中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-18页 |
1.1 脊椎动物的性别决定类型 | 第13-14页 |
1.1.1 遗传性别决定 | 第13-14页 |
1.1.2 环境依赖型性别决定 | 第14页 |
1.1.3 基因-温度性别决定 | 第14页 |
1.2 鱼类精巢、卵巢形态结构及发育的概况 | 第14-15页 |
1.3 高温诱导对鱼类的影响及鱼类性腺细胞的发育 | 第15-16页 |
1.4 细胞凋亡简介 | 第16-17页 |
1.4.1 细胞凋亡概念 | 第16页 |
1.4.2 细胞凋亡生物学意义 | 第16页 |
1.4.3 细胞凋亡检测方法 | 第16页 |
1.4.4 细胞凋亡相关基因 | 第16-17页 |
1.5 鱼类细胞凋亡的相关研究 | 第17页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-25页 |
2.1 试验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 尼罗罗非鱼全雌家系建立与试验处理 | 第18-19页 |
2.1.2 样品的采集 | 第19页 |
2.2 试验仪器及试剂 | 第19-20页 |
2.2.1 试验仪器 | 第19-20页 |
2.2.2 试验试剂 | 第20页 |
2.3 主要数据库及软件 | 第20页 |
2.4 试验方法 | 第20-25页 |
2.4.1 尼罗罗非鱼性腺石蜡切片的制备 | 第20页 |
2.4.2 性腺组织学检测 | 第20-21页 |
2.4.3 测量体长全长 | 第21页 |
2.4.4 TUNEL技术步骤 | 第21-22页 |
2.4.5 qRT-PCR引物来源及设计 | 第22-23页 |
2.4.6 总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.4.7 第一链cDNA的合成 | 第24页 |
2.4.8 反转录模板的检测 | 第24-25页 |
2.4.9 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第25页 |
2.4.10 标准曲线的建立和重复性分析 | 第25页 |
2.4.11 数据分析 | 第25页 |
3 结果与分析 | 第25-35页 |
3.1 高温诱导下尼罗罗非鱼体长全长 | 第25-26页 |
3.2 尼罗罗非鱼性腺组织学检测 | 第26-29页 |
3.3 高温诱导尼罗罗非鱼雄性率 | 第29-31页 |
3.4 末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定性腺细胞凋亡 | 第31-32页 |
3.5 高温诱导后尼罗罗非鱼促凋亡和抑凋亡基因的差异表达 | 第32-35页 |
3.5.1 RNA质量的检测 | 第32页 |
3.5.2 反转录合成cDNA模板 | 第32页 |
3.5.3 持家基因和目的基因标准曲线的建立 | 第32-33页 |
3.5.4 高温诱导对凋亡基因表达的影响 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-39页 |
4.1 高温诱导对尼罗罗非鱼不同家系性逆转率的影响 | 第35-36页 |
4.2 高温诱导对尼罗罗非鱼不同日龄段性腺组织学的影响 | 第36-38页 |
4.3 高温诱导对尼罗罗非鱼中相关凋亡基因的影响 | 第38-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45页 |