| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 植物脂氧合酶蛋白的特性 | 第11-15页 |
| 1.1 分布 | 第11页 |
| 1.2 分类 | 第11-12页 |
| 1.3 结构特征和催化位点 | 第12-13页 |
| 1.4 LOX酶活的测定方法 | 第13页 |
| 1.5 酶学特性 | 第13-14页 |
| 1.6 催化机理 | 第14-15页 |
| 2 植物脂氧合酶生理功能 | 第15-18页 |
| 2.1 LOX途径 | 第15-17页 |
| 2.2 植物脂氧合酶生理功能 | 第17-18页 |
| 3 种子萌发与脂氧合酶 | 第18-21页 |
| 3.1 自然条件下种子萌发 | 第18-20页 |
| 3.2 老化条件下种子萌发 | 第20-21页 |
| 4 水稻种胚脂氧合酶的研究进展 | 第21-22页 |
| 5 展望 | 第22页 |
| 6 本研究的目的意义与内容 | 第22-25页 |
| 第二章 水稻成熟和萌发过程中种子脂氧合酶OsLOX2的表达谱 | 第25-39页 |
| 1 材料与方法 | 第25-29页 |
| 1.1 材料 | 第25-26页 |
| 1.2 方法 | 第26-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-36页 |
| 2.1 OsLOX2基因结构与序列分析 | 第29-32页 |
| 2.2 OsLOX2 Real-Time PCR引物的设计与有效性确认 | 第32-34页 |
| 2.3 OsLOX2在成熟植株中的组织表达谱 | 第34页 |
| 2.4 OsLOX2在种胚发育进程中的表达变化 | 第34-35页 |
| 2.5 OsLOX2在种子萌发进程中的表达变化 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 水稻种胚脂氧合酶基因OsLOX2的克隆和亚细胞定位 | 第39-53页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| 1.1 材料 | 第39-40页 |
| 1.2 方法 | 第40-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-51页 |
| 2.1 引物设计及cDNA基因片段的克隆 | 第44-46页 |
| 2.2 细胞定位预测 | 第46-49页 |
| 2.3 细胞定位 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 水稻种胚脂氧合酶OsLOX2的原核表达 | 第53-63页 |
| 1 材料与方法 | 第53-57页 |
| 1.1 材料 | 第53-54页 |
| 1.2 方法 | 第54-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-60页 |
| 2.1 原核表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 2.2 SDS-PAGE分析 | 第58-59页 |
| 2.3 表达载体融合蛋白的活性测定 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第五章 水稻种胚脂氧合酶OsLOX2基因的功能分析 | 第63-83页 |
| 1 材料与方法 | 第64-70页 |
| 1.1 材料 | 第64-65页 |
| 1.2 方法 | 第65-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-81页 |
| 2.1 过表达载体pPZP-LOX2的构建 | 第70-71页 |
| 2.2 人工microRNA干扰载体pPZP-L2的构建 | 第71-73页 |
| 2.3 发卡结构RNAi干扰载体LH-535的构建 | 第73-74页 |
| 2.4 日本晴Tos17插入突变体lox2(Tos17)的鉴定 | 第74-75页 |
| 2.5 转基因植株的鉴定 | 第75-76页 |
| 2.6 荧光定量PCR检测纯合转基因植株和插入突变体中OsLOX2的表达量 | 第76-78页 |
| 2.7 OsLOX2促进种子萌发 | 第78-79页 |
| 2.8 OsLOX2加速种子老化,适度降低OsLOX2表达可以延长种子储藏时间 | 第79-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 第六章 全文总结及讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 附录 | 第93-99页 |
| 1 总DNA的提取(SDS法)及检测 | 第93-94页 |
| 1.1 溶液配制 | 第93页 |
| 1.2 DNA提取步骤 | 第93-94页 |
| 2 植物总RNA的提取 | 第94-96页 |
| 2.1 植物总RNA提取试剂盒提取水稻组织RNA | 第94-95页 |
| 2.2 Trizol法提取水稻组织RNA | 第95-96页 |
| 3 DNA和RNA的检测 | 第96页 |
| 4 植物愈伤的转化、抗性愈伤的筛选和植株再生 | 第96页 |
| 5 配方 | 第96-97页 |
| 6 载体图 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
