1 代谢相关基因总结 | 第22-24页 |
| 2.2.2 转录组中表达量较高的基因总结 | 第24-25页 |
| 2.3 讨论 | 第25-27页 |
| 2.4 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 黄翅大白蚁由来的β-1,3(4)-葡聚糖酶基因克隆、表达及酶学性质分析 | 第28-52页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 实验材料、试剂与仪器 | 第28-29页 |
| 3.2.1 材料 | 第28-29页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第29页 |
| 3.3 实验方法与步骤 | 第29-33页 |
| 3.3.1 生物信息学分析 | 第29页 |
| 3.3.2 黄翅大白蚁β-1,3(4)-葡聚糖酶基因克隆 | 第29-30页 |
| 3.3.3 定量PCR检测Mbbgl在黄翅大白蚁中的表达位点 | 第30页 |
| 3.3.4 原核表达载体pMAL-Mbgl的构建 | 第30页 |
| 3.3.5 pMAL-Mbbgl在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达及纯化 | 第30-31页 |
| 3.3.6 葡萄糖标准曲线测定 | 第31页 |
| 3.3.7 Mbbgl重组酶酶学性质分析 | 第31-33页 |
| 3.3.8 TLC分析重组蛋白Mbbgl作用方式 | 第33页 |
| 3.3.9 抑菌实验 | 第33页 |
| 3.4 结果 | 第33-43页 |
| 3.4.1 黄翅大白蚁β-1,3(4)-葡聚糖酶基因Mbbgl的序列分析 | 第33-35页 |
| 3.4.2 定量PCR检测Mbbgl在黄翅大白蚁肠道的表达位点 | 第35-36页 |
| 3.4.3 黄翅大白蚁肠道各部分β-1,3-葡聚糖酶活测定 | 第36页 |
| 3.4.4 pMAL-Mbbgl重组载体的构建及其在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第36-38页 |
| 3.4.5 β-1,3(4)-葡聚糖酶酶学性质分析 | 第38-43页 |
| 3.5 同源建模分析Mbbgl蛋白结构 | 第43-45页 |
| 3.6 Mbbgl密码子优化 | 第45-48页 |
| 3.6.1 pET-22b(+)/optMbbgl表达载体构建 | 第46页 |
| 3.6.2 在大肠杆菌中表达pET-22b(+)/optMbbgl | 第46-47页 |
| 3.6.3 重组蛋白optMbbgl酶学性质测定 | 第47-48页 |
| 3.6.4 optMbbgl动力学参数测定 | 第48页 |
| 3.6.5 抑菌实验 | 第48页 |
| 3.7 讨论 | 第48-51页 |
| 3.8 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 黄翅大白蚁来源几丁质基因在毕赤酵母中异源表达 | 第52-58页 |
| 4.1 引言 | 第52页 |
| 4.2 实验材料、试剂与仪器 | 第52页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第52页 |
| 4.2.2 试剂与仪器 | 第52页 |
| 4.3 实验方法与步骤 | 第52-53页 |
| 4.3.1 表达载体pPICZαA/MbCht的构建 | 第52-53页 |
| 4.3.2 pPICZαA/MbCht电转至毕赤酵母中诱导表达 | 第53页 |
| 4.4 结果 | 第53-55页 |
| 4.4.1 表达载体pPICZαA/MbCht的构建 | 第53页 |
| 4.4.2 pPICZαA/MbCht在毕赤酵母中诱导表达 | 第53-55页 |
| 4.5 讨论 | 第55-57页 |
| 4.6 小结 | 第57-58页 |
| 第五章 总结与展望 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-72页 |
| 附录一 药品试剂以及仪器 | 第60-62页 |
| 附录二 本文中所涉及的引物 | 第62-63页 |
| 附录三 酶活测定所涉及的试剂配方 | 第63-65页 |
| 附录四 Mbbbgl密码子优化后的序列 | 第65-66页 |
| 附录五 本文所涉及的培养基 | 第66-68页 |
| 附录六 毕赤酵母Pichia pastoris GS115感受态细胞的制备以及电转化的方法 | 第68-69页 |
| 附录七 MbCht1TLC结果图 | 第69-70页 |
| 附录八 MbCht基因序列 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第81页 |
