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高温诱导尼罗罗非鱼雌鱼性腺细胞凋亡及相关基因表达变化的研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第13-18页
    1.1 脊椎动物的性别决定类型第13-14页
        1.1.1 遗传性别决定第13-14页
        1.1.2 环境依赖型性别决定第14页
        1.1.3 基因-温度性别决定第14页
    1.2 鱼类精巢、卵巢形态结构及发育的概况第14-15页
    1.3 高温诱导对鱼类的影响及鱼类性腺细胞的发育第15-16页
    1.4 细胞凋亡简介第16-17页
        1.4.1 细胞凋亡概念第16页
        1.4.2 细胞凋亡生物学意义第16页
        1.4.3 细胞凋亡检测方法第16页
        1.4.4 细胞凋亡相关基因第16-17页
    1.5 鱼类细胞凋亡的相关研究第17页
    1.6 本研究的目的意义第17-18页
2 材料与方法第18-25页
    2.1 试验材料第18-19页
        2.1.1 尼罗罗非鱼全雌家系建立与试验处理第18-19页
        2.1.2 样品的采集第19页
    2.2 试验仪器及试剂第19-20页
        2.2.1 试验仪器第19-20页
        2.2.2 试验试剂第20页
    2.3 主要数据库及软件第20页
    2.4 试验方法第20-25页
        2.4.1 尼罗罗非鱼性腺石蜡切片的制备第20页
        2.4.2 性腺组织学检测第20-21页
        2.4.3 测量体长全长第21页
        2.4.4 TUNEL技术步骤第21-22页
        2.4.5 qRT-PCR引物来源及设计第22-23页
        2.4.6 总RNA的提取第23-24页
        2.4.7 第一链cDNA的合成第24页
        2.4.8 反转录模板的检测第24-25页
        2.4.9 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第25页
        2.4.10 标准曲线的建立和重复性分析第25页
        2.4.11 数据分析第25页
3 结果与分析第25-35页
    3.1 高温诱导下尼罗罗非鱼体长全长第25-26页
    3.2 尼罗罗非鱼性腺组织学检测第26-29页
    3.3 高温诱导尼罗罗非鱼雄性率第29-31页
    3.4 末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定性腺细胞凋亡第31-32页
    3.5 高温诱导后尼罗罗非鱼促凋亡和抑凋亡基因的差异表达第32-35页
        3.5.1 RNA质量的检测第32页
        3.5.2 反转录合成cDNA模板第32页
        3.5.3 持家基因和目的基因标准曲线的建立第32-33页
        3.5.4 高温诱导对凋亡基因表达的影响第33-35页
4 讨论第35-39页
    4.1 高温诱导对尼罗罗非鱼不同家系性逆转率的影响第35-36页
    4.2 高温诱导对尼罗罗非鱼不同日龄段性腺组织学的影响第36-38页
    4.3 高温诱导对尼罗罗非鱼中相关凋亡基因的影响第38-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-45页
致谢第45页

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