摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 综述 | 第11-21页 |
第一节 细胞内重要的转录因子E2F1 | 第11-17页 |
1.E2F家族简介 | 第11-12页 |
2.转录因子E2F1的结构 | 第12-13页 |
3.转录因子E2F1与细胞周期 | 第13-14页 |
4.转录因子E2F1与细胞凋亡 | 第14页 |
5.转录因子E2F1与肿瘤 | 第14-17页 |
第二节 转录因子DP-1 | 第17-18页 |
1.DP蛋白家族 | 第17-18页 |
2.DP-1蛋白与E2F1 | 第18页 |
第三节 细胞丝氨酸苏氨酸激酶B-Raf | 第18-21页 |
1.B-Raf及其家族 | 第18-19页 |
2.B-Raf与RAS/RAF/MEK/ERK信号通路 | 第19-20页 |
3.B-Raf与肿瘤 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-44页 |
第一节 实验材料 | 第21-23页 |
1.细胞株 | 第21页 |
2.质粒 | 第21页 |
3.引物 | 第21页 |
4.实验试剂和抗体 | 第21-22页 |
5.实验仪器 | 第22-23页 |
第二节 实验方法 | 第23-44页 |
1.质粒的大量提取技术 | 第23-25页 |
2.免疫荧光染色技术 | 第25-28页 |
3.Western blot技术 | 第28-38页 |
4.逆转录PCR技术(Rt-PCR) | 第38-41页 |
5.稳转细胞株的筛选 | 第41-44页 |
第三章 结果与分析 | 第44-51页 |
第一节 HA-ER-E2F1稳转细胞株的建立与筛选 | 第44-45页 |
1.稳转细胞株的建立 | 第44-45页 |
2.稳转细胞株的筛选 | 第45页 |
第二节 在蛋白水平上E2F1激活下游基因DP-1,B-Raf | 第45-49页 |
1.E2F1激活蛋白DP-1,B-Raf的发现 | 第45-47页 |
2.通过western blot技术在H1299细胞中检测E2F1激活DP-1和B-Raf | 第47-48页 |
3.通过免疫荧光染色技术检测E2F1对DP-1的激活 | 第48-49页 |
第三节 在mRNA水平上E2F1上调DP-1 | 第49-51页 |
第四章 讨论 | 第51-53页 |
第一节 细胞转录因子E2F1与下游基因DP-1 | 第51页 |
第二节 细胞转录因子E2F1与下游基因B-Raf | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
感谢 | 第62-63页 |
附录 | 第63页 |