| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-14页 |
| 1. sPLA_2与炎症 | 第11-12页 |
| 2. PLIγ与抗炎 | 第12-13页 |
| 3. 本文研究目的 | 第13-14页 |
| 第2章 华游蛇 PLIγ真核表达载体构建及细胞转染 | 第14-24页 |
| 1. 材料、试剂和仪器 | 第14-16页 |
| 2. 实验方法 | 第16-20页 |
| 2.1 PCR克隆华游蛇 PLI 基因 | 第16-17页 |
| 2.2 构建 TA克隆质粒 pGEM-T/PLIγ | 第17-18页 |
| 2.3 构建重组质粒 pIRES2-EGFP-PLIγ | 第18-19页 |
| 2.4 pIRES2-EGFP-PLIγ转染 THP-1 细胞 | 第19-20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-22页 |
| 3.1 华游蛇 PLIγ的扩增与电泳鉴定 | 第20-21页 |
| 3.2 重组质粒 pIRES2-EGFP-PLIγ的酶切产物鉴定 | 第21页 |
| 3.3 重组质粒 pIRES2-EGFP-PLIγ测序鉴定 | 第21-22页 |
| 3.4 细胞转染结果 | 第22页 |
| 4 小结与讨论 | 第22-24页 |
| 第3章 慢病毒重组载体 PGC-FU-PLIγ-EGFP 的构建及病毒感染 THP-1 细胞 | 第24-34页 |
| 1 材料试剂和仪器 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.1 PGC-FU-PLIγ-EGFP 重组质粒的构建、扩增和鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2 慢病毒 LV-PLIγ-EGFP 表达检测 | 第26-27页 |
| 2.3 慢病毒 LV-PLIγ-EGFP 感染 THP-1 细胞 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-32页 |
| 3.1 慢病毒重组载体 PGC-FU-PLIγ-EGFP 鉴定结果 | 第28-30页 |
| 3.2 慢病毒载体 PGC-FU-PLIγ-EGFP 中 PLIγ表达情况 | 第30-31页 |
| 3.3 病毒 LV-PLIγ-EGFP 感染 THP-1 效率观察 | 第31-32页 |
| 3.4 THP-1 细胞中 PLIγ表达稳定性 | 第32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第4章 PLIγ抑制 LPS 诱导的 THP-1 细胞炎症作用 | 第34-47页 |
| 1. 材料试剂和仪器 | 第34页 |
| 2. 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.1 LPS 诱导 THP-1 细胞炎症实验 | 第34-35页 |
| 2.2 Real-time PCR方法检测 sPLA_2抑制水平 | 第35-36页 |
| 2.3 ELISA 方法检测 THP-1 细胞上清中各类炎症因子的含量 | 第36-37页 |
| 2.4 LPS 诱导及 PLIγ对 THP-1 细胞增殖的影响 | 第37页 |
| 2.5 统计处理 | 第37-38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-43页 |
| 3.1 THP-1 细胞 sPLA_2亚型表达情况 | 第38页 |
| 3.2 Real timePCR 检测 sPLA_2-IIF 和 sPLA_2-X 表达 | 第38-40页 |
| 3.3 PLIγ对 THP-1 细胞分泌炎症因子的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 LPS 诱导及 PLIγ对 THP-1 细胞增殖的影响 | 第41-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 人类炎症相关的 sPLA_2 | 第43-44页 |
| 4.2 sPLA_2与相关炎症因子 | 第44-45页 |
| 4.3 特异性的 sPLA_2抑制剂 | 第45-47页 |
| 第5章 全文总结 | 第47-48页 |
| 结论与下一步工作计划 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
| 综述 | 第55-65页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
